Диагностика инфекционного и гемагглютинирующего титра вируса гриппа А/Маллард Пенсильвания/10218/84 (H5N2) по изменению микровязкости вирусной мембраны после взаимодействия с фосфолипидными модификаторами на примере бесхолестериновых липосом

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Противовирусное действие ряда препаратов связано с модификацией липидной мембраны вирусов вследствие их применения. Один из возможных механизмов такой модификации вирусной мембраны заключается в экстракции холестерина из мембран вирионов.

Цель работы. Изучить методику определения инфекционного и гемагглютинирующего титра вируса гриппа птиц по изменению микровязкости вирусной мембраны после инкубации с фосфолипидными модификаторами ‒ бесхолестериновыми липосомами, состоящими из фосфатидилхолина и фосфатидилэтаноламина в мольном отношении 1 : 2, в течение 48 ч.

Материалы и методы. Процесс экстракции подтверждали двумя методами: гель-фильтрацией с радиоактивно меченными липосомами и вирионами, а также по изменению величины поляризации флуоресцентного зонда 1-анилинонафталин-8-сульфонат-аниона (8-АНС) в вирусной мембране.

Результаты. Обнаружена корреляционная связь между изменением инфекционного и гемагглютинирующего титра и микровязкостью вирусной мембраны.

Заключение. Предложенная в работе методика позволяет проводить количественное определение инфекционной и гемагглютинирующей активности вируса гриппа в зависимости от изменений микровязкости мембран вирусов после взаимодействия фосфолипидных модификаторов. Представляется возможным использовать выявленную зависимость для определения инфекционной и гемагглютинирующей активности вируса гриппа в пределах одного серотипа в клинической лабораторной диагностике, применяя различные флуоресцентные зонды. В качестве липофильных модификаторов вирусной мембраны можно использовать не только липосомы определенного состава, но и такие соединения, как этиленгликоль, эритрит, глицерин.

Об авторах

Николай Александрович Контаров

ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет); ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»

Автор, ответственный за переписку.
Email: kontarov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-0030-4867

канд. биол. наук, ведущий научный сотрудник лаборатории детских вирусных инфекций

Россия, 119991, Москва; 115088, Москва

Ирина Владимировна Погарская

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»

Email: kozyr81@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3580-6277

канд. биол. наук, ведущий научный сотрудник отдела вирусологии им. О.Г. Анджапаридзе

Россия, 115088, Москва

Екатерина Игоревна Долгова

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»

Email: dolgovaev@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-8985-7569

младший научный сотрудник отдела вирусологии им. О.Г. Анджапаридзе

Россия, 115088, Москва

Елена Олеговна Контарова

ФГБУ «Федеральный научно-клинический центр специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий» ФМБА России

Email: kontarova@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5550-7875

канд. мед. наук, врач лучевой диагностики

Россия, 115682, Москва

Владимир Васильевич Помазанов

ГОУ ВО МО «Государственный гуманитарно-технологический университет»

Email: ecolab@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-7336-9912

д-р техн. наук, профессор

Россия, 142611, Орехово-Зуево

Рамис Рафикович Гафаров

ГОУ ВО МО «Государственный гуманитарно-технологический университет»

Email: gafarov68@mail.ru
ORCID iD: 0009-0009-2869-7421

канд. биол. наук

Россия, 142611, Орехово-Зуево

Сейфаддин Гашимович Марданлы

ГОУ ВО МО «Государственный гуманитарно-технологический университет»

Email: ecolab@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3650-2363

д-р мед. наук

Россия, 142611, Орехово-Зуево

Надежда Васильевна Юминова

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»

Email: yuminova@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-7723-4038

д-р биол. наук, главный научный сотрудник отдела вирусологии им. О.Г. Анджапаридзе

Россия, 115088, Москва

Список литературы

  1. Kingery-Wood J.E., Williams K.W., Sigal G.B., Whitesides G.M. The agglutination of erythrocytes by influenza virus is strongly inhibited by liposomes incorporating an analog of sialyl gangliosides. J. Am. Chem. Soc. 1992; 114(18): 7303–5. https://doi.org/10.1021/ja00044a057
  2. van Meer G., Davoust J., Simons K. Parameters affecting low pH-mediated fusion of liposomes with the plasma membrane of cells infected with influenza virus. Biochemistry. 1985; 24(14): 3593–602. https://doi.org/10.1021/bi00335a030
  3. Hendricks G.L., Weirich K.L., Viswanathan K., Li J., Shriver Z.H., Ashour J., et al. Sialylneolacto-N-tetraose c (LSTc)-bearing liposomal decoys capture influenza a virus. J. Biol. Chem. 2013; 288(12): 8061–73. https://doi.org/10.1074/jbc.m112.437202
  4. White J., Helenius A. pH-dependent fusion between the Semliki Forest virus membrane and liposomes. Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1980; 77(6): 3273–77. https://doi.org/10.1073/pnas.77.6.3273
  5. Sulczewski F.B., Liszbinski R.B., Romão P.R.T., Rodrigues Junior L.C. Nanoparticle vaccines against viral infections. Arch. Virol. 2018; 163(9): 2313–25. https://doi.org/10.1007/s00705-018-3856-0
  6. Hernandez L.D., Peters R.J., Delos S.E., Young J.A., Agard D.A., White J.M. Activation of a retroviral membrane fusion protein: soluble receptor-induced liposome binding of the ALSV envelope glycoprotein. J. Cell Biol. 1997; 139(6): 1455–64. https://doi.org/10.1083/jcb.139.6.1455
  7. McGill A.R., Markoutsa E., Mayilsamy K., Green R., Sivakumar K., Mohapatra S., et al. Acetate-encapsulated linolenic acid liposomes reduce SARS-CoV-2 and RSV infection. Viruses. 2023; 15(7): 1429. https://doi.org/10.3390/v15071429
  8. Grünewald K. Viral fusion: how Flu induces dimples on liposomes. EMBO J. 2010; 29(7): 1165-6. https://doi.org/10.1038/emboj.2010.35
  9. Hendricks G.L., Velazquez L., Pham S., Qaisar N., Delaney J.C., Viswanathan K., et al. Heparin octasaccharide decoy liposomes inhibit replication of multiple viruses. Antiviral Res. 2015; 116: 34–44. https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2015.01.008
  10. Mahy B.W.J. Virology: A Practical Approach. IRL Press; 1985. https://doi.org/10.1136/jcp.38.11.1319-a
  11. Pagano R., Thompson T.E. Spherical lipid bilayer membranes. Biochim. Biophys. Acta. 1967; 144(3): 666–9. doi: 10.1016/0005-2760(67)90055-0
  12. Контаров Н.А., Лотте В.Д., Контарова Е.О., Балаев Н.В., Юминова Н.В., Зверев В.В. New method for measurement of size and concentration of lyposomes. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2009; 86(6): 95–8. https://elibrary.ru/rcdmzz
  13. Sabın J., Prieto G., Ruso J.M., Hidalgo-Alvarez R., Sarmiento F. Size and stability of liposomes: A possible role of hydration and osmotic forces. Eur. Phys. J. E. Soft Matter. 2006; 20(4): 401–08. https://doi.org/10.1140/epje/i2006-10029-9

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Изменение размеров липосом при 4 °С в течение 20 сут.

Скачать (491KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Гель-фильтрация радиоактивно меченых 3Н-инулином липосом без холестерина и 14С-холестерином вирионов гриппа.

Скачать (632KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Зависимость инфекционного титра вируса от микровязкости вирусной мембраны.

Скачать (567KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Зависимость гемагглютинирующего титра вируса от микровязкости вирусной мембраны.

Скачать (621KB)
Метаданные

© Контаров Н.А., Погарская И.В., Долгова Е.И., Контарова Е.О., Помазанов В.В., Гафаров Р.Р., Марданлы С.Г., Юминова Н.В., 2025

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».