Исследование активности каталазы в гетеротопиях в экспериментальной модели эндометриоза
- Авторы: Разыграев А.В.1,2, Петросян М.А.2, Базиян Е.В.2, Полянских Л.С.2
-
Учреждения:
- ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Минздрава России
- ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»
- Выпуск: Том 68, № 6 (2019)
- Страницы: 57-63
- Раздел: Оригинальные исследования
- URL: https://journals.rcsi.science/jowd/article/view/15920
- DOI: https://doi.org/10.17816/JOWD68657-63
- ID: 15920
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Актуальность. Развитие эндометриоза сопряжено с изменением активности антиоксидантных ферментов в ткани эндометрия, а также с полиморфизмами их генов. Прогестерон активирует некоторые антиоксидантные ферменты в эндометрии, а его аналоги эффективно предотвращают рост и обеспечивают регресс эндометриоидных гетеротопий. Для оценки эффективности терапии эндометриоза целесообразно в дополнение к морфометрической и гистологической оценке регресса гетеротопий проводить биохимический анализ гетеротопий на активность ферментов антиоксидантной защиты.
Цель — проанализировать активность каталазы — фермента, участвующего в детоксикации пероксида водорода, — в ткани эндометриоидных имплантов в экспериментальной модели эндометриоза на лабораторных крысах.
Материалы и методы исследования. Исследование выполнено на 12 половозрелых крысах-самках линии Вистар. Всем животным проводили аутотрансплантацию фрагментов матки на брюшину. Через 35–37 дней гетеротопии были извлечены. Каталазную активность в ткани определяли по методу Beers & Sizer с модификациями — регистрировали расход H2O2 при длине волны 250 нм и использовали 3-амино-1,2,4-триазол (АТ) для оценки специфичности. Оценивали корреляцию между каталазной активностью и массой гетеротопий.
Результаты исследования. При длине волны 250 нм не наблюдается сильной интерференции АТ с другими компонентами реакционной смеси, что позволяет применять специфический ингибитор каталазы для оценки специфичности определения ферментативной активности. Активность измеряли в короткий период инкубации (менее минуты), при этом ее величина была пропорциональна концентрации материала гетеротопии в реакционной смеси. В гетеротопиях, наиболее сильно подвергшихся регрессу и обладающих наименьшей массой, как правило, активность каталазы была выше (коэффициент ранговой корреляции составил –0,66 при р < 0,025).
Выводы. Был адаптирован подход определения активности каталазы к работе с тканью эндометриоидных гетеротопий. Показано, что чем выше каталазная активность в гетеротопиях, тем, как правило, меньше их масса (р < 0,025). Исходя из полученных данных можно предположить вовлеченность каталазы в механизм регресса эндометриоидных очагов.
Полный текст
Открыть статью на сайте журналаОб авторах
Алексей Вячеславович Разыграев
ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Минздрава России; ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»
Автор, ответственный за переписку.
Email: alexeyrh@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-0544-9398
SPIN-код: 8623-7923
научный сотрудник лаборатории фармакологических исследований; канд. биол. наук, научный сотрудник группы фармакологии отдела патоморфологии
Россия, Санкт-ПетербургМария Анатольевна Петросян
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»
Email: mariya@labpharm.spb.ru
ORCID iD: 0000-0001-7347-6104
SPIN-код: 5329-5420
канд. биол. наук, ведущий научный сотрудник группы фармакологии отдела патоморфологии
Россия, Санкт-ПетербургЕлена Владимировна Базиян
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»
Email: waz2107gen@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-7837-3315
SPIN-код: 2232-9914
научный сотрудник группы фармакологии отдела патоморфологии
Россия, Санкт-ПетербургЛюдмила Сергеевна Полянских
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта»
Email: polyanskikh-83@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-9994-8341
SPIN-код: 2501-8880
научный сотрудник группы фармакологии отдела патоморфологии
Россия, Санкт-ПетербургСписок литературы
- Ota H, Igarashi S, Kato N, Tanaka T. Aberrant expression of glutathione peroxidase in eutopic and ectopic endometrium in endometriosis and adenomyosis. Fertil Steril. 2000;74(2):313-318. https://doi.org/10.1016/s0015-0282(00)00638-5.
- Borthwick JM, Charnock-Jones DS, Tom BD, et al. Determination of the transcript profile of human endometrium. Mol Hum Reprod. 2003;9(1):19-33. https://doi.org/10.1093/molehr/gag004.
- Xu X, Leng JY, Gao F, et al. Differential expression and anti-oxidant function of glutathione peroxidase 3 in mouse uterus during decidualization. FEBS Lett. 2014;588(9):1580-1589. https://doi.org/10.1016/j.febslet.2014.02.043.
- Петросян М.А., Балашова Н.Н., Полянских Л.С., и др. Влияние аналогов прогестерона на эндометриоидные гетеротопии в экспериментальной модели эндометриоза // Экспериментальная и клиническая фармакология. – 2018. – Т. 81. – № 7. – С. 14–19. [Petrosyan MA, Balashova NN, Polyanskikh LS, et al. Influence of progesterone analogs on endometrioid heterotopia in experimental model of endometriosis. Eksp Klin Farmakol. 2018;81(7):14-19. (In Russ.)] https://doi.org/10.30906/0869-2092-2018-81-7-14-19.
- Ota H, Igarashi S, Sato N, et al. Involvement of catalase in the endometrium of patients with endometriosis and adenomyosis. Fertil Steril. 2002;78(4):804-809. https://doi.org/10.1016/s0015-0282(02)03344-7.
- Puy LA, Librach CL. A case-controlled analysis of catalase expression in endometriosis. Fertil Steril. 2001;76(3):S149. https://doi.org/10.1016/s0015-0282(01)02436-0.
- Zarafshan SS, Salehi Z, Salahi E, et al. Polymorphism of catalase gene (CAT C-262T) in women with endometriosis. J Obstet Gynaecol. 2015;35(3):269-271. https://doi.org/10.3109/01443615.2014.948402.
- Разыграев А.В., Петросян М.А., Таборская К.И. Перспективы определения ферментативной активности глутатионпероксидазы GPx3 в клеточной культуре эндометрия при оценке гестагенной активности аналогов прогестерона // Журнал акушерства и женских болезней. – 2017. – Т. 66. – № S. – С. 66–67. [Razygraev AV, Petrosyan MA, Taborskaya KI. Perspektivy opredeleniya fermentativnoy aktivnosti glutationperoksidazy GPx3 v kletochnoy kul’ture endometriya pri otsenke gestagennoy aktivnosti analogov progesterona. Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2017;66(S):66-67. (In Russ.)]
- Beers RF, Jr., Sizer IW. A spectrophotometric method for measuring the breakdown of hydrogen peroxide by catalase. J Biol Chem. 1952;195(1):133-140.
- Разыграев А.В. Гомоцистеинпероксидазная активность плазмы крови крыс. Стехиометрия и ферментативный характер реакции // Биомедицинская химия. – 2013. – Т. 59. – № 6. – С. 636–643. [Razygraev AV. Homocysteine peroxidase activity in rat blood plasma: stoichiometry and enzymatic character of the reaction. Biomed Khim. 2013;59(6):636-643. (In Russ.)]. https://doi.org/10.18097/pbmc20135906636.
- Разыграев А.В., Таборская К.И., Петросян М.А., Тумасова Ж.Н. Тиолпероксидазные активности плазмы крови крыс, определяемые с использованием пероксида водорода и 5,5’-дитиобис(2-нитробензойной кислоты) // Биомедицинская химия. – 2016. – Т. 62. – № 4. – С. 431–438. [Razygraev AV, Taborskaya KI, Petrosyan MA, Tumasova ZhN. Thiol peroxidase activities in rat blood plasma determined with hydrogen peroxide and 5,5’-dithio-bis (2-nitrobenzoic acid). Biomed Khim. 2016;62(4):431-438. (In Russ.)]. https://doi.org/10.18097/PBMC20166204431.
- Чеснокова Л.С., Войнова Н.Е., Комкова А.И., Лянгузов А.Ю. Методы количественного определения белка // Ферменты и нуклеиновые кислоты / под ред. В.Г. Владимирова, С.Н. Лызловой. – СПб., 1997. – С. 5–25. [Chesnokova LS, Voynova NE, Komkova AI, Lyanguzov AY. Metody kolichestvennogo opredeleniya belka. In: Fermenty i nukleinovye kisloty. Ed. by V.G. Vladimirov, S.N. Lyzlova. Saint Petersburg; 1997. P. 5-25. (In Russ.)]
- r-project.org [Internet]. R Core Team. R: A language and environment for statistical computing. R Foundation for Statistical Computing, Vienna, Austria; 2017. [cited 25 Oct 2019]. Available from: https://www.r-project.org/.