Treatment of inflammatory and degenerative damages of the smooth parodont tissue with tooth pastes in rats

Full Text

Разработка адекватных моделей для оценки действия зубных паст и лекарственных средств, применяемых в современной стоматологии, является своевременной и актуальной проблемой. Особенно важна в этом случае оценка как местных изменений тканей пародонта, так и системных отклонений в функциях организма, на которые, как правило, обращают меньшее внимание [3]. Целью исследования была разработка экспериментальной модели воспалительно-дегенеративных нарушений тканей пародонта у грызунов (крыс), биохимическая характеристика и оценка действия лечебно-профилактических зубных паст на процессы воспаления в данной модели. Методы исследования Опыты выполнены на 144 крысах самцах Вистар массой 220-250 г. С целью воспроизведения воспалительно-дегенеративных повреждений мягких тканей пародонта крысам, наркотизированным эфиром, в наружную часть десны на уровне нижних коренных зубов вводили по 0,15 мл с каждой стороны 2%-го водного раствор формальдегида (всего объем вводимого раствора составил 0,3 мл). Инъекции производили однократно. Контрольные животные получали инъекции 0,9%-го раствора натрия хлорида (физиологического раствора) в тех же объемах. Уже через сутки на месте введения формалина развивались стойкие обширные воспалительно-дегенеративные изменения мягких тканей пародонта, которые сохранялись до 2 недель. Помимо измененных тканей пародонта воспаление развивалось и на внутренней части щек, поскольку у крысы щеки небольшие, тонкие, в норме их внутренняя поверхность гладкая, в ней находятся протоки слюнных желез. Внешне облик крысы менялся. Из-за отека мягких тканей щек обычная вытянутая форма морды животного изменялась, щеки раздувались, и животное становилось похожим на хомяка. Такой вид животных сохранялся обычно 3-4 дня, постепенно отек мягких тканей уменьшался. В отдельных случаях (приблизительно у 10 % животных) наблюдали абсцедирование процесса, тогда отечность мягких тканей сохранялась более длительно [1]. Для лечения воспалительно-дегенеративных поражений мягких тканей пародонта использовали стандартные зубные пасты «жемчуг» (содержит экстракт хвои), «лесмин-дент» (содержит натуральный комплекс хвойной пасты и производных хлорофилла) и «кламин-дент» (содержит минерально-полиеновый комплекс из водорослей ламинарии). Пасты в течение 7 суток (1 раз в день) наносили на внешнюю поверхность десен по 0,28-0,3 см3, начиная со следующего дня после введения формалина в ткани десны. В тканях пародонта и в крови биохимически определяли содержание малонового диальдегида и диеновых коньюгатов (перекисное окисление липидов), а также оценивали активность антиоксидантных систем (содержание восстановленного глутатиона и активность супероксиддисмутазы). Статистическую обработку проводили с использованием t-критерия Стьюдента и стандартного пакета программ Statistica for Windows 6.0. Результаты и их обсуждение Наблюдение за крысами с воспалительно-дегенеративным поражением мягких тканей пародонта показало, что в первые сутки после введения формальдегида у них несколько снижается двигательная активность, они меньше потребляют пищи. Уже на 2-е сутки уровень потребления пищи восстанавливается и по поведению эти животные практически не отличаются от контрольных. В месте введения раствора формальдегида у животных развивается стойкое повреждение мягких тканей. Визуально и морфологически оно может быть описано как воспалительно-дегенеративное поражение наружной части десен и мягких тканей пародонта. При этом в сыворотке крови на 7-е сутки от начала воспаления резко повышается содержание малонового диальдегида (в 2 раза) и диеновых коньюгатов (на 75 %). Аналогичная, но даже более выраженная картина наблюдается и в мягких тканях пародонта. Перекисное окисление липидов в тканях резко активируется, содержание малонового диальдегида и диеновых коньюгатов в тканях увеличивается более чем в 2 раза. Система антиоксидантной защиты организма при воспалительно-дегенеративном поражении мягких тканей пародонта резко снижается. Уровень восстановленного глутатиона в сыворотке крови снижается с 2,02 ± 0,09 до 0,88 ± 0,21 мкмоль/мл, а активность супероксиддисмутазы сыворотки - с 0,78 ± 0,10 до 0,28 ± 0,04 А/мг белка, то есть исследованные показатели снижаются в 2,5-3 раза. Аналогичная закономерность наблюдается и в мягких тканях пародонта. Содержание восстановленного глутатиона при этом снижается в 2,1 раза, а активность супероксиддисмутазы - в 7 раз. Таким образом, оксидативный статус, включая систему перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты, является чувствительным показателем воспалительного процесса в тканях пародонта. Степень сдвигов в показателях перекисного окисления липидов (содержание малонового диальдегида и диеновых конъюгатов) через 7 дней от начала воспаления составляет порядок 2-кратного увеличения как в сыворотке крови, так и в тканях пародонта. Еще более чувствительной является система антиоксидантной защиты (содержание восстановленного глутатиона и активность супероксиддисмутазы), особенно в тканях [2]. Примечательно, что в тканях пародонта при воспалении активность супероксиддисмутазы возрастала в 7 раз, то есть, данный показатель является наиболее чувствительным из всех рассматриваемых в работе. Полученные и описанные выше экспериментальные данные послужили основанием для изучения лечебного действия зубных паст. В наше исследование было включено три зубных пасты: жемчуг (паста сравнения, популярная в РФ), кламин-дент (с экстрактом из бурых водорослей ламинарии) и лесмин-дент (с экстрактом из хвои). Рассматривались два принципиальных момента: пригодность предложенной модели для оценки лечебных свойств зубных паст и эффективность лечения на основании состояния процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантных систем (в сыворотке крови и мягких тканях пародонта). По показателям состояния перекисного окисления липидов в сыворотке крови зубная паста жемчуг не выявила эффективности. Кламин-дент и в большей степени лесмин-дент, умеренно снижали повышенные в результате воспаления уровни малонового диальдегида и диеновых коньюгатов (табл. 1). В среднем, кламин-дент снижал содержание малонового диальдегида на 28 %, лесмин-дент - на 46 %, диеновых коньюгатов: кламин-дент - на 23 %, лесмин-дент - на 35 %. При оценке действия зубных паст на показатели перекисного окисления липидов в мягких тканях пародонта найдено, что все три использованных пасты выявили эффективность, хотя она была неодинаковой. Повышенные при воспалении уровни малоновогого диальдегида зубные пасты снижали следующим образом: жемчуг - на 13 %, кламин-дент - на 39 %, лесмин-дент - на 45 %; содержание диеновых коньюгатов: жемчуг - на 9 %, кламин-дент - на 30 %, лесмин-дент - на 43 %, соответственно. Системы антиоксидантной защиты также менялись при воздействии зубных паст. Так, в сыворотке крови лесмин-дент и в меньшей степени кламин-дент повышали сниженные показатели антиоксидантной защиты (табл. 2). Уровни повышения исследуемых показателей колебались в пределах 30-100 %. Зубная паста жемчуг при этом была неэффективна. В мягких тканях пародонта степень повышения систем антиоксидантной защиты была несколько выше, чем при оценке сходных показателей в сыворотке крови. Здесь также максимальную лечебную эффективность проявил лесмин-дент, в меньшей степени - кламин-дент и минимальную - жемчуг. При этом лесмин-дент на 59 % повышал содержание восстановленного глутатиона и на 132 % - активность супероксиддисмутазы в тканях пародонта, для кламин-дента эти цифры составили 45 и 83 % и для жемчуга - 7 и 32 %, соответственно. Таким образом, оценивая лечебную эффективность исследованных зубных паст, следует сделать вывод, что наибольшую терапевтическую активность на модели воспалительно-дегенеративного поражения мягких тканей пародонта у крыс выявляет лесмин-дент, несколько меньшую - кламин-дент и минимальную в сравнении с приведенными двумя - жемчуг. Учитывая высокую информативность показателей перекисного окисления липидов и систем антиоксидантной защиты в наших экспериментах было продемонстрировано, что биологически активные вещества, входящие в состав зубных паст, активно воздействуют на воспалительно-дегенеративные поражения пародонта у крыс [4]. При этом выяснилось, что зубные пасты в меньшей степени, чем биологически активные добавки (БАД) на основе ламинарии и хвои, вводимые системно, уменьшают патологические отклонения, возникающие при воспалении мягких тканей пародонта [3, 4]. Среди зубных паст наибольшей активностью обладал лесмин-дент, чуть менее активен был кламин-дент и наименьшая активность зарегистрирована у пасты сравнения жемчуг. Более выраженное положительное действие системно вводимых БАД на воспалительный процесс связано с особенностями примененной модели воспалительно-дегенеративного поражения мягких тканей пародонта, а именно, длительным и динамичным развитием воспаления, общим изменением оксидативного статуса организма животных, наконец, локальной точкой приложения лечебно-профилактических паст (в месте воспаления). При системном введении БАД измененный оксидативный статус нормализуется, как правило, быстрее за счет нейтрализации активных форм кислорода и в крови, и пораженных тканях [5], что клинически выглядит более эффективным лечением. Выводы Предложенная модель воспалительно-дегенеративного поражения тканей пародонта с оценкой липидной пероксидации и активности антиокислительных систем у крыс позволяет адекватно оценивать лечебно-профилактическое действие зубных паст и БАД, применяемых в стоматологии. Зубные пасты лесмин-дент > кламин-дент > жемчуг (расположены в порядке убывающей активности) устраняют или значительно уменьшают проявления воспалительно-дегенеративного поражения тканей пародонта у крыс, оцененные по состоянию перекисного окисления липидов и систем антиоксидантной защиты.

About the authors

Evgeniy Vladimirovich Mokrenko

Irkutsk State Medical University

Email: pdshabanov@mail.ru
MD, PhD. Teacher. Department of oral and maxillofacial Surgery

Petr Dmitrievich Shabanov

Russian Medicomilitary Academy

Email: pdshabanov@mail.ru
MD, PhD, Dr Med Sci, Professor, Head. Department of pharmacology

References

Supplementary files