ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ЗАБУФЕРЕННОГО ФОРМАЛИНА НА АКТИВНОСТЬ ЩЕЛОЧНОЙ ФОСФАТАЗЫ С ПОМОЩЬЮ ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКОГО МЕТОДА


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Оценить влияние формалина на активность ЩФ in vitro с помощью электрохимического метода. Материалы и методы. Разработан метод, основанный на оценке активности щелочной фосфатазы по продуктам распада субстрата (1-нафтил-фосфата), который обладают электрохимической активностью. Смешивали образцы растворов щелочной фосфатазы с забуференным формалином (концентрация 10%) в соотношении 50:50 и держали их от 10 до 240 минут при комнатной температуре. Контролем служили образцы щелочной фосфатазы без добавления формалина. Затем проводили хроноамперометрическое измерение активности фермента после добавления субстрата (1-нафтил фосфат). Результаты. Установлено, что активность щелочной фосфатазы значительно снижается уже через 2 часа после контакта с забуференным формалином. Выводы. Это подтверждает, что целесообразно определять активность ЩФ в нефиксированных биологических тканях или при их фиксации в 10%-ном нейтральном формалине в течение не более двух часов.

Об авторах

Кармит Офир

Тель-Авивский Университет, Тель-Авив, Израиль

аспирант кафедры электронных систем

Антон Николаевич Белкин

Пермская государственная медицинская академия им. ак. Е. А. Вагнера

Email: belkinanton87@gmail.com
аспирант кафедры патологической анатомии с секционным курсом

Генриетта Герхардовна Фрейнд

Пермская государственная медицинская академия им. ак. Е. А. Вагнера

д.м.н., профессор, заведующая кафедрой патологической анатомии с секционным курсом

Михаил Давидович Кацнельсон

Пермский национальный исследовательский политехнический университет, г. Пермь, Россия

профессор кафедры металлорежущих станков и инструментов

Владимир Дергачев

Тель-Авивский Университет, Тель-Авив, Израиль

аспирант кафедры молекулярной биологии и биотехнологии

Семен Натанович Лицын

Тель-Авивский Университет, Тель-Авив, Израиль

профессор кафедры электронных систем

Йоси Шэхам-Диаманд

Тель-Авивский Университет, Тель-Авив, Израиль

профессор, заведующий кафедрой физической электроники

Виктор Алексеевич Четвертных

Пермская государственная медицинская академия им. ак. Е. А. Вагнера

д.м.н., профессор, заведующий кафедрой цитологии, гистологии и эмбриологии

Лев Николаевич Кротов

Пермский национальный исследовательский политехнический университет, г. Пермь, Россия

доктор физических наук, профессор кафедры прикладной физики

Список литературы

  1. Верник С., Белкин А. Н., Фрейнд Г. Г., Кацнельсон М. Д., Шахам-Диаманд Й., Лицын С. Н., Четвертных В. А. Морфологическое обоснование возможности использования электрохимических биосенсоров в диагностике колоректального рака. Пермский медицинский журнал 2012; 5: 5–7.
  2. Гайер Г. Электронная гистохимия: пер. с нем. И. Б. Бухвалова. М.: Мир, 1974; 458.
  3. Christudoss P., Selvakumar R., Pulimood A. B., Fleming J. J., Mathew G. Zinc and zinc related enzymes in precancerous and cancerous tissue in the colon of dimethyl hydrazine treated rats. Asian Pacific Journal of cancer prevention 2012; 13: 487–492.
  4. Feustel E.-M., Gayer G. Zureingung der acroleinfixierung fur histochemiche. Acta Histochemistry 1966; 25: 219–233.
  5. Fox C. H., Johnson F. B., Whiting J., Roller P. P. Formaldehyde fixation. Journal of Histochemistry&Cytochemistry 1985; 33 (8): 845–853.
  6. Goosen N. K., Broers C. A., Hombergen E.-J., Stumm C. K., Vogels G. D. Effect of fixation on activity and cytochemistry of hydrogenosomal enzymes in Trichomonasvaginalis. Journal of General Microbiology 1990; 136: 2189–2193.
  7. Hoopwood D. Some aspects of fixation with glutaraldehyde. A biochemical and histochemical comparison of the effects of formaldehyde and glutaraldehyde fixation on various enzymes and glycogen, with a note on penetration of glutaraldehyde into liver. Journal of anatomy 1967; 101: 83–92.
  8. Puchtler H., Meloan S. N. On the chemistry of formaldehyde fixation and its effects on immunohistochemical reactions. Histochemistry 1985; 82 (3): 201–204.
  9. Tsai C. Y., Chen Y. H., Chien Y. W., Huang W. H., Lin S. H. Effect of soy saponin on the growth of human colon cancer cells. World Journal of Gastroenterology 2010; 16 (27): 3371–3376.
  10. Verhaert P., WalgraeveH., Downer R. Alkaline phosphatase activity in the brain of the American cockroach Periplaneta AmericanaL. The Histochemical Journal 1990; 22 (11): 628–635.
  11. Wang Q., Zhou Y., Rychahou P., Liu C., Weiss H. L., Evers B. M. NFAT5 represses canonical Wntsignaling via inhibition of β–catenin acetylation and participates in regulating intestinal cell differentiation. Cell Death and Disease 2013; 4: 671.

© Офир К., Белкин А.Н., Фрейнд Г.Г., Кацнельсон М.Д., Дергачев В., Лицын С.Н., Шэхам-Диаманд Й., Четвертных В.А., Кротов Л.Н., 2013

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License.
 


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах