Актуальные вопросы стандартизации водно-солевых экстрактов микст-аллергенов из клещей домашней пыли, предназначенных для лечебных форм сублингвальной иммунотерапии

Обоснование. Стандартизация лечебных форм аллергенов ― процесс установления и применения единой системы показателей качества и методов контроля. Проведение контроля качества лечебных форм аллергенов является неотъемлемым условием гарантии клинической эффективности и безопасности аллергенспецифической иммунотерапии. В лаборатории по разработке аллергенов Научно-исследовательского института вакцин и сывороток имени И.И. Мечникова подготовлена технология получения гранулированной формы микст-аллергена из клещей домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus и Dermatophagoides farinae для перорального применения.

Цель ― определение подлинности бесфенольного водно-солевого экстракта микст-аллергена из клещей Dermatophagoides pteronyssinus и Dermatophagoides farinae, предназначенного для лечебной формы препарата.

Материалы и методы. Стандартизация полученного экстракта аллергена происходила по единицам белкового азота (метод Несслера); количество белка в искомом экстракте и нативном стандартном аллергене подсчитывали методом Бредфорда. Наличие аллергокомпонентов в микст-аллергене определяли с помощью электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis). Величину рН определяли потенциометрическим методом. Сравнение специфической активности стандартного аллергена и экспериментального микст-аллергена проводили методом реверсивного иммуноанализа (reversible allergosorbent test).

Результаты. Электрофорез в полиакриламидном геле по Лэммли показал сохранение белкового профиля водно- солевого экстракта микст-аллергена Dermatophagoides pteronyssinus и Dermatophagoides farinae соответствующего белковому профилю аллергенов клещей домашней пыли. По результатам реверсивного иммуноанализа с референс-сыворотками, содержащими специфические IgE к Dermatophagoides pteronyssinus или Dermatophagoides farinae, не выявлено статистически значимых отличий оптической плотности исследуемого аллергена (четыре серии препарата) и стандартного аллергена при реакции с референс-сывороткой 3-го класса (р >0,05).

Заключение. Таким образом, выполненные исследования подтвердили подлинность бесфенольного водно-солевого экстракта микст-аллергена из клещей Dermatophagoides pteronyssinus и Dermatophagoides farinae в качестве лечебной формы препарата, что отражено в Государственной фармакопее Российской Федерации (ОФС.1.7.2.0034.15). Бесфенольное экстрагирование не повлияло на основные аллергенные компоненты микст-аллергена Dermatophagoides pteronyssinus и Dermatophagoides farinae и позволило ему сохранить высокую степень специфичности.