Исследование активности каталазы в гетеротопиях в экспериментальной модели эндометриоза

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Актуальность. Развитие эндометриоза сопряжено с изменением активности антиоксидантных ферментов в ткани эндометрия, а также с полиморфизмами их генов. Прогестерон активирует некоторые антиоксидантные ферменты в эндометрии, а его аналоги эффективно предотвращают рост и обеспечивают регресс эндометриоидных гетеротопий. Для оценки эффективности терапии эндометриоза целесообразно в дополнение к морфометрической и гистологической оценке регресса гетеротопий проводить биохимический анализ гетеротопий на активность ферментов антиоксидантной защиты.

Цель — проанализировать активность каталазы — фермента, участвующего в детоксикации пероксида водорода, — в ткани эндометриоидных имплантов в экспериментальной модели эндометриоза на лабораторных крысах.

Материалы и методы исследования. Исследование выполнено на 12 половозрелых крысах-самках линии Вистар. Всем животным проводили аутотрансплантацию фрагментов матки на брюшину. Через 35–37 дней гетеротопии были извлечены. Каталазную активность в ткани определяли по методу Beers & Sizer с модификациями — регистрировали расход H2O2 при длине волны 250 нм и использовали 3-амино-1,2,4-триазол (АТ) для оценки специфичности. Оценивали корреляцию между каталазной активностью и массой гетеротопий.

Результаты исследования. При длине волны 250 нм не наблюдается сильной интерференции АТ с другими компонентами реакционной смеси, что позволяет применять специфический ингибитор каталазы для оценки специфичности определения ферментативной активности. Активность измеряли в короткий период инкубации (менее минуты), при этом ее величина была пропорциональна концентрации материала гетеротопии в реакционной смеси. В гетеротопиях, наиболее сильно подвергшихся регрессу и обладающих наименьшей массой, как правило, активность каталазы была выше (коэффициент ранговой корреляции составил –0,66 при р < 0,025).

Выводы. Был адаптирован подход определения активности каталазы к работе с тканью эндометриоидных гетеротопий. Показано, что чем выше каталазная активность в гетеротопиях, тем, как правило, меньше их масса (р < 0,025). Исходя из полученных данных можно предположить вовлеченность каталазы в механизм регресса эндометриоидных очагов.

Об авторах

Алексей Вячеславович Разыграев

ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Минздрава России; ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»

Автор, ответственный за переписку.
Email: alexeyrh@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-0544-9398
SPIN-код: 8623-7923

научный сотрудник лаборатории фармакологических исследований; канд. биол. наук, научный сотрудник группы фармакологии отдела патоморфологии

Россия, Санкт-Петербург

Мария Анатольевна Петросян

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»

Email: mariya@labpharm.spb.ru
ORCID iD: 0000-0001-7347-6104
SPIN-код: 5329-5420

канд. биол. наук, ведущий научный сотрудник группы фармакологии отдела патоморфологии

Россия, Санкт-Петербург

Елена Владимировна Базиян

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»

Email: waz2107gen@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-7837-3315
SPIN-код: 2232-9914

научный сотрудник группы фармакологии отдела патоморфологии

Россия, Санкт-Петербург

Людмила Сергеевна Полянских

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»

Email: polyanskikh-83@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-9994-8341
SPIN-код: 2501-8880

научный сотрудник группы фармакологии отдела патоморфологии

Россия, Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Ota H, Igarashi S, Kato N, Tanaka T. Aberrant expression of glutathione peroxidase in eutopic and ectopic endometrium in endometriosis and adenomyosis. Fertil Steril. 2000;74(2):313-318. https://doi.org/10.1016/s0015-0282(00)00638-5.
  2. Borthwick JM, Charnock-Jones DS, Tom BD, et al. Determination of the transcript profile of human endometrium. Mol Hum Reprod. 2003;9(1):19-33. https://doi.org/10.1093/molehr/gag004.
  3. Xu X, Leng JY, Gao F, et al. Differential expression and anti-oxidant function of glutathione peroxidase 3 in mouse uterus during decidualization. FEBS Lett. 2014;588(9):1580-1589. https://doi.org/10.1016/j.febslet.2014.02.043.
  4. Петросян М.А., Балашова Н.Н., Полянских Л.С., и др. Влияние аналогов прогестерона на эндометриоидные гетеротопии в экспериментальной модели эндометриоза // Экспериментальная и клиническая фармакология. – 2018. – Т. 81. – № 7. – С. 14–19. [Petrosyan MA, Balashova NN, Polyanskikh LS, et al. Influence of progesterone analogs on endometrioid heterotopia in experimental model of endometriosis. Eksp Klin Farmakol. 2018;81(7):14-19. (In Russ.)] https://doi.org/10.30906/0869-2092-2018-81-7-14-19.
  5. Ota H, Igarashi S, Sato N, et al. Involvement of catalase in the endometrium of patients with endometriosis and adenomyosis. Fertil Steril. 2002;78(4):804-809. https://doi.org/10.1016/s0015-0282(02)03344-7.
  6. Puy LA, Librach CL. A case-controlled analysis of catalase expression in endometriosis. Fertil Steril. 2001;76(3):S149. https://doi.org/10.1016/s0015-0282(01)02436-0.
  7. Zarafshan SS, Salehi Z, Salahi E, et al. Polymorphism of catalase gene (CAT C-262T) in women with endometriosis. J Obstet Gynaecol. 2015;35(3):269-271. https://doi.org/10.3109/01443615.2014.948402.
  8. Разыграев А.В., Петросян М.А., Таборская К.И. Перспективы определения ферментативной активности глутатионпероксидазы GPx3 в клеточной культуре эндометрия при оценке гестагенной активности аналогов прогестерона // Журнал акушерства и женских болезней. – 2017. – Т. 66. – № S. – С. 66–67. [Razygraev AV, Petrosyan MA, Taborskaya KI. Perspektivy opredeleniya fermentativnoy aktivnosti glutationperoksidazy GPx3 v kletochnoy kul’ture endometriya pri otsenke gestagennoy aktivnosti analogov progesterona. Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2017;66(S):66-67. (In Russ.)]
  9. Beers RF, Jr., Sizer IW. A spectrophotometric method for measuring the breakdown of hydrogen peroxide by catalase. J Biol Chem. 1952;195(1):133-140.
  10. Разыграев А.В. Гомоцистеинпероксидазная активность плазмы крови крыс. Стехиометрия и ферментативный характер реакции // Биомедицинская химия. – 2013. – Т. 59. – № 6. – С. 636–643. [Razygraev AV. Homocysteine peroxidase activity in rat blood plasma: stoichiometry and enzymatic character of the reaction. Biomed Khim. 2013;59(6):636-643. (In Russ.)]. https://doi.org/10.18097/pbmc20135906636.
  11. Разыграев А.В., Таборская К.И., Петросян М.А., Тумасова Ж.Н. Тиолпероксидазные активности плазмы крови крыс, определяемые с использованием пероксида водорода и 5,5’-дитиобис(2-нитробензойной кислоты) // Биомедицинская химия. – 2016. – Т. 62. – № 4. – С. 431–438. [Razygraev AV, Taborskaya KI, Petrosyan MA, Tumasova ZhN. Thiol peroxidase activities in rat blood plasma determined with hydrogen peroxide and 5,5’-dithio-bis (2-nitrobenzoic acid). Biomed Khim. 2016;62(4):431-438. (In Russ.)]. https://doi.org/10.18097/PBMC20166204431.
  12. Чеснокова Л.С., Войнова Н.Е., Комкова А.И., Лянгузов А.Ю. Методы количественного определения белка // Ферменты и нуклеиновые кислоты / под ред. В.Г. Владимирова, С.Н. Лызловой. – СПб., 1997. – С. 5–25. [Chesnokova LS, Voynova NE, Komkova AI, Lyanguzov AY. Metody kolichestvennogo opredeleniya belka. In: Fermenty i nukleinovye kisloty. Ed. by V.G. Vladimirov, S.N. Lyzlova. Saint Petersburg; 1997. P. 5-25. (In Russ.)]
  13. r-project.org [Internet]. R Core Team. R: A language and environment for statistical computing. R Foundation for Statistical Computing, Vienna, Austria; 2017. [cited 25 Oct 2019]. Available from: https://www.r-project.org/.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Спектр поглощения пероксида водорода (23,7 мM) в 0,05 M K-Na-фосфатном буфере (pH 7,8) в ультрафиолетовом диапазоне длин волн 240–260 нм

Скачать (72KB)
3. Рис. 2. Связь (обратная корреляция) между удельной активностью каталазы в гетеротопиях и их массой

Скачать (94KB)

© Разыграев А.В., Петросян М.А., Базиян Е.В., Полянских Л.С., 2020

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».