Применение лизата тромбоцитов для увеличения ростстимулирующего эффекта амниотической мембраны in vitro
- Авторы: Боженко Д.А.1, Ченцова Е.В.1, Боровкова Н.В.2, Пономарев И.Н.2, Сторожева М.В.2, Макаров М.С.2, Макаров П.В.1
-
Учреждения:
- Национальный медицинский исследовательский центр НИИ глазных болезней им. Гельмгольца
- Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского
- Выпуск: Том 15, № 3 (2022)
- Страницы: 57-62
- Раздел: Экспериментальные исследования
- URL: https://journals.rcsi.science/ov/article/view/131577
- DOI: https://doi.org/10.17816/OV108704
- ID: 131577
Цитировать
Аннотация
Цель работы — отработать методику насыщения консервированной амниотической мембраны (АМ) лизатом богатой тромбоцитами плазмы (БоТП) и оценить ростстимулирующий эффект комбинации АМ и лизата БоТП in vitro.
Материалы и методы. В эксперименте использовали образцы АМ, консервированные тремя способами: силиковысушивание, лиофилизация, криоконсервирование. На основе крови добровольцев готовили лизат БоТП. В процессе экспозиции АМ с лизатом БоТП определяли оптимальное время насыщения консервированных АМ лизатом, оценивали объем лизата, который может адсорбировать 1 см2 АМ. Оценку ростстимулирующего эффекта трансплантатов АМ проводили в культуре буккального эпителия человека. Динамику роста клеток оценивали через 1, 2 и 3 сут с момента посева.
Результаты. В присутствии лизата БоТП масса силиковысушенных АМ увеличивалась в 4,2 раза, лиофилизированных АМ — в 4,8 раз, криоконсервированных АМ — в 1,8 раз. Наиболее эффективно адсорбировали лизат БоТП образцы АМ, полученные путем лиофилизации. Для полного насыщения АМ достаточно 5 мин экспозиции с лизатом БоТП. АМ без лизата БоТП не давали ростстимулирующего эффекта.
Заключение. При сравнении опытов с лизатом БоТП без АМ и АМ с лизатом БоТП установлено, что наибольшая стимуляция роста клеток происходила при использовании лиофилизированной АМ и лизата БоТП. Насыщение лизатом БоТП криоконсервированной АМ было неэффективным, а при использовании силиковысушенной АМ, пропитанной лизатом БоТП, наибольший ростстимулирующий эффект наблюдался на 1-е сутки.
Ключевые слова
Полный текст
Открыть статью на сайте журналаОб авторах
Дмитрий Андреевич Боженко
Национальный медицинский исследовательский центр НИИ глазных болезней им. Гельмгольца
Email: panacelium@gmail.com
аспирант, офтальмолог
Россия, МоскваЕкатерина Валериановна Ченцова
Национальный медицинский исследовательский центр НИИ глазных болезней им. Гельмгольца
Email: chentsova27@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8394-1038
SPIN-код: 8191-8338
д-р мед. наук, профессор, начальник отдела травматологии и реконструктивной хирургии
Россия, МоскваНаталья Валерьевна Боровкова
Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского
Email: borovkovanv@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8897-7523
SPIN-код: 9339-2800
д-р мед. наук, заведующая отделением биотехнологий и трансфузиологии
Россия, МоскваИван Николаевич Пономарев
Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского
Email: rzam@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-2523-6939
SPIN-код: 4705-9314
канд. мед. наук, ст. научн. сотр.
Россия, МоскваМайя Викторовна Сторожева
Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского
Email: Mayya.storozheva@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-1927-2404
SPIN-код: 7789-3277
научн. сотр. отделения биотехнологий и трансфузиологии
Россия, МоскваМаксим Сергеевич Макаров
Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского
Email: mcsimmc@yandex.ru
SPIN-код: 3543-5800
канд. биол. наук, ст. научн. сотр. отделения биотехнологий и трансфузиологии
Россия, МоскваПавел Васильевич Макаров
Национальный медицинский исследовательский центр НИИ глазных болезней им. Гельмгольца
Автор, ответственный за переписку.
Email: makarovpavel61@mail.ru
д-р мед. наук, вед. научн. сотр.
Россия, МоскваСписок литературы
- Шевлюк Н.Н., Гатиатуллин И.З., Стадников А.А. Особенности репаративных гистогенезов при использовании биопластических материалов // Журнал анатомии и гистопатологии. 2020. Т. 9, № 1. С. 86–93. doi: 10.18499/2225-7357-2020-9-1-86-93
- Nejad A.R., Hamidieh A.A., Amirkhani M.A., Sisakht M.M. Update review on five top clinical applications of human amniotic membrane in regenerative medicine // Placenta. 2021. Vol. 103. P. 104–119. doi: 10.1016/j.placenta.2020.10.026.
- Cirman T., Beltram M., Schollmayer P., et al. Amniotic membrane properties and current practice of amniotic membrane use in ophthalmology in Slovenia // Cell and Tissue Banking. 2013. Vol. 15, No. 2. P. 177–192. doi: 10.1007/s10561-013-9417-6
- Le Q., Deng S.X. The application of human amniotic membrane in the surgical management of limbal stem cell deficiency // Ocul Surf. 2019. Vol. 17, No. 2. P. 221–229. doi: 10.1016/j.jtos.2019.01.003
- McDaniel J.S., Wehmeyer J.L., Cornell L.E., et al. Amniotic membrane allografts maintain key biological properties post SCCO2 and lyophilization processing // J Biomater Appl. 2021. Vol. 35, No. 6. P. 592–601. doi: 10.1177/0885328220952585
- Walkden A. Amniotic Membrane transplantation in ophthalmology: an updated perspective // Clin Ophthalmol. 2020. Vol. 14. P. 2057–2072. doi: 10.2147/OPTH.S208008
- Etulain J. Platelets in wound healing and regenerative medicine // Platelets. 2018. Vol. 29, No. 6. P. 556–568. doi: 10.1080/09537104.2018.1430357
- Боровкова Н.В., Макаров М.С., Пономарев И.Н., и др. Экспериментальное исследование влияния биологических покрытий со стабилизированными или нестабилизированными тромбоцитами на репаративный процесс в ране, эквивалентной глубокому ожогу // Клеточные технологии в биологии и медицине. 2020. № 3. С. 170–177. doi: 10.47056/1814-3490-2020-3-170-177
- Пономарев И.Н., Макаров М.С., Боровкова Н.В., и др. Особенности раневого процесса при лечении поверхностных ожогов с помощью коллагеновых раневых покрытий, насыщенных тромбоцитами (экспериментальное исследование) // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2021. Т. 62, № 2. С. 85–93. doi: 10.25557/0031-2991.2021.02.85-93
- Golebiewska E.M., Poole A.W. Secrets of platelet exocytosis — what do we really know about platelet secretion mechanisms? // Br J Haematol. 2014. Vol. 165, No. 2. P. 204–216. doi: 10.1111/bjh.12682
- Боровкова Н.В., Макаров М.С., Андреев Ю.В., и др. Оценка цитокинового состава сыворотки крови и препаратов на основе тромбоцитов человека // Молекулярная медицина. 2021. Т. 19, № 3. С. 51–57. doi: 10.29296/24999490-2021-03-08
- Борзенок С.А., Ролик О.И., Онищенко Н.А., Комах Ю.А. О возможности совершенствования консервации донорских роговиц путём применения регуляторных пептидов // Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2011. Т. 13, № 4. С. 101–105. doi: 10.15825/1995-1191-2011-4-101-105
- Макаров М.С., Сторожева М.В., Конюшко О.И., и др. Влияние концентрации тромбоцитарного фактора роста на пролиферативную активность фибробластов человека // Клеточные технологии в биологии и медицине. 2013. № 2. С. 111–115. doi: 10.1007/s10517-013-2199-9