Gooch crucible used for making total preparations of trematodes

Cover Page

Cite item

Full Text

Full Text

Во многих уже довольно известных и опубликованных в последние годы методических и справочных изданиях приведены методики и их модификации по изготовлению тотальных препаратов плоских червей (Судариков, Шигин, 1965; Хотеновский, 1966; Ивашкин и др., 1971; Куклин, 2013). В частности, Хотеновский (1966), обращая внимание на значительные затраты времени при изготовлении тотальных препаратов, предложил модифицировать уже известную методику, что позволило ускорить этот процесс. В настоящее время способ приготовления предусматривает: 1) подготовку трематод, обусловленную их состоянием – нативный или фиксированный материал; 2) окраску с возможной дифференцировкой; 3) обезвоживание; 4) просветление; 5) заключение в бальзам.

Наши предложения связаны с оптимизацией технологии подготовки, проводки и приготовления тотальных препаратов. С этой целью мы применили в качестве своеобразного «контейнера» для проводки трематод тигель Гуча – фарфоровый стаканчик с отверстиями на дне (рис. 1). В тигель помещали трематод и вели их, не извлекая, до этапа заключения в бальзам. Тигель, за счет отверстий на дне, хорошо пропускает жидкости в процессе проводки, а также является устойчивым и нейтральным в отношении используемых реактивов. Согласно ГОСТу тигли имеют номера, которые характеризуют следующие параметры фарфорового стаканчика: высоту, верхний и нижний диаметр, количество отверстий на дне и их диаметр (табл.) (https://reaktivtorg.ru/tigel-gucha/). Тигли с минимальным диаметром отверстий 0.85–1.00 мм (соответствуют №№ 1, 2 и 3) являются оптимальными для изготовления препаратов (табл. 1, рис. 1).

 

Рисунок. 1. Тигель Гуча, общий вид (https://reaktivtorg.ru/tigel-gucha/)

Figure 1. Gooch crucible (https://reaktivtorg.ru/tigel-gucha/)

 

Таблица 1. Размеры фарфоровых тиглей Гуча (ГОСТ 9147-80) (https://reaktivtorg.ru/tigel-gucha/)

Table 1. Dimensions of Gooch crucibles (GOST 9147-80) (https://reaktivtorg.ru/tigel-gucha/)

Размерные параметры тигля Гуча

(фарфорового стаканчика), мм

Номера (типы) тиглей

№ 1

№ 2

№ 3

H (высота)

32±2

43±2

55±3

D (наружный)

25±1

35±2

45±2

d (донышка)

14±1

18±1

22±1

d1 (отверстия в донышке)

0.85±0.20

1.00±0.20

1.00±0.20

Число отверстий

26

37

49

 

В процессе «проводки» применяли вспомогательные сосуды – стеклянные бюксы. В бюксы заливали реактивы, далее в них помещали тигель Гуча с трематодами. Диаметр бюкса должен быть больше, чем диаметр тигля, использовали бюксы диаметром от 40 мм и более (объем 30–40 мл). Тигель Гуча с трематодами помещали в бюкс с реактивом, после прохождения соответствующего этапа тигель перемещали в следующий бюкс (рис. 2). Проводку и изготовление препаратов из плоских червей производили по уже известным методикам (Судариков, Шигин, 1965; Хотеновский, 1966; Ивашкин и др., 1971).

 

Рисунок 2. Проводка материала, тигель Гуча с трематодами помещен в бюкс с реактивом (ориг).

Figure 2. Material wiring, Gooch crucible with trematodes placed in byuks with reagent (orig.)

 

Практическим преимуществом применения тигля являются, прежде всего, возможность изготовления одновременно большого числа (серии) тотальных препаратов трематод. Например, таким способом мы изготовили серии препаратов из марит трематод от различных видов и групп хозяев (Dicrocoelium dendriticum, Parafasciolopsis fasciolaemorpha, Opisthorchis felineus, Pseudamphistomum truncatum, Metorchis bilis, M. xanthosomus, Alaria alata и др.). Еще одним плюсом применения тигля является возможность многократного использования реактивов.

Следует обратить внимание на некоторые ограничения в применении тигля Гуча. Рискованно использовать тигель для трематод размером менее 1.0 мм и для личинок (метацеркарий) трематод, т.к. подобные мелкие объекты могут при проводке «выходить» за пределы тигля.

ФИНАНСИРОВАНИЕ РАБОТЫ

Работа выполнена при финансовой поддержке Минприроды России, государственное задание № 051-00013-23-02.

СОБЛЮДЕНИЕ ЭТИЧЕСКИХ СТАНДАРТОВ

В данной работе отсутствуют исследования человека и животных, соответствующих критериям Директивы 2010/63/EU.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

Авторы данной работы заявляют, что у них нет конфликта интересов.

×

About the authors

B. V. Romashov

Воронежский государственный заповедник; Воронежский государственный аграрный университет им. императора Петра I

Author for correspondence.
Email: bvrom@rambler.ru
Russian Federation, Воронеж, 394080; ул. Мичурина 1, Воронеж, 394087

N. B. Romashova

Воронежский государственный заповедник

Email: borisromashov36@gmail.com
Russian Federation, Воронеж, 394080

S. N. Semenov

Воронежский государственный аграрный университет им. императора Петра I

Email: bvrom@rambler.ru
Russian Federation, ул. Мичурина 1, Воронеж, 394087

A. V. Bakhtina

Воронежский государственный аграрный университет им. императора Петра I

Email: bvrom@rambler.ru
Russian Federation, ул. Мичурина 1, Воронеж, 394087

References

  1. Ивашкин В.М., Контримавичус В.Л., Назарова Н.С. 1971. Методы сбора и изучения гельминтов наземных млекопитающих. М., Наука, 123 с. [Ivashkin V.M., Kontrimavichus V.L., Nazarova N.S. 1971. Methods for collecting and studying helminths of terrestrial mammals. M., Nauka, 123 p. (in Russian)].
  2. Куклин В.В. 2013. Модифицированная методика изготовления тотальных препаратов паразитических плоских червей. Российский паразитологический журнал 4: 66–67. [Kuklin V.V. 2013. Modified technique for making total preparations of parasitic Platyhelminthes. Russian Journal of Parasitology 4: 66–67. (in Russian)].
  3. Судариков В.Е., Шигин А.А. 1965. К методике работы с метацеркариями отр. Stregiida // Труды Гельминтол. лаб. АН СССР. Т. 15: 158–166. [Sudarikov V.E., Shigin A.A. 1965. On the method of working with metacercariae ord. Stregiida // Proceedings of the Helminthological Laboratory of the USSR Academy of Sciences. T. 15: 158–166. (in Russian)].
  4. Хотеновский И.А. 1966. О применении методики, предложенной Чаббом (1962), для изготовления тотальных препаратов из трематод. Зоологический журнал 45(11): 1720–1721. [Khotenovsky I.A. 1966. On Chubb’s (1962) technique used for making total preparations of trematodes. Zoologicheskiy Zhurnal. 45 (11): 1720–1721. (in Russian)].
  5. Тигель Гуча (электронный ресурс). Режим доступа: https://reaktivtorg.ru/tigel-gucha/ [Gucha’s crucible (electronic resource). Access mode: https://reaktivtorg.ru/tigel-gucha/ (in Russian)].

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download
2. Figure 1. Gooch crucible

Download (84KB)
Indexing metadata
3. Figure 2. Material wiring, Gooch crucible with trematodes placed in byuks with reagent (orig.)

Download (136KB)
Indexing metadata

Copyright (c) 2024 Russian Academy of Sciences

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».