Применение лизата тромбоцитов для увеличения ростстимулирующего эффекта амниотической мембраны in vitro

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Цель работы — отработать методику насыщения консервированной амниотической мембраны (АМ) лизатом богатой тромбоцитами плазмы (БоТП) и оценить ростстимулирующий эффект комбинации АМ и лизата БоТП in vitro.

Материалы и методы. В эксперименте использовали образцы АМ, консервированные тремя способами: силиковысушивание, лиофилизация, криоконсервирование. На основе крови добровольцев готовили лизат БоТП. В процессе экспозиции АМ с лизатом БоТП определяли оптимальное время насыщения консервированных АМ лизатом, оценивали объем лизата, который может адсорбировать 1 см2 АМ. Оценку ростстимулирующего эффекта трансплантатов АМ проводили в культуре буккального эпителия человека. Динамику роста клеток оценивали через 1, 2 и 3 сут с момента посева.

Результаты. В присутствии лизата БоТП масса силиковысушенных АМ увеличивалась в 4,2 раза, лиофилизированных АМ — в 4,8 раз, криоконсервированных АМ — в 1,8 раз. Наиболее эффективно адсорбировали лизат БоТП образцы АМ, полученные путем лиофилизации. Для полного насыщения АМ достаточно 5 мин экспозиции с лизатом БоТП. АМ без лизата БоТП не давали ростстимулирующего эффекта.

Заключение. При сравнении опытов с лизатом БоТП без АМ и АМ с лизатом БоТП установлено, что наибольшая стимуляция роста клеток происходила при использовании лиофилизированной АМ и лизата БоТП. Насыщение лизатом БоТП криоконсервированной АМ было неэффективным, а при использовании силиковысушенной АМ, пропитанной лизатом БоТП, наибольший ростстимулирующий эффект наблюдался на 1-е сутки.

Об авторах

Дмитрий Андреевич Боженко

Национальный медицинский исследовательский центр НИИ глазных болезней им. Гельмгольца

Email: panacelium@gmail.com

аспирант, офтальмолог

Россия, Москва

Екатерина Валериановна Ченцова

Национальный медицинский исследовательский центр НИИ глазных болезней им. Гельмгольца

Email: chentsova27@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8394-1038
SPIN-код: 8191-8338

д-р мед. наук, профессор, начальник отдела травматологии и реконструктивной хирургии

Россия, Москва

Наталья Валерьевна Боровкова

Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского

Email: borovkovanv@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8897-7523
SPIN-код: 9339-2800

д-р мед. наук, заведующая отделением биотехнологий и трансфузиологии

Россия, Москва

Иван Николаевич Пономарев

Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского

Email: rzam@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-2523-6939
SPIN-код: 4705-9314

канд. мед. наук, ст. научн. сотр.

Россия, Москва

Майя Викторовна Сторожева

Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского

Email: Mayya.storozheva@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-1927-2404
SPIN-код: 7789-3277

научн. сотр. отделения биотехнологий и трансфузиологии

Россия, Москва

Максим Сергеевич Макаров

Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского

Email: mcsimmc@yandex.ru
SPIN-код: 3543-5800

канд. биол. наук, ст. научн. сотр. отделения биотехнологий и трансфузиологии

Россия, Москва

Павел Васильевич Макаров

Национальный медицинский исследовательский центр НИИ глазных болезней им. Гельмгольца

Автор, ответственный за переписку.
Email: makarovpavel61@mail.ru

д-р мед. наук, вед. научн. сотр.

Россия, Москва

Список литературы

  1. Шевлюк Н.Н., Гатиатуллин И.З., Стадников А.А. Особенности репаративных гистогенезов при использовании биопластических материалов // Журнал анатомии и гистопатологии. 2020. Т. 9, № 1. С. 86–93. doi: 10.18499/2225-7357-2020-9-1-86-93
  2. Nejad A.R., Hamidieh A.A., Amirkhani M.A., Sisakht M.M. Update review on five top clinical applications of human amniotic membrane in regenerative medicine // Placenta. 2021. Vol. 103. P. 104–119. doi: 10.1016/j.placenta.2020.10.026.
  3. Cirman T., Beltram M., Schollmayer P., et al. Amniotic membrane properties and current practice of amniotic membrane use in ophthalmology in Slovenia // Cell and Tissue Banking. 2013. Vol. 15, No. 2. P. 177–192. doi: 10.1007/s10561-013-9417-6
  4. Le Q., Deng S.X. The application of human amniotic membrane in the surgical management of limbal stem cell deficiency // Ocul Surf. 2019. Vol. 17, No. 2. P. 221–229. doi: 10.1016/j.jtos.2019.01.003
  5. McDaniel J.S., Wehmeyer J.L., Cornell L.E., et al. Amniotic membrane allografts maintain key biological properties post SCCO2 and lyophilization processing // J Biomater Appl. 2021. Vol. 35, No. 6. P. 592–601. doi: 10.1177/0885328220952585
  6. Walkden A. Amniotic Membrane transplantation in ophthalmology: an updated perspective // Clin Ophthalmol. 2020. Vol. 14. P. 2057–2072. doi: 10.2147/OPTH.S208008
  7. Etulain J. Platelets in wound healing and regenerative medicine // Platelets. 2018. Vol. 29, No. 6. P. 556–568. doi: 10.1080/09537104.2018.1430357
  8. Боровкова Н.В., Макаров М.С., Пономарев И.Н., и др. Экспериментальное исследование влияния биологических покрытий со стабилизированными или нестабилизированными тромбоцитами на репаративный процесс в ране, эквивалентной глубокому ожогу // Клеточные технологии в биологии и медицине. 2020. № 3. С. 170–177. doi: 10.47056/1814-3490-2020-3-170-177
  9. Пономарев И.Н., Макаров М.С., Боровкова Н.В., и др. Особенности раневого процесса при лечении поверхностных ожогов с помощью коллагеновых раневых покрытий, насыщенных тромбоцитами (экспериментальное исследование) // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2021. Т. 62, № 2. С. 85–93. doi: 10.25557/0031-2991.2021.02.85-93
  10. Golebiewska E.M., Poole A.W. Secrets of platelet exocytosis — what do we really know about platelet secretion mechanisms? // Br J Haematol. 2014. Vol. 165, No. 2. P. 204–216. doi: 10.1111/bjh.12682
  11. Боровкова Н.В., Макаров М.С., Андреев Ю.В., и др. Оценка цитокинового состава сыворотки крови и препаратов на основе тромбоцитов человека // Молекулярная медицина. 2021. Т. 19, № 3. С. 51–57. doi: 10.29296/24999490-2021-03-08
  12. Борзенок С.А., Ролик О.И., Онищенко Н.А., Комах Ю.А. О возможности совершенствования консервации донорских роговиц путём применения регуляторных пептидов // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2011. Т. 13, № 4. С. 101–105. doi: 10.15825/1995-1191-2011-4-101-105
  13. Макаров М.С., Сторожева М.В., Конюшко О.И., и др. Влияние концентрации тромбоцитарного фактора роста на пролиферативную активность фибробластов человека // Клеточные технологии в биологии и медицине. 2013. № 2. С. 111–115. doi: 10.1007/s10517-013-2199-9

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рисунок. Сравнительная характеристика роста клеток буккального эпителия человека в лунках с образцами амниотической мембраны (АМ), консервированными различными способами

Скачать (130KB)
Метаданные

© Боженко Д.А., Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Пономарев И.Н., Сторожева М.В., Макаров М.С., Макаров П.В., 2022

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».