EBF1 повышает чувствительность клеток рака шейки матки к цисплатину посредством активации транскрипции FBN1

Цисплатин широко используется в химиотерапии рака шейки матки, четвертого по частоте злокачественного заболевания у женщин в мире. Однако у некоторых пациенток развивается резистентность к препарату, что ведет к неэффективности химиотерапии, рецидиву опухоли и плохому прогнозу. Поэтому разработка стратегий идентификации регуляторных механизмов, лежащих в основе развития рака шейки матки, и способов повышения чувствительности опухолевых клеток к цисплатину поможет повысить выживаемость пациентов. Нами изучены механизмы EBF1-зависимой регуляции FBN1, которая повышает чувствительность клеток рака шейки матки к химиотерапии. В тканях рака шейки матки, резистентных или чувствительных к химиотерапии, а также в линиях клеток, резистентных или чувствительных к цисплатину (SiHa и SiHa-DDP), определена экспрессия EBF1 и FBN1. Клетки SiHa-DDP трансдуцировали лентивирусами, кодирующими EBF1 или FBN1, для оценки влияния этих двух белков на жизнеспособность клеток, экспрессию MDR1 и MRP1, и агрессивность клеток. Более того, предсказано и показано взаимодействие между EBF1 и FBN1. Наконец, для дальнейшей верификации механизма EBF1/FB1-зависимой регуляции чувствительности клеток рака шейки матки к цисплатину клетки SiHa-DDP, трансдуцированные лентивирусами, несущими ген EBF1 и экспрессирующими шпилечную РНК, специфичную к FBN1, трансплантировали мышам и получили модель рака шейки матки. Показано снижение экспрессии EBF1 и FBN1 в тканях и клетках рака шейки матки, в частности в устойчивых к химиотерапии. Трансдукция клеток SiHa-DDP лентивирусами, кодирующими EBF1 или FBN1, ведет к снижению жизнеспособности, IC₅₀, пролиферативной активности, способности к образованию колоний, агрессивности и повышению уровня апоптоза клеток. Показано, что EBF1 активирует транскрипцию FBN1, связываясь с промоторной областью гена FBN1. Кроме того, установлено, что сайленсинг FBN1 отменяет стимулирующее действие сверхэкспрессии EBF1 на чувствительность клеток рака шейки матки к химиотерапии in vivo. Таким образом, EBF1 стимулирует чувствительность клеток рака шейки матки к химиотерапии путем активации транскрипции FBN1.