Изучение влияния пептидных биорегуляторов на возрастные изменения кожи в культуральной модели в формате 3D


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Проведено изучение действия инъекционного препарата для мезотерапии (Meso-Wharton Р199™) на культуры дермалънъх фибробластов, моделирующих состояние клеток в (зрелой) стареющей коже. Материал и методы. В работе использовали культуру фибробластов на 4-м пассаже (Р4), которая соответствовала по своим характеристикам фибробластам молодой кожи (контроль) и культуру фибробластов после 18-го пассажа (Р18), в которой все признаки старения дермальнъгх фибробластов (преобладание крупнъгх плащевидных и парусовиднъгх клеток, снижение темпов клеточного деления) бъгли хорошо заметны. Биоактивность оценивали по морфологии клеток, эпителио-мезенхимной пластичности и экспрессии характерных для фибробластов маркеров: цитокератина 19, эластина, а-гладкомышечного актина (aSMA), PCNA (маркера пролиферации), коллагенов типов I, III, IV и фибронектина. Результаты. При культивировании фибробластов Р18 с исследуемым инъекционным препаратом происходит формирование сфероидов, по срокам сопоставимое с формированием сфероидов из молодых фибробластов Р4. Из культуры фибробластов Р18, культивированных без препарата не происходит формирования полноценного сфероида, а наблюдается агрегация клеток и их постепенная гибель с некротической массой внутри агрегата. Присутствие в ростовой среде препарата стимулирует «омоложение» клеток и последующее восстановление мезенхимо-эпителиальной пластичности культивированных фибробластов за счет восстановленной способности синтезировать в достаточном для установления межклеточных контактов количестве компонентов внеклеточного матрикса (фибронектина и коллагенов), что влияет на способность формировать сфероиды. Культивирование образовавшихся сфероидов с препаратом стимулирует экспрессию эластина, коллагена IV типа, фибронектина, белка внеклеточного матрикса, поддерживающего упругость кожи, а поверхностные клетки активно экспрессируют цитокератин 19. Результаты исследования убедительно демонстрируют эффективность применения мезотерапевтического препарата для омоложения кожи.

Об авторах

К. В Кожина

ООО Центр восстановительной медицины

117997, г. Москва, Россия

Е. Н Волкова

ООО Центр восстановительной медицины

117997, г. Москва, Россия

И. Н Сабурина

ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии»; ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Минздрава РФ

125315, г. Москва, Россия

Сергей Георгиевич Морозов

ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии»

Email: biopharm@list.ru.
доктор мед. наук, профессор, член-корреспондент РАН, заместитель директора по научной работе и заведующий лабораторией Общей и перинатальной нейроиммунопатологии 125315, г. Москва, Россия

И. М Зурина

ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии»

125315, г. Москва, Россия

Н. В Кошелева

ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии»; ФГБОУ ВО Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Биологический факультет 125315, г. Москва, Россия

А. А Горкун

ФГБНУ «НИИ общей патологии и патофизиологии»

125315, г. Москва, Россия

А. А Григорьева

ООО Центр восстановительной медицины

117997, г. Москва, Россия

Список литературы

  1. Смирнова И.О. Функциональная морфология старения кожи. Успехи геронтологии. 2004; 13: 44-51.
  2. Златопольский А.Д., Чубкина А.Н., Зайденберг М.А. Влияние ферментов фибронектина на пролиферативную активность фибробластов. Биохимия. 1989; 1: 74-9.
  3. Benedetto A.V. The environment and the skin aging. Clin. Dermatol. 1998; 16(1): 129-39.
  4. Ramata-Stunda A., Boroduskis M., Vorobjeva V., Ancans J. Cell and tissue culture-based in vitro test systems for evaluation of natural skin care product ingredients. Environ. Exper. Biol. 2013; 11: 159-77. http://in-cell.eu/uploads/files/file_14.pdf
  5. Maas-Szabowski N., Shimotoyodome A., Fusenig N.E. Keratinocyte growth regulation in fibroblast cocultures via a double paracrine mechanism. J. Cell Sci. 1999; 112(12): 1843-53.
  6. Trompezinski S., Berthier-Vergnes O., Denis A. Schmitt D, Viac J. Comparative expression of vascular endothelial growth factor family members, VEGF-B, -C and -D, by normal human keratinocytes and fibroblasts. Exp. Dermatol. 2004; 13(2): 98-105.
  7. Sorrel J.M., Baber M.A., Caplan A.I. Site-matched papillary and reticular human dermal fibroblasts ditter in their release of specific growth factors/cytokines and in their interaction with keratinocytes. J. Cell Physiol. 2004; 200(1): 134-45.
  8. Вялов С.П., Пшенистов К.П., Куиндоз П. Современные представления о регуляции процесса заживления ран. Анналы пластической, реконструктивной и эстетической хирургии. 1999; 1: 49-58.
  9. Werner S., Krieg T., Smola H. Keratinocyte-fibroblast interactions in wound healing. J. Invest. Dermatol. 2007; 127(5): 998-1008.
  10. Sorrel J.M., Caplan A.I. Fibroblast heterogeneity: more than skin deep. J. Cell Sci. 2004; 117(Pt 5): 667-75.
  11. Zhao Y., Wang J., Yan X. Preliminary survival studies on autologous cultured skin fibroblasts transplantation by injection. Cell Transplant. 2008; 17(7): 775-83.
  12. Freedland M., Karmiol S., Rodriguez J., Normolle D., Smith D. Jr., Garner W. Fibroblast responses to cytokines are maintained during aging. Ann. Plast. Surg. 1995; 35(3): 290-6.
  13. Сабурина И.Н., Репин В.С. 3D-культивирование: от отдельных клеток к регенерационной ткани (К вопросу о феномене эпителиомезенхимальной пластичности). Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2010; 5(2): 75-86.
  14. Yamaguchi Y., Hearing V.J., Itami S., Yoshikawa K., Katayama I. Mesenchymal-epithelial interactions in the skin: aiming for site-specific tissue regeneration. J. Dermatol. Sci. 2005; 40(1): 1-9.
  15. Desmouliere A., Chaponnier C., Gabbiani G. Tissue repair, contraction the myofibroblast. Wound Repair Regen. 2005; 13(1): 7-12.

© ООО "Эко-Вектор", 2016


 


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах