Влияние спектрального состава света на ростовые и биосинтетические характеристики суспензионной культуры клеток thalictrum minus и скрининг биологической активности методами in vitro

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Введение. Берберин – изохинолиновый алкалоид, обладающий широким спектром биологической активности. Суспензионная культура клеток василистника малого (Thalictrum minus L.) является перспективным продуцентом этого алкалоида. В отличии от других продуцентов, до 30% берберина, синтезируемого T. minus, выделяется в питательную среду. Однако из-за низкой продуктивности культуры существует необходимость поиска эффективных методов регуляции биосинтеза. Одним из эффективных, но недостаточно изученных факторов регуляции является свет.

Цель исследования – сравнительный анализ влияния спектрального состава света на накопление биомассы и синтез берберина суспензионной культурой клеток T. minus, а также оценка биологической активности полученных экстрактов с использованием специфических ферментных биотест-систем in vitro.

Материал и методы. Объектом исследования служила суспензионная культура клеток T. minus, выращиваемая в условиях заданной освещенности и фотоперида светом заданного спектра. Анализировали морфофизиологические параметры культуры (форма клеток, накопление сухой биомассы, ростовой индекс, продуктивность, накопление берберина), а также проводили скрининг противовоспалительной и антимикробной активности в условиях опытов in vitro.

Результаты. Впервые проведён сравнительный анализ влияния длительного (12-часового) освещения монохроматическим красным (660 нм), синим (440 нм) и белым холодным (10000 K) светом на суспензионную культуру клеток T. minus. Установлено, что красный и белый свет достоверно увеличивют максимальную биомассу (на 21 и 30% соответственно), следовательно, являются эффективными ростостимуляторами. С помощью специфических ферментных биотест-систем (in vitro) показано, что биологическая активность экстрактов зависит от условий культивирования культуры клеток.

Выводы. Культура клеток T. minus чувствительна к различным видам экзогенной регуляции, в том числе к световой. Эффект светового воздействия носит комплексный характер и определяется фотопериодом, спектром и интенсивностью.

Об авторах

А. С. Тимохина

ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений» (ФГБНУ ВИЛАР)

Автор, ответственный за переписку.
Email: t.a.s.77777@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-3658-5093
SPIN-код: 5684-0544

аспирант, науч. сотрудник

Россия, 117216, Москва, ул. Грина, дом 7

И. А. Лупанова

ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений» (ФГБНУ ВИЛАР)

Email: lupanova@vilarnii.ru
ORCID iD: 0000-0001-8183-2877

д.б.н., руководитель Центра доклинических исследований

Россия, 117216, Москва, ул. Грина, дом 7

Список литературы

  1. Xiang Z.D., Guan H.D., Zhao X. et al. Protoberberine alkaloids: A review of the gastroprotective effects, pharmacokinetics, and toxicity. Phytomedicine. 2024; 126: 155444. doi: 10.1016/j.phymed.2024.155444.
  2. Попова Е.В., Носов А.В., Титова М.В. и др. Перспективные биотехнологии: коллекции культур клеток высших растений как основа разработки и производства лекарственных препаратов. Физиология растений. 2021; 68(3): 227–244. doi: 10.31857/S0015330321030167.
  3. Neag M.A., Mocan A., Echeverría J. et al. Berberine: Botanical Occurrence, Traditional Uses, Extraction Methods, and Relevance in Cardiovascular, Metabolic, Hepatic, and Renal Disorders. Front Pharmacol. 2018; 9: 557. doi: 10.3389/fphar.2018.00557.
  4. Тертичная Ю.М. Изучение метаболома суспензионной культуры василистника малого (Thalictrum minus L.) – продуцента протобербериновых алкалоидов: автореф. дис. ... канд. фарм. наук: 14.04.02. Москва, 2011.
  5. Li Q.Z., Xu J.X., Yang L.Y. et al. LED light quality affect growth, alkaloids contents, and expressions of amaryllidaceae alkaloids biosynthetic pathway genes in Lycoris longituba. J Plant Growth Regul. 2021; 40: 1625–1637. doi: 10.1007/s00344-021-10298-2.
  6. Zhang S., Zhang L., Zou H. et al. Effects of Light on Secondary Metabolite Biosynthesis in Medicinal Plants. Front Plant Sci. 2021; 12: 781236. doi: 10.3389/fpls.2021.781236.
  7. Terasaka K., Sakai K., Sato F. et al. Thalictrum minus cell cultures and ABC-like transporter. Phytochemistry. 2003; 62(3): 483–489. doi: 10.1016/s0031-9422(02)00548-4.
  8. Томилова С.В., Кочкин Д.В., Тюрина Т.М. и др. Особенности роста и синтеза вторичных метаболитов в культурах in vitro Digitalis lanata Ehrh. Физиология растений. 2022; 69(2): 149–160.
  9. Цыбулько Н.С., Фонин В.С., Савина Т.А. Применение хроматоспектрофотометрического количественного определения алкалоидов культуры ткани маклейи. В кн.: Труды III Международного симпозиума «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования». Москва–Пущино; 1999: 178–180.
  10. Быков В.А., Дубинская В.А., Минеева М.Ф. и др. Способ выявления веществ, обладающих противомикробными и противовирусными свойствами in vitro: патент 2181891 Рос. Федерация. 2001.
  11. Лупанова И.А., Ферубко Е.В., Курманова Е.Н. и др. Изучение противоязвенной, противовоспалительной и иммуномодулирующей активности полиэкстракта плодов Ziziphus Jujuba Mill. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2024; 10: 3–10. doi: 10.29296/25877313-2024-10-01.
  12. Aebi H. Glutathione reductase. Methods in enzymatic analysis. H.V. Bergmeyer (ed). 1974; 2: 673–678.
  13. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Метод определения активности каталазы. Лабораторное дело. 1988; 1: 16–19.
  14. Кульчин Ю.Н., Булгаков В.П., Гольцова Д.О., Субботин Е.П. Оптогенетика растений – светорегуляция генетического и эпигенического механизмов управления онтогенезом. Вестник Дальневосточного отделения Российской академии наук. 2020; 1: 5–25.
  15. Гумерова Е.А., Акулов А.Н., Румянцева Н.И. Красный и синий свет по-разному влияют на накопление флавонолов и проантоцианидинов в культуре клеток гречихи татарской. В кн.: II Международная научно-практическая конференция «Современные подходы и методы в защите растений». 2020: 146–147.
  16. Li Y.Q., Kong D.X., Liang H.L., Wu H. Alkaloid content and essential oil composition of Mahonia breviracema cultivated under different light environments. J Appl Bot Food Qual. 2018; 91: 171–179. doi: 10.5073/JABFQ.2018.091.023.
  17. Mushtaq S., Rather M.A., Qazi P.H. et al. Isolation and characterization of three benzylisoquinoline alkaloids from Thalictrum minus L. and their antibacterial activity against bovine mastitis. Journal of Ethnopharmacology. 2016; 193: 221–226. doi: 10.1016/j.jep.2016.07.040
  18. Gromova A.S., Lutsky V.I., Li D. et al. Thalicosides A1-A3, minor cycloartane bisdesmosides from Thalictrum minus. J Nat Prod. 2000; 63(7): 911–914. doi: 10.1021/np000017v.].
  19. Badamjav R., Zhang L., Sonom D. et al. Thalictrum minus L. ameliorates particulate matter-induced acute lung injury in mice. J Ethnopharmacol. 2021; 10; 264: 113379. doi: 10.1016/j.jep.2020.113379.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

Согласие на обработку персональных данных

 

Используя сайт https://journals.rcsi.science, я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных») даю согласие на обработку персональных данных на этом сайте (текст Согласия) и на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика» (текст Согласия).