Том 22, № 2-2 (2019)

Фактор некроза опухоли альфа (TNFα) выступает как основной про-воспалительный цитокин в иммунных процессах при ревматоидном артрите (РА). При этом активность и функции TNFα могут регулироваться не только растворимыми рецепторами (которые действуют в основном как нейтрализаторы действия), но также количеством, плотностью и ко-экспрессией его мембраносвязанных рецепторов 1 и типа 2 (TNFR1 и TNFR2). Анализ параметров ко-экспрессии TNFR1 и TNFR2 у больных РА по сравнению со здоровыми донорами продемонстрировал, что изменения количества и ко-экспрессии рецепторов типа 1 и типа 2 для TNF-альфа на поверхности иммунокомпетентных клеток ассоциированы с показателями активности заболевания.

В кишечнике обитает огромное количество бактерий, взаимодействующих с иммунной системой хозяина. Нарушение гомеостаза в кишечнике приводит к различным патологическим состояниям, которые необходимо корректировать путем воздействия на микрофлору. В работе представлены данные о влиянии изменения кишечной микрофлоры на жизнеспособность мышей с нарушенной барьерной функцией (Muc2-/-). Выявленная чувствительность Muc2-/-мышей к изменению микрофлоры позволяет предложить данную линию в качестве хорошей модели для тестирования различных способов воздействия на микрофлору.

Нейтрофилы – основные эффекторные клетки иммунного ответа на экзогенные патогены, в том числе, условно-патогенный гриб Aspergillus fumigatus. В очаге воспаления в процессе борьбы с патогеном наблюдают массовую гибель нейтрофилов. Однако в некоторых случаях нейтрофилы выживают и мигрируют в лимфатические сосуды, что имеет значения для окончательной нейтрализации патогена и активации адаптивного иммунного ответа. В данном исследовании была охарактеризована способность нейтрофилов мигрировать в лимфатические сосуды в процессе воспаления, вызванного ингаляцией конидий A. fumigatus. В результате были получены новые данные о динамике миграции нейтрофилов в лимфатические сосуды и о роли нейтрофилов в контроле за диссеминацией конидий в организме.

В работе представлены новые данные, касающиеся экспрессии Т-лимфоцитами плексина В1 – высокоаффинного рецептора для семафорина IV класса Sema4D, экспрессия которого ранее приписывалась исключительно не иммунным клеткам. Обсуждается биологическое значение этого феномена и его роль в регуляции функций Т-лимфоцитов, в первую очередь – клеточной миграции.

Цитокины являются биологическими маркерами, гиперпродукция которых может привести к воспалительной реакции и стать причиной развития патологических реакций. В настоящей работе исследовано содержание IL-17А, IL-17F и IL-13 в сыворотке крови 36 пациентов с приобретенным ангиоотеком в период клинических проявлений. Контрольная группа включала 10 практически здоровых доноров. Данное исследование показало высокий уровень IL-17A, IL-17F у пациентов с приобретенным ангиоотеком, в то время как сравнительный анализ не показал различий в содержании сывороточного IL-13 в исследуемой и контрольных группах. Таким образом, определение уровня IL-17A, IL-17F в сыворотке крови может быть использовано как лабораторный диагностический маркер приобретенного ангиоотека.

В исследование было включено 68 пациентов с артериальной гипертонией 1, 2 и 3 степени, у которых в плазме крови определялись концентрация цитокинов и компонентов системы комплемента до и начала и через 4 недели системной антигипертензивной терапии. У пациентов с артериальной гипертонией до начала системной антигипертензивной терапии обнаружены изменения уровня провоспалительных и противовоспалительных цитокинов и активация системы комплемента пропорционально уровню артериального давления. У больных артериальной гипертонией, достигшим целевых значений артериального давления на фоне проводимой фармакотерапии, выраженность иммунных изменений достоверно ниже, чем у пациентов, у которых артериальное давление не достигало целевого уровня.

На фоне 2 ч иммобилизационного стресса наблюдалось снижение продукции АФК и IL-1β клетками перитонеальной полости мышей. Предварительное введение животным β-эндорфина или динорфина А модулировало эффекты стресса.

Изучен состав лимфоцитов крови, содержание в сыворотке крови Serum CrossLaps и концентрации Urine CartiLaps в моче у 20 здоровых лиц и 74 пациентов обоего пола в возрасте 45,9±11,4 лет с ранними (0‒I ст.) и поздними (III‒IV ст.) стадиями первичного и посттравматического остеоартроза. Выявлено повышение Serum CrossLaps и Urine CartiLaps при 0‒I и III‒IV стадиях первичного остеоартроза и при III‒IV стадиях посттравматического остеоартроза, снижение содержания Т-лимфоцитов за счет (CD3⁺CD4⁺) и (CD3⁺CD8⁺) популяций лимфоцитов. Обнаружены отрицательные корреляционные связи (р<0,05) средней силы (R = –0,66) между (CD3⁺CD4⁺)-лимфоцитами и Urine CartiLaps, а также между (CD3⁺CD8⁺)-клетками (R = –0,70) и (Serum CrossLaps) при III‒IV стадиях первичного и посттравматического остеоартроза. Выводы: ранние стадии первичного остеоартроза отличались от посттравматического наличием признаков дезорганизации хрящевой и костной тканей. III‒IV стадии первичного и посттравматического остеоартроза характеризовались потерями коллагена I-го и II-го типов и признаками депрессии Т-клеточных иммунных реакций, что подтвердило наличие отдельных аспектов общности патогенетических механизмов регуляции ремоделирования костной и хрящевой тканей при поздних стадиях остеоартроза.

Получены два моноклональных антитела, блокирующих активацию комплемента по альтернативному пути (АП) на этапе сборки и активации С3 конвертазы. Гуманизированное антитело hC34, специфичное сайту связывания на участке α’2 фрагмента С3с, ингибировало активацию комплемента человека на 90% in vitro в дозе 3 мкг/мл сыворотки крови. Антитело 3А8, специфичное С3 компоненту комплемента крысы и аналогичное антителу hC34, обладало фармакологической активностью в модели ЗЧМТ, что подтверждалось функциональным и гистологическим исследованием. Полученные результаты указывают на перспективность применения гуманизированного антитела hС34 для лечения патологий центральной нервной системы и других заболеваний с гиперактивацией комплемента.

С помощью флуоресцентно-гистохимических методов исследованы динамика плотности пространственного распределения тучных клеток тела матки крыс и содержание в них катехоламинов, серотонина и гистамина в течение полового цикла, беременности и послеродового периода. При изменениях функционального состояния матки линейная зависимость содержания серотонина и катехоламинов в тучных клетках сохраняется на высоком уровне (в течение полового цикла, беременности) или быстро восстанавливается (в ходе послеродовой инволюции). Рассматривается участие тучных клеток в восстановлении симпатической иннервации матки после родов. Предполагается ведущая роль тучных клеток в паракринной регуляции процессов морфогенеза тканей матки.

Введение двух соединений класса замещенных 1,3,4-тиадиазинов (L-17 и L-14) сопровождалось нормализацией общего количества и фракций лейкоцитов периферической крови у крыс с сахарным диабетом 2 типа, полученным введением никотинамида и стрептозотоцина. L-17 способствовал снижению гипергликемии более эффективно, чем L-14.

Проведено морфологическое и цитохимическое исследование окислительного метаболизма клеток бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) пациентов с различной степенью тяжести хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ). Установлено, что наряду с некрозом клеток определяется энуклеация гранулоцитов и макрофагов, что относится к морфологическому признаку программируемой гибели путем образования внеклеточных ловушек – НЕТозов. Доказана корреляция между показателями НЕТозов, изменением окислительного метаболизма клеток и тяжестью течения ХОБЛ.

Было показано, что пептид активного центра ГМ-КСФ является плюрипотентным колониестимулирующим фактором, обладающим выраженным антибактериальным, противовирусным, иммуностимулирующим, репарационным, радиопротекторным действием in vitro и in vivo. Аналогичными свойствами обладает созданный на его основе косметический препарат АЦЕГРАМ.

Несмотря на хорошо изученную роль адаптера STING в клеточном ответе на цитозольную ДНК, его вклад в активацию программируемой клеточной смерти не рассматривался на должном уровне. В ходе настоящего исследования показано, что активация STING в Т клетках приводит к продукции интерферонов первого типа, апрегуляции экспреcсии группы интерферон-сти му лиру ющих генов (ISG), а также клеточной смерти. Также показано, что клеточная смерть опосредуется UPR (Unfolded Protein Response).

Как известно, маркерами повреждения почек (ПП) принято считать протеинурию, повышенный уровень креатинина сыворотки крови, снижение скорости клубочковой фильтрации, количества выделяемой мочи. При хронической болезни почек данные маркеры выявляют уже в позднюю стадию поражения почек, когда лекарственная терапия не всегда эффективна и процесс поражения почек необратим. В последние годы особое внимание уделяется поиску новых предикторов острого и рецидивов хронического ПП, что способствовало бы выявлению преморбидных патологических изменений в почках, определению степени и характера поражения различных отделов нефрона, оценке выраженности воспаления и интенсивности фиброгенеза. Одним из ранних маркеров ПП является липокалин, ассоциированный с желатиназой нейтрофилов или липокалин-2(NGAL).

Натуральные киллеры относят к лимфоцитам врожденного иммунитета, поскольку они способны проявлять спонтанную противоопухолевую активность без предварительной активации. Согласно недавним исследованиям, у человека некоторые вирусные инфекции, в первую очередь, цитомегаловирусная инфекция, ассоциированы с увеличенным, по сравнению с неинфицированными людьми, количеством циркулирующих NK-клеток с фенотипом CD57⁺NKG2C⁺. Предполагается, что клетки данной субпопуляции обладают характеристиками адаптивных клеток и иммунологической памятью к инфекции HCMV. Данная работа посвящена изучению свойств субпопуляций NK-клеток человека, отобранных по маркерам CD57 и NKG2C, при стимуляции IL-2 и мембраносвязанным IL-21. 

Исследование посвящено определению влияния магнитных железосодержащих наночастиц (МЖНЧ) на функциональное состояние нейтрофильных гранулоцитов крови. Объектом исследования являлись нейтрофильные гранулоциты (НГ) (n=34). Было сформировано 3 группы: контрольная (без инкубации с МЖНЧ); во второй группе при воздействии синтетических магнитных железосодержащих наночастиц ферригидрита (СМЖНЧ), в третьей группе – синтетических магнитных железосодержащих наночастиц ферригидрита, покрытых природным полисахаридом – арабиногалактаном (СМЖНЧА). Концентрации наночастиц ферригидрита составляли 5 мг/мл и 20 мг/мл. Исследовали ранний и поздний хемилюминесцентный ответ. Выявлено, что функциональная активность НГ при воздействии разных экспериментальных типов МЖНЧ изменяется в зависимости от концентрации, при увеличении количества воздействующих наночастиц наблюдается однонаправленная реакция со снижением активности клеток.

Разработана и охарактеризована модель псориазоподобного поражения кожи у мышей при внутрикожном введении рекомбинантного ИЛ-36γ человека. Вызываемое таким образом поражение кожи мышей по совокупности макроскопических (индекс PASI) и микроскопических (акантоз, паракератоз, инфильтрация дермы лейкоцитами) признаков обладает высоким сходством с псориатическим поражением кожи человека. Модель может быть использована для изучения эффективности препаратов для терапии псориаза.

Установлено, что независимо от степени тяжести заболевания на системном уровне повышен синтез IL-4, внутриклеточная экспрессия IL-4 и IL-6 в общей популяции лимфоцитов и в популяции Т-хелперов, а в перитонеальной жидкости увеличен уровень IL-6⁺ лимфоцитов. Изменения синтеза, внутриклеточной экспрессии и сывороточного содержания IL-4 были пропорциональны степени тяжести эндометриоза. При эндометриозе I–II стадий повышалась внутриклеточная продукция IL-5 в общей популяции лимфоцитов и в пуле Т-хелперов, с эндометриозом III–IV стадий увеличивался синтез IL-6 периферическими лимфоцитами, сывороточный уровень IL-4, а также IL-4⁺ и CD4⁺IL-4⁺ лимфоцитов и sCD30 в перитонеальной жидкости. 

Цитокины IL-4, и TNFα принимают участие в патогенезе спонтанной крапивницы и могут рассматриваться в дальнейшем как потенциальные биомаркеры заболевания.

Цель настоящего исследования ‒ изучить влияние одиночных и комбинированных стрессовых воздействий на функции нейтрофилов крови кроликов в эксперименте. Для эксперимента использовали 10 кроликов-самцов, возраст ‒ 8 месяцев, живая масса 3,40±0,73 кг. Транспортный стресс первой серии исследований вызывали перевозкой животных в легковом автомобиле. Во второй серии модель иммобилизационного стресса была достигнута за счет фиксирования животного за конечности в спинном положении к станку для мелких животных. В заключительной третьей серии проводили комбинацию воздействий (иммобилизация, затем, через трое суток, транспортировка). Определяли фагоцитарную активность нейтрофилов крови, фагоцитарный индекс, индекс переваривания (киллинг). Показано, что комбинация стрессовых воздействий негативно влияет не только на фагоцитарную активность нейтрофилов непосредственно при их наслоении, но и на восстановление функциональных систем фагоцитов крови в постстрессовый период по сравнению с одиночными стрессами.

В исследовании принимали участи здоровые женщины, средний возраст 45,0±3,41 год. Все пациентки получили однократную процедуру биоревитализации кожи лица, были оценены некоторые показатели системного и тканевого иммунитета. При анализе количества иммунных клеток в коже до и после процедуры было обнаружено увеличение в два раза количества CD3⁺, CD4⁺, CD8⁺, количество CD20+ практически не менялось. При оценке иммуноглобулинов М, G в коже до и после процедуры наблюдалось снижение этих показателей, в то время как IgA практически не менялся. Результаты по содержанию иммуноглобулинов в коже сочетаются с результатами по содержанию тех же показателей в крови. При оценке показателей клеточного иммунитета крови выяснилось, что клеточный состав крови практически не меняется. Достоверные изменения произошли только в содержании абсолютного и относительного количество CD3^–CD56⁺. Эти показатели достоверно увеличились. 

Современные методы многоцветной проточной цитометрии в сочетании с технологиями MHCмультимеров позволяют не только идентифицировать и выделять популяции цитотоксических Т-лим фо ци тов (ЦТЛ), но также вести фенотипическое исследование уровня дифференцировки, функциональных особенностей данных клеток, и даже исследовать распределение субпопуляций Т-кле ток памяти внутри популяций, специфичных к конкретным эпитопам опухолевых антигенов. В настоящем исследовании мы оценили уровень дифференцировки и содержание субпопуляций Т-кле ток памяти в популяциях цитотоксических Т-лимфоцитов, специфичных к эпитопам антигена HER2/neu (HER2), с использованием метода окрашивания антиген-специфичес ких CD8+ Т-лим фо ци тов MHC-мультимерами и многоцветной проточной цитометрии. В результате исследования популяции in vitro активированных HER2-специфичных ЦТЛ были проанализированы по фенотипу и разделены на основные субпопуляции, выделяемые исследователями в пуле циркулирующих эффекторных CD8+ Т-клеток. Полученные HER2-специфичные Т-клетки в значительной степени (порядка 40–50%) имеют фенотип ТSCM – популяции, способной к наиболее выраженному противоопухолевому иммунному ответу за счет сочетания эффекторных свойств со способностью к самоподдержанию.

Дендритные клетки (ДК) регулируют иммунные ответы, модулируя Т- и В-клетки в направлении эффекторных или толерогенных ответов. В этом исследовании оценили влияние BAY 11- 7082 на формирование дендритных клеток мышей линии C57Bl/6 in vitro в присутствии рекомбинантного IL-10 или TGF-β. Было показано, что добавление BAY 11-7082 в культуру незрелых ДК мышей линии C57Bl/6 не оказывал значительного влияния на экспрессию молекул созревания дендритных клеток (CD80, CD86). При использовании BAY 11-7082 в сочетании с IL-10 или TGF-β, снижал экспрессию этих молекул. Совместное культивирование ДК со спленоцитами в присутствии BAY 11-7082 и IL-10/TGF-β способствовало дифференцировке регуляторных T-клеток (CD4⁺CD25^hiFoxP3⁺) и не способствовало дифференцировке CD4⁺ T-клеток, продуцирующих IL-10. 

Аллогенные биоматериалы (АБ) после имплантации в дефект мышцы голени крысы и рог матки крысы способствуют регенерации тканей за счет миграции М1 макрофагов, экспрессирующие провоспалительные факторы ‒ TNFα, IL-1. Они ингибируют миграцию М2 макрофагов, факторов фиброза, способствуют миграции и дифференциации миоцитов. В ишемически поврежденном миокарде после имплантации АБ напротив обнаруживался дефицит макрофагов CD68, но и высокая экспрессия клетками Timp2 по сравнению с контролем, что могло способствовать снижению площади рубца. После введения АБ в мышечных тканях выявлены резидентные макрофаги с фенотипом IL1⁺/CD68⁺/PCNA⁺/Хейл⁺/vimentin⁺/FGF1^–/TGF-β1^–. 

Методом конфокальной флуоресцентной микроскопии было показано, что стеариламин (СА) в концентрации 0,2 мг/мл вызывает образование нейтрофильных внеклеточных ловушек. По сравнению с форболовым эфиром миристат ацетата (ФМА) – классическим активатором нетоза – при воздействии СА этот процесс протекает быстрее (30‒60 мин), тогда как при действии ФМА за 2‒3 часа. С помощью люминол-зависимой хемилюминесценции (ХЛ) было показано, что СА не активирует НАДФН-оксидазу. СА дозозависимо подавлял кислородный взрыв (КВ) клеток, стимулированных ФМА, зимозаном и латексом. Прямое доказательство того, что активные формы кислорода (АФК) не требуются в нетозе, было получено на примере нейтрофилов, выделенных из крови пациентов с хронической гранулематозной болезнью (ХГБ). Из результатов следует, что образование нейтрофильных внеклеточных ловушек под действием СА протекает по неклассическому механизму.

На модели диффузного токсического повреждения печени тетрахлорметаном (CCl4) и его коррекции аминофталгидразидом (АФГ) у крыс проведена оценка реакции тучных клеток (ТК) и степени фиброза. Структурные нарушения и угнетение регенераторных процессов в печени в условиях химической травмы сопровождались усилением миграции ТК в портальную строму и увеличением содержания секреторных гранул в них. Применение АФГ способствует нормализации площади, занимаемой коллагеном в ткани печени, и снижает количество ТК, но поддерживает высокое содержание секреторных гранул в них.

Воспроизведена в системе in vitro модель бактериального процесса под действием fMLP, позволившая выявить особенности трансформации CD66b⁺CD33⁺CD16⁺CD11b⁺ нейтрофильных гранулоцитов (НГ). Выявлены разнонаправленные эффекты моновлияния пептидов и rIFNα2b на экспрессию изучаемых маркеров НГ у условно-здоровых детей. Модулирующее влияние rIFNα2b на трансформированный fMLP фенотип НГ сопряжено с поляризацией в противовоспалительный фенотип. 

В последнее время широкое внимание уделяется применению биоматериалов для целей регенеративной медицины и тканевой инженерии, так как они представляют собой не только структурный каркас для клеточных популяций, но и способны оказывать влияние на функции различных типов клеток. При этом перспективным является направление по разработке биоматериалов на основе белков шелка (например, фиброина или спидроина), которые имеют оптимальные механические характеристики, а также обладают регенеративной активностью. В ходе работы мы продемонстрировали, что композитные матриксы на основе фиброина с добавлением желатина обладают провоспалительными свойствами in vitro и in vivo, причем эти свойства зависят от конфигурации скаффолдов. Так, культивирование мышиных эмбриональных фибробластов (МЭФ) на трехмерных (3D), но не двумерных (2D) фиброин/желатиновых матриксах приводит к увеличению экспрессии в клетках молекул адгезии ICAM-1 и VCAM-1, а также экспрессии провоспалительных цитокинов TNF и IL-6. Подкожное введение трехмерных фиброин/желатиновых микрочастиц мышам способствует инфильтрации кожи моноцитами и ускоряет заживление полнослойных кожных ран, а имплантация трехмерных матриксов под капсулу почки приводит к кластеризации лимфоцитов и образованию примитивной лимфоидной ткани в импланте. Таким образом, наши данные свидетельствуют об иммуномодулирующих свойствах фиброиновых матриксов, которые могут быть полезны в тканевой инженерии и в регенеративной медицине.

Цель исследования – оценка эффективности лечения гнойных ран при местном сочетанном использовании милиацила и КВЧ-терапии у больных с сахарным диабетом на основе определения содержания цитокинов. У 35 больных основной группы в местном лечении ран использовали милиацил и КВЧ-терапию, у 35 больных контрольной группы применяли только милиацил и определяли уровень ФНОα, ИФНγ, ИЛ-4, ИЛ-10 в сыворотке крови при поступлении в стационар, на 7-й день и по окончании лечения. В результате проведенного лечения у пациентов основной группы наблюдали более выраженное увеличение уровня цитокинов (ИФНγ, ИЛ-4) и их снижение (ИЛ-10, ФНОα) по сравнению с пациентами контрольной группы. Определена эффективность лечения гнойных ран у больных с сахарным диабетом при местном использовании милиацила и КВЧ-терапии на основе определения содержания цитокинов.

Использование для базисной терапии язвенного колита (ЯК) противовоспалительных средств (5-аминосалициловой кислоты (5-АСК), глюкокортикоидов) ограничено широким спектром побочных эффектов. Цель работы ‒ изучить влияние ректальных суппозиториев оригинального состава с витамином D3 на концентрацию в сыворотке IgG, IgM и IL-8 при экспериментальном ЯК. Рабoта выпoлнена на 70 белых крысах линии Wistar, ЯК моделировали двухэтапным введением 3% оксазолона, витамин D3 в составе ректальных суппозиториев оригинального состава на основе полиэтиленгликоля применяли каждые 12 часов, в группе сравнения применяли ректальные суппозитории с 5-АСК. Концентрацию в сыворотке IL-8, IgG и IgM определяли с помощью специфических тест-систем для крыс на иммуноферментном анализаторе на 2, 4 и 6 сутки эксперимента. Установлено, что при экспериментальном оксазолон-индуцированном язвенном колите в сыворотке крыс увеличивается концентрация IL-8, IgG и IgM на 2, 4 и 6 сутки эксперимента. Применение витамина D3 в составе ректальных суппозиториев оригинального состава ежедневно с интервалом в 12 ч при экспериментальном ЯК приводит к снижению концентрации IL-8 на 6 сутки, а концентрации IgG и IgM – на 4 и 6 сутки наблюдения.

Впервые охарактеризована перестройка углеводного и энергетического метаболизма макрофагов человека, активированных агонистом рецептора NOD1 ‒ N-ацетил-D-мурамил-L-аланилD-изоглутамил-мезо-диаминопимелиновой кислотой (М-триДАП) в сопоставлении с эффектами агониста TLR4 ‒ липополисахарида (ЛПС). Показаны возможности модуляции выработки цитокинов макрофагами с помощью ингибиторов гликолиза.

Проводилось определение содержания эндотелиальных клеток-предшественников в пуповинной крови у новорожденных, родившихся у матерей с преэклампсией и без преэклампсии. Фенотипирование эндотелиальных клеток пуповинной крови осуществлялось методом проточной цитофлуориметрии, циркулирующие эндотелиальные клетки (ЦЭК) определяли как: CD45^–, CD133⁺, VEGFR2⁺, CD34^–, эндотелиальные клетки-предшественники (ЭПК) определялись как: CD45^–, CD133⁺, VEGFR2⁺, CD34⁺. Выявлено снижение как общего количество циркулирующих эндотелиальных клеток, так и эндотелиальных клеток-предшественников у недоношенных новорожденных по сравнению с доношенными детьми. В группах недоношенных и доношенных новорожденных, родившихся от матерей с преэклампсией, было достоверно выше только количество ЭКП, по сравнению с новорожденными от матерей без преэклампсии. 

В работе исследовано влияние кондиционных сред М1 и М2 макрофагов на фенотип и пролиферацию клеток линии нейробластомы человека SH-SY5Y. Установлено, что кондиционные среды М2-макрофагов, генерируемых в присутствии ГМ-КСФ в условиях дефицита ростовых факторов, оказывают выраженный стимулирующий эффект на пролиферацию клеток линии SH-SY5Y. Уровень экспрессии CD271, низкоаффинного рецептора к фактору роста нервов (NGF), коррелирует с морфологией клеток: в культурах с преобладанием нейроноподобных клеток («N-type») количество CD271⁺ клеток значительно больше по сравнению с культурами, где преобладают клетки с морфологией мезенхимальных/стромальных клеток («S-type»). Получены предварительные данные, свидетельствующие о выраженных гуморальных нейропротективных эффектах М2 макрофагов. 

Соя и арахис относятсяк наиболее сильным пищевым аллергенам среди всех бобовых растений. На сегодняшний день аллергены этих бобовых по ряду причин остаются недостаточно доступными в клинической практике. В связи с этим целью работы было получение белковых экстрактов из сои и арахиса и оценка их биохимических и аллергенных свойств. Получение раствора белково-полисахаридных комплексов проводили методом водно-солевой экстракции, определение содержания белка проводили методом Бредфорда, изучение белкового состава проводили методом вертикального электрофореза в полиакриламидном геле. Изучение аллергенных свойств проводили методом торможения связывания sIgE. В полученных белковых экстрактах были охарактеризованы белки, которые по молекулярной массе относятся к аллергенам купиновой, проламиновой, профилиновой фракциям белков и betv 1 подобным белкам. Проведенное исследование отдельных белковых фракций и дальнейшее сопоставление их аллергенных свойств существенно дополнит компонентную диагностику, которая активно внедряется в клиническую практику.

Нейтрофилы – первая линия защиты при инфекционных заболеваниях. Вклад нейтрофилов в патогенез туберкулеза противоречив и не до конца изучен. В данном исследовании мы провели анализ гетерогенности популяций нейтрофилов у больных туберкулезоми здоровых добровольцев. У больных туберкулезом отмечается увеличение количества нейтрофилов низкой плотности по сравнению со здоровыми добровольцами. Нами было выявлено, что популяция нейтрофилов низкой плотности гетерогенна и содержит субпопуляцию активированных клеток.

Работа была направлена на определение возможности активации лимфоцитов и натуральных киллеров при добавлении различных концентраций ИНФ-γ in vitro. Результаты исследования показали, что интерферон-гамма способствует созреванию эффекторных клеток Т-звена иммунной системы.

Охарактеризована роль нарушений JAK-STAT-сигнальной трансдукции и SOCS-регуляции в цитокин-зависимой активации при гнойно-воспалительных заболеваниях мягких тканей.

В настоящей работе было показано, что IFNα-индуцированные ДК (ИФН-ДК), нагруженные лизатом аутологичных опухолевых клеток пациентов с злокачественными глиомами головного мозга (ДК_ЛИЗ) более эффективно стимулируют пролиферативный ответ аутологичных Т-клеток по сравнению с ненагруженными ИФН-ДК (ДК_ЛПС), не вызывая при этом значимую индукцию апоптоза CD4⁺ и CD8⁺ Т-клеток. Установлено, что ДК_ЛИЗ индуцируют активацию цитотоксических CD8⁺ Т-клеток (в тесте дегрануляции) в культурах аутологичных мононуклеарных клеток анализируемых больных. 

Установлено, что культивирование фибробластов в условиях гипоксии приводит к снижению их морфологической гетерогенности, повышению пролиферативной активности и жизнеспособности клеток. Вызывает угнетение синтеза компонентов внеклеточного матрикса (коллагена и эластина) и снижение экспрессии рецептора гиалуроновой кислоты (CD44). Длительность гипоксии обусловливает степень снижения.

На данный момент дендритные клетки (ДК) широко используют для получения вакцин для лечения различных видов заболеваний, таких как злокачественные новообразования, аутоиммунные расстройства, реакция отторжения и РТПХ. Для управления функциональными свойствами ДК их трансфицируют различными иммунорегуляторными белками, в т. ч. ИЛ-10. В данной работе выполнена оптимизация метода электрической трансфекции (электропорации) ДК ДНКплазмидой, кодирующей ИЛ-10. Эффективность электропорации (ЭП) ДК достигает 45‒72% при клеточной смерти ниже 7%. Показана активная экспрессия ИЛ-10 трансфицированными ДК в течение 3 суток после ЭП. По результатам работы ЭП признана эффективным методом для получения трансфицированных ДК для производства клеточных вакцин.

Изучен уровень MMP-2, TIMP-2 и их соотношения в сыворотке крови с целью выявления предикторов тяжелого течения ОПП для начала проведения ранней заместительной почечной терапии после АКШ. В исследовании приняли участие 60 пациентов с ИБС обоего пола от 45 до 74 лет до и после АКШ. Выявлены статистически значимые различия MMP-2, TIMP-2 и их соотношения в сыворотке крови у пациентов с ОПП до и после АКШ разных групп. Динамика индекса соотношения MMP-2/TIMP-2 в двух сравниваемых группах больных с ОПП была разной. У пациентов I группы в первые сутки после АКШ показатель достоверно снижался, с последующим существенным нарастанием на 2-е и высокими значениями к 7-м суткам после АКШ. У пациентов II группы определена волнообразная динамика MMP-2/TIMP-2: повышение в первые сутки, значимое снижение на 2-е и двукратное увеличение на 7-е сутки. У пациентов с ХБП установлена диагностическая и прогностическая значимость уровня MMP-2 на всех этапах мониторинга.

Целью работы стало изучить иммунорегуляторные свойства МВ, продуцируемых МСК и их вклад в прорегенераторное действие МВ на почечную ткань. Эксперименты проведены на линейных мышах C57Bl6 возрастом 3‒4 месяца. Острую почечную недостаточность (ОПН) индуцировали однократным введением 50% глицерола. Мезенхимальные стволовые клетки получали из костного мозга здоровых животных, культивировали в стандартных условиях. Микровезикулы (МВ) получали путем центрифугирования при 10000 g супернатанта МСК после индукции апоптоза путем культивирования в условиях депривации кислорода и в бессывороточной среде в течение суток. Показано, что МВ оказывают положительный эффект на восстановление выделительной функции почек на уровне, сопоставимом с эффектом, оказываемым МСК. Использование МСК и МВ в лечении ОПН приводило практически к одинаковому результату: на 4-е сутки уровень мочевины составил 9,3 мкг/мл и 9,37 мкг/мл соответственно, что на 25% ниже, чем в глицеролконтроле. К 8-м суткам уровень мочевины составил 7,9 мкг/мл после введения МСК и 7,6 мкг/мл после введения МВ, что на 21% ниже, чем в глицерол-контроле. Показано, МВ, продуцируемые МСК, дозозависимо стимулируют пролиферацию как спленоцитов, так и клеток почечной ткани. Для исследования устойчивости к апоптозу, использовали спленоциты как от интактных мышей, так и от мышей с глицерол-индуцированной ОПН. Добавление МВ вызывает снижение уровня апоптоза как у интактных мышей (21,73%) так и мышей с ОПН (13,28%). Соответственно, обратнопропорционально, увеличивался процент клеток, находящихся в S/M фазе клеточного цикла.

Обследованы дети с хроническим тонзиллитом на фоне цитомегаловирусной или вирус Эпштейна-Барр инфекции. В качестве лабораторных показателей локального и общего цитокинового статуса исследовали ИЛ-1β, ИЛ-6, ФНОα, ИЛ-10 в сыворотке крови и смывах с миндалин. Выявлено нарушение равновесия провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в группе пациентов с хроническим тонзиллитом. Сопутствующая герпесвирусная инфекция усугубляет выявленные тенденции, приводя к более значимому локальному нарушению антимикробной защиты.

Установлено, что в условиях хронического холодового стресса у мышей снижалось абсолютное и относительное количество антителообразующих клеток в селезенке. Блокада опиатных рецепторов приводила к отмене угнетающего влияния стресса на антителогенез.

Под наблюдением находились пациенты с диагнозом острый необструктивный (ОНП) и обструктивный пиелонефрит (ООП) (соответственно 31 и 30 пациентов), проходившие стационарное лечение в урологическом центре НУЗ Научный клинический центр ОАО «РЖД». Определяли уровень цитокинов, компонентов комплемента и их ингибиторов в плазме крови и первой порции утренней мочи, фагоцитарную и кислородзависимую активность нейтрофилов циркулирующей крови. На системном уровне у больных ОНП, в большей степени при ООП, до начала лечения установлено повышение концентрации провоспалительных цитокинов (TNFα, IL-6, IL-8 и IFNγ), IFNα, IL-4 и IL-10, компонентов комплимента С₃ и С_5а, снижение уровня IL-1RA и регулятора системы комплимента фактора Н, снижение активности и интенсивности фагоцитоза нейтрофилов периферической крови при повышении активности кислородзависимых систем. До лечения на местном уровне (в моче) у больных с ОНП установлено повышение концентрация всех изученных цитокинов, кроме IL-4, компонентов С₃ и С₅ и снижение IL-1RA. При ООП изменения были более выраженными, за исключением сниженного уровня фактора Н и sIgA. 

Исследовали продукцию активных форм кислорода лейкоцитами крови и костного мозга в реакции люминолзависимой хемилюминесценции под действием неопсонизированного зимозана и зимозана, опсонизированного свежей или инактивированной при 56 °C аутологичной сывороткой. Установлено, что повышение показателей хемилюминесценции имеет место во всех трех вариантах активации фагоцитов, но в наибольшей степени оно выражено при использовании свежей сыворотки.

Представлены возможности гликоэррея – уникального метода для изучения углевод-свя зыва ю щих белков, к которым относятся основные компоненты иммунной системы млекопитающих – антитела и лектины. Показано, что эррей является гибким инструментом и может быть направленно изменен для решения широкого круга разнообразных задач как фундаментального, так и прикладного характера.

В исследование было включено 104 пациента, госпитализированных в неврологическое отделение БМУ «Курская областная клиническая больница» с хронической ишемией мозга (ХИМ) на фоне гипертонической болезни II стадии, разделенных поровну по I и II стадии заболевания. В крови (плазма, нейтрофилы и эритроциты) определяли параметры иммунного и метаболического статуса с оценкой взаимосвязей между изученными показателями. У пациентов с ХИМ I и II стадии установлено, что достоверных взаимосвязей больше у пациентов с ранней стадией заболевания (30) по сравнению с таковыми у пациентов с ХИМ II стадии, что, вероятно, свидетельствует о большей дезадаптации механизмов поддержания иммунного и метаболического гомеостаза у пациентов с ХИМ II стадии, по сравнению с больными I стадией болезни.

Отсутствие эффективных вакцин против вируса Эбола инициирует поиск новых подходов к решению этой проблемы. Одним из перспективных направлений в разработке противовирусных вакцин является конструирование ДНК-вакцин, кодирующих искусственные полиэпитопные иммуногены. Ранее с использованием оригинального программного обеспечения мы провели дизайн двух полиэпитопных Т-клеточных иммуногенов, содержащих цитотоксические и Т-хелперные эпитопы вируса Эбола и показали, что созданные на их основе ДНК-вакцинные конструкции обеспечивают синтез целевых мРНК и белков в культуре эукариотических клеток. В рамках данной работы мы показали, что спроектированные ДНК-вакцинные конструкции индуцируют вирус-специфические ответы CD4⁺ и CD8⁺ T-лимфоцитов у иммунизированных мышей. 

Для обеспечения эффективности ежегодной профилактики гриппа с помощью вакцин эксперты Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) издают рекомендации по штаммовому составу. В последние годы произошел ряд событий, вплоть до отсрочки рекомендации на 1 месяц, которые ставят под угрозу своевременное обеспечение населения эффективными и безопасными вакцинами против гриппа с актуальным штаммовым составом в достаточных количествах.

Получен атоксичный рекомбинантный пневмолизин (rPLY) Streptococcus pneumoniae. Изучена иммуногенная и протективная активность rPLY. Показано, что в сыворотках мышей после двукратного введения rPLY увеличивается титр IgG до 32 раз по сравнению с сыворотками интактных мышей. После третьего введения rPLY происходит увеличение титра сывороточных IgG до 15 раз по сравнению с исходным уровнем антител после второй иммунизации. Выявлена протективная активность rPLY в опыте активной защиты при внутрибрюшинном заражении мышей S. pneumoniae.

Вирус папилломы человека является самым распространенным среди всех инфекций вирусной этиологии, передаваемых половым путем. Вызывает ВПЧ-ассоциированные заболевания, которые приводят к серьезным последствиям для здоровья человека. Персистенция ВПЧ высокого онкогенного риска на протяжении длительного времени может вызывать развитие рака шейки матки. Эффективным методом профилактики ВПЧ-ассоциированных заболеваний является вакцинация, показавшая безопасность и высокую эффективность.

Создание универсальной вакцины против гриппа является актуальной задачей. Одним из подходов к созданию универсальной вакцины против гриппа является конструирование искусственных иммуногенов, содержащих консервативные фрагменты (эпитопы) белков различных субтипов вируса гриппа. Ранее в ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» были сконструированы ДНК-вакцинные конструкции – кандидаты универсальной вакцины против вируса гриппа А, кодирующие искусственные антигены, сконструированные на основе консервативных фрагментов стебля гемагглютинина вируса гриппа A двух подтипов H1N1 и H3N2, а также консервативного белка M2. В данной статье представлены результаты по исследованию Т-клеточного иммунного ответа у мышей, иммунизированных ДНК-вакцинными конструкциями, кодирующими спроектированные антигены вируса гриппа.

Отечественному законодательству известно понятие генодиагностика, однако важнейшие вопросы, связанные с ее проведением (о разрешенных и запрещенных к проведению разновидностях генодиагностики, о гарантиях не дискриминации и конфиденциальности по итогам таковой процедуры, о судьбе генетических образцов остающихся после нее), остаются не урегулированными. В рамках данной статьи автор рассматривает примеры нормативного регулирования упомянутых вопросов в зарубежных государствах, предлагая разумно использовать зарубежный опыт.

Первичные иммунодефициты (ПИД) – разнородная группа генетически детерминированных заболеваний, включающая более 330 нозологий. Раннее выявление ПИД и подбор адекватной терапии существенно улучшает прогноз заболевания, повышает качество и продолжительность жизни пациентов. Основным инструментом для решения поставленных задач является создание регистра ПИД. Региональный регистр ПИД Республики Башкортостан (РБ) создан на базе Республиканской детской клинической больницы (РДКБ) г. Уфы и к марту 2019 года включал 223 человека. В настоящее время в РДКБ г. Уфы наблюдаются 126 детей, 43 пациента переведены во взрослую сеть. Отличительными особенностями регионального регистра РБ является наличие пациентов, которым диагноз ПИД установлен на аутопсии, а также отсутствие больных с синдромом Ниймиген. Решение вопросов, связанных с диагностикой и лечением ПИД, возможно лишь при государственной поддержке и совместной работе врачей различных специальностей.

Выявлена связь полиморфных участков rs2239815 гена MAPK8, rs1053023 гена STAT3, rs4143094 гена GATA3 и rs28362491 гена NF-kB1 с абсолютным и относительным количеством CD194 лимфоцитов, абсолютным и относительным числом CD3+CD4+ лимфоцитов, а также с абсолютным содержанием CD3⁺ и CD3⁺CD84 лимфоцитов в крови у лиц, подвергшихся хроническому радиационному воздействию. 

На 62 крысах Вистар с 30-дневным, в большей степени с 60-дневным введением этанола, установлено биохимическими и морфологическими методами развитие токсического поражения печени. На фоне 60-дневной хронической алкогольной интоксикации, по сравнению с 30-дневным введением этанола, установлена более выраженная супрессия формирования адаптивной клеточной и гуморальной форм иммунного ответа на эритроциты барана, снижение фагоцитарных возможностей нейтрофилов при повышении их кислород-зависимой активности.

В настоящее время грибы рода Candida претендуют на роль предикторов хронического воспаления и процессов инсулинорезистентности. В работе исследован вклад грибковой сенсибилизации на примере Candida albicans в развитие гиперчувствительности к пищевым антигенам и в патогенез метаболического синдрома.

Настоящее исследование представляет собой один из этапов изучения антимикробного действия гексахлороплатината триметиламмония на бактерии Escherichia coli.