


Том 59, № 6 (2023)
Статьи
Памяти академика Николая Петровича Веселкина (10 января 1937 г.–24 ноября 2023 г.)



Правила для авторов



ОБЗОРЫ
Структура и свойства гломерулярного фильтра позвоночных: роль заряда для фильтрации белков
Аннотация
Почечный клубочек – уникальная структура, отличающая нефроны позвоночных от нефридиев беспозвоночных животных, обеспечивающая непосредственную связь кровеносной и выделительной систем и наиболее эффективный контроль состава внутренней среды за счет значительной интенсификации фильтрации. Рассмотрены современные представления о структуре гломерулярного фильтра у представителей всех основных групп позвоночных животных (круглоротые, рыбы, амфибии, рептилии и птицы, млекопитающие). Сделан акцент на роли заряда структур гломерулярного барьера для его селективных свойств, описаны подходы к изучению вклада анионных компонентов клубочка в предотвращение потери белков плазмы крови. Рассмотрены представленные в литературе основные модели работы гломерулярного фильтра. Продемонстрировано, что отрицательный заряд является отличительной чертой гломерулярного фильтра у всех позвоночных. Показано, что многократный рост скорости клубочковой фильтрации (от низших позвоночных к птицам и млекопитающим) сопровождался рядом структурных изменений, обеспечивающих прохождение значительного объема воды и растворенных низкомолекулярных веществ через гломерулярный фильтр: увеличение числа и упорядоченности фенестр в эндотелии гломерулярных капилляров, утончение гломерулярной базальной мембраны и полное исключение из нее клеточных элементов. Данные проведенного сравнительно-физиологического анализа гломерулярного барьера у разных групп позвоночных в наибольшей степени свидетельствуют о справедливости электрокинетической модели работы фильтра, так как именно она объясняет важность эволюционно консервативной структуры подоцитов и роль совокупности фиксированных отрицательных зарядов в стенке гломерулярного фильтра для предотвращения потери макромолекул (прежде всего белков) из крови при различной интенсивности ультрафильтрации.



ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
Сравнительная нейроанатомия нисходящих нейронов в надглоточных ганглиях тараканов из семейства Blaberidae (blattodea)
Аннотация
Проведено сравнительное исследование морфологии нисходящих нейронов, связывающих надглоточный ганглий и торакальные ганглии у тараканов, представителей семейства Blaberidae, которые различаются защитным поведением и способностью к полету. Строение нейронов у тараканов этих семейств сравнивали с нисходящими нейронами таракана Periplaneta americana. Выявлено сходство в количестве, пространственном распределении, расположении аксонов и дендритов нисходящих нейронов у тараканов Leucophaea maderae, Gromphadorhina portentosa, Blaberus craniifer, Nauphoeta cinerea (Blaberidae). Обнаружены нейроны, гомологичные оцеллярным, механочувствительным, зрительным нисходящим нейронам, описанным у таракана Periplaneta americana. Сделано предположение, что в процессе эволюции отряда таракановых изменение адаптивного поведения при опасности произошло за счет трансформации сенсорных входов и двигательных ответов, при этом система нисходящих нейронов осталась неизменной.



Исследование функционального статуса астроглии гиппокампа у крыс с генетической предрасположенностью к аудиогенным судорогам
Аннотация
Известно, что нарушения функций астроцитов могут приводить к изменению возбудимости нейронов и, как следствие, к развитию эпилепсии, однако данный вопрос требует дальнейшего изучения. Целью настоящей работы являлась оценка функционального состояния астроцитов гиппокампа у крыс линии Крушинского–Молодкиной (КМ) с наследственной предрасположенностью к рефлекторным аудиогенным судорогам. В экспериментах были использованы “наивные” взрослые животные с полностью сформированной судорожной готовностью. В качестве контроля использовали крыс материнской популяции Вистар. Полученные результаты не выявили различий в экспрессии астроцитарных белков GFAP, ALDH1L1 и NFIA, что свидетельствует об отсутствии в гиппокампе крыс КМ реактивного астроглиоза. Экспрессия SPARC и аквапорина 4 также не отличалась от контрольного уровня, указывая на отсутствие нарушений в астроцитарной регуляции синаптогенеза и водного транспорта. Анализ глиальных белков, отвечающих за обратный захват и метаболизм нейромедиаторов, выявил нормальный уровень экспрессии транспортера ГАМК GAT-3 и глутаминсинтетазы, однако содержание транспортеров глутамата EAAT1 и 2 было достоверно повышено, что свидетельствует о более активной утилизации синаптического глутамата. Кроме того, сниженная экспрессия гликолитического фермента альдолазы С в гиппокампе крыс КМ, вероятно, указывает на недостаточную активность метаболизма глюкозы. Таким образом, полученные данные выявили генетически детерминированные изменения функционального статуса астроцитов в гиппокампе крыс с наследственной рефлекторной эпилепсией.



Коррекция когнитивных нарушений и сигнальных путей в гиппокампе крыс с сахарным диабетом 2-го типа с помощью интраназально вводимых инсулина и ганглиозидов
Аннотация
Инсулин контролирует не только системный гомеостаз глюкозы, но и функциональную активность мозга. При сахарном диабете 2-го типа (СД2) в мозге снижаются содержание инсулина и активность инсулиновой сигнальной системы. Это приводит к нарушению энергетического обмена, включая гипометаболизм глюкозы в мозге, и к когнитивным дисфункциям. Для компенсации недостатка гормона в мозге может быть использован интраназально вводимый инсулин (ИВИ). В целях повышения эффективности ИВИ для коррекции функций мозга целесообразно его комбинированное применение с веществами, наделенными свойствами нейропротекторов, в том числе со сложными гликосфинголипидами ганглиозидами. Для доставки ганглиозидов в мозг также может быть использовано их интраназальное введение (ИВГ). Целью работы было оценить эффективность раздельных и совместных интраназальных введений инсулина и ганглиозидов для коррекции когнитивных нарушений у крыс Wistar с СД2, для чего использовали водный лабиринт Морриса (ВЛМ) и анализ в гиппокампе экспрессии белков (BDNF, GLUT-1, GLUT-3, GLUT-4, GFAP, PSD95) и активности протеинкиназ (Akt, GSK3β, ERK1/2), вовлеченных в процессы обучения и формирования долговременной памяти. ИВИ и ИВГ при введении крысам с СД2 улучшали пространственную ориентацию в ВЛМ, причем эффект совместного использования ИВИ и ИВГ был сходным с таковым при их раздельном применении. При совместном введении ИВИ и ИВГ отмечали сохранение активности эффекторных протеинкиназ (Akt и ERK1/2), в то время как при монотерапии ИВИ уровень их фосфорилирования был снижен. При комбинированной терапии также увеличивалось фосфорилирование GSK3β по Ser9, защищающее нейроны от тауропатии. Таким образом, совместное применение ИВИ и ИВГ улучшает функциональное состояние компонентов инсулиновой системы в мозге крыс с СД2, хотя значимо не усиливает эффекты ИВИ на показатели долговременной памяти.



Некоторые компоненты серотонинергической системы в глазах двух видов пресноводных моллюсков
Аннотация
Выполнено маркирование 5-НТ-иммунореактивных структур на срезах глаз пресноводных моллюсков Lymnaea stagnalis и Pomacea canaliculata. В периокулярной области животных обоих видов обнаружена повышенная плотность 5-НТ-ергических волокон, образующих структурно выраженные сплетения и частично проникающих в сетчатку. В тканях глаза обнаружена транскрипция генов рецепторов серотонина: двух типов у L. stagnalis и трех – у P. canaliculata. Ее относительный уровень статистически значимо превышает этот показатель в центральных ганглиях нервной системы и щупальцах. Дополнительно в тканях P. canaliculata была зафиксирована транскрипция гена транспортера 5-НТ. Полученные результаты обсуждаются с позиций возможного серотонинергического механизма модуляции процессов в сетчатке у брюхоногих моллюсков.



Медиаторы симпатической нервной системы АТФ и норадреналин в модуляции антителообразования при глубоком охлаждении организма
Аннотация
В экспериментах на крысах исследовалось участие со-медиаторов симпатической нервной системы в угнетающем влиянии глубокого охлаждения на антителообразующую функцию селезенки. Изучалось: 1) воздействие глубокого охлаждения (снижение глубокой температуры на 3–4°С), 2) введение медиатора симпатической нервной системы норадреналина (НА, 1 мг/мл), 3) его со-медиатора АТФ (0.01 и 10 мг/мл) и 4) блокатора P2X-пуринергических рецепторов PPADS на количество антителообразующих клеток селезенки в ответ на иммунизацию эритроцитами барана. Глубокое охлаждение и АТФ угнетали, тогда как НА стимулировал антителообразование в селезенке. Блокада P2X-пуринергических рецепторов с помощью PPADS стимулировала антителообразование в норме. На фоне блокады P2X-пуринергических рецепторов угнетающее действие АТФ и глубокого охлаждения на антителообразование не проявлялось. Полученные результаты свидетельствуют о разнонаправленном влиянии со-медиаторов симпатической нервной системы на антителообразование в селезенке и позволяют считать, что угнетающее действие холода на антителообразование в селезенке происходит с участием АТФ через P2X пуринергические рецепторы.



Экспрессия белка NeuN в спинальных нейронах, организующих проекции к мозжечку
Аннотация
В настоящей работе были проанализированы особенности иммуномечения антителами NeuN нейронов спинного мозга кошки, расположенных в четырех структурах, организующих проекции к мозжечку: ядре Кларка и пограничных клетках – в сегменте L4, центральном шейном ядре – в сегменте С3, и ядре Штиллинга – в сегменте S2. Проведены морфометрическое и денситометрическое исследования. Показано, что все нейроны интереса обладают яркой особенностью: крайне слабым уровнем NeuN-иммуномечения в цитоплазме, с сохранением высокого уровня NeuN-иммуномечения в ядре. Средний размер сомы нейронов интереса составил 1000–1850 мкм2, что сопоставимо с другим типом крупных нейронов на срезах – мотонейронами (1140–1660 мкм2), поэтому мы использовали популяции мотонейронов соответствующих сегментов для сравнения величин оптической плотности. Относительная оптическая плотность нейронов интереса была в несколько раз ниже таковой у мотонейронов (0.060 ± 0.030 vs 0.330 ± 0.127). Достоверных отличий по величине оптической плотности между разными структурами интереса не выявлено. Учитывая морфологическую уникальность и схожесть этих четырех популяций клеток, полагаем, что особенность экспрессии белка NeuN может быть использована в качестве простого метода визуализации клеток, организующих проекции к мозжечку, что представляет собой ценность как при целевом морфологическим исследовании, так и при проведении гистологического контроля после физиологического эксперимента.



Показатели энергетического обмена и аденилатная система тканей Mytilus galloprovincialis (Lamarck, 1819) в условиях умеренной гипоксии
Аннотация
Исследовали влияние режима умеренной гипоксии на процессы энергетического обмена в тканях (жабры, гепатопанкреас) средиземноморской мидии (Mytilus galloprovincialis, Lamarck, 1819). Контрольная группа моллюсков содержалась при 6.8–6.9 мг О2 л–1, опытная при 1.9–2.0 мг О2 л–1. В обоих случаях температура воды составляла 22 ± 1°C, соленость – 17–18‰. Экспозиция – 72 ч. В условиях умеренной гипоксии в организме средиземноморской мидии развивался комплекс реакций, направленных на поддержание энергетического статуса тканей. Аэробные процессы явно ограничивались, о чем свидетельствовало снижение активности сукцинатдегидрогеназы. Одновременно усиливались анаэробные процессы в тканях. Повышалась активность альдолазы, малатдегидрогеназы, увеличивалось содержание пирувата. При этом глюкозо-лактатное направление метаболизма подавлялось. Это нашло отражение в отсутствии роста активности лактатдегидрогеназы и содержания лактата в тканях. Допускается переключение метаболизма на глюкозо-опинное направление, свойственное представителям рода Mytilus. В работе дается развернутая характеристика состояния аденилатной системы моллюска. Показано, что содержание фракции АТФ в тканях в условиях гипоксии оставалось на уровне контрольных значений, что отражало адаптивную направленность реорганизации тканевого метаболизма. Впервые отмечена способность гепатопанкреаса аккумулировать фракции АДФ и АМФ из систем циркуляции в условиях гипоксической нагрузки. Полагаем, что это может быть основной причиной роста пула аденилатов и понижения значений АЭЗ в данном органе. Из представленных результатов следует, что реорганизация процессов углеводного обмена в тканевых структурах средиземноморской мидии в условиях умеренной гипоксии позволяет сохранять энергетический статус ее тканей. Это является одним из основных условий, позволяющих моллюску осваивать проблемные гипоксические акватории.



Каталитические свойства лактатдегидрогеназы скелетных мышц и печени озерной лягушки (Pelophylax ridibundus) зависят от эколого-географической локации ее в популяции
Аннотация
Озерная лягушка (Pelophylax ridibundus) имеет обширный ареал распространения, что обусловлено множеством приспособлений, способствующих развитию толерантности к широкому диапазону физико-химических факторов окружающей среды. Особый интерес представляют адаптации этих животных к различному уровню кислорода в условиях средне- и высокогорья. В данной работе проведен сравнительный анализ кинетических параметров лактатдегидрогеназы (ЛДГ) печени озерных лягушек, обитающих в горных и равнинных районах Дагестана. Отловленных в местах обитания животных декапитировали, выделяли печень и икроножные мышцы, которые помещали в жидкий азот. В лаборатории отобранные ткани гомогенизировали и методом дифференциального центрифугирования получали безмитохондриальный цитозоль, в котором определяли активность ЛДГ. Обнаружено, что активность ЛДГ значительно выше в тканях лягушек из горных районов: на 42.4% в мышцах и в 2.38 раза в печени (p < 0.05). Высокая эффективность катализа обеспечивается за счет существенных изменений каталитических параметров фермента: увеличения Vmax (50.9% в мышцах и на 70% в печени, p < 0.05) и снижения Кm. (на 45.9% в мышцах и на 69% в печени, p < 0.05). Более выраженная, по сравнению с мышцами, разница между активностью ЛДГ в печени предгорных и низинных популяций лягушек позволяет предположить, что чувствительность ЛДГ печени к изменениям напряженности кислорода выше. Вектор ряда других кинетических параметров ЛДГ (Ki, Sopt, Δ) в печени животных из горных ландшафтов абсолютно противоположен таковому скелетных мышц. Высокая активность и модификации каталитических свойств ЛДГ в тканях озерных лягушек, обитающих в среднегорье, могут играть важную роль в адаптации этих животных к условиям дефицита кислорода.


