Том 9, № 3 (2012)

Цель работы. Для внедрения покомпонентной аллергодиагностики в лабораторную практику необходимо создать протоколы получения, очистки и верификации свойств синтетических аллергенов. Мажорный белок пыльцы березы Bet v 1, являющийся представителем суперсемейства PR-10, представляет значительный интерес благодаря высокой частоте случаев сенсибилизации и проявлению кросс-реактивных свойств. Материалы и методы. Для получения синтетического белка были применены методы клонирования ДНК с последующей экспрессией в культуре клеток E. coli. Очистка выполнена методом металл-аффинной хроматографии. Оценка иммунохимических свойств проведена в аллергосорбентном тесте, ИФА-анализе и лайн-блоте. Результаты. В ходе работы нами получен высокопродуктивный бактериальный штамм E. coli, содержащий экспрессионную конструкцию мажорного аллергена пыльцы березы — белок Bet v 1. Произведена оценка его физико-химических и иммунологических свойств в различных тест-системах с использованием референсных препаратов и панели сывороток. Заключение. Показано, что полученный синтетический аналог белка Bet v 1 может быть использован для тестирования наличия аллерген-специфических иммуноглобулинов класса Е в образцах сыворотки крови. Данный аллергенный компонент может быть применен для покомпонентной оценки профиля сенсибилизации пациента.

Цель. Оценить динамику растворимых маркеров апоптоза у детей раннего возраста с атопическим дерматитом (АтД) для уточнения механизмов иммунопатогенеза и оптимизации диетотерапии. Материалы и методы. Наблюдение включало 66 детей в возрасте от 1,5 до 12 мес с АтД (47 мальчиков и 19 девочек), находившихся на искусственном вскармливании. При аллергологическом обследовании у всех детей была выявлена сенсибилизация к белку коровьего молока. Наличие аллерген-специфических IgG и IgE к белку коровьего молока, его фракциям и белку козьего молока явилось основанием для включения детей в первую группу, которая получала гидролизаты в качестве диетотерапии (27 детей), а 39 детей второй группы, у которых не было выявлено сенсибилизации к белку козьего молока, получали смеси на его основе. Содержание растворимых маркеров апотоза (sCD153, каспазы-8, sFas-L, каспазы-9 и аннексина-5) в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом (ELISA). Результаты. Полученные результаты свидетельствовали об активации сигнальных систем апоптоза у детей с АтД за счет повышения уровней sFas-L и sCD153. Содержание каспаз-8 и -9 было достоверно ниже, чем в контрольной группе, что отражало нарушение элиминации измененных иммунокомпетентных клеток. Концентрации аннексина-5 были значительно снижены у детей с АтД по сравнению с контрольной группой. При оценке динамики исследованных показателей у детей с АтД при проведении диетотерапии отмечено статистически достоверное повышение уровня каспазы-9 в обеих группах. Уровень каспазы-8 повышался только в группе детей, использовавших смеси на основе козьего молока. Статистически значимых различий содержания sFas-L, sCD153 и аннексина-5 на фоне диетотерапии не выявлено в обеих группах. Заключение. Полученные данные свидетельствовали об участии sCD153, каспазы-8, sFas-L, каспазы-9 и аннексина-5 в реализации аллергического воспаления у детей раннего возраста с АтД. Диетотерапия с использованием смесей на основе козьего молока способствовала более физиологичному восстановлению эффекторного звена апоптоза.

Цель. Совершенствование методов контроля лечения микоплазменной инфекции у детей, больных бронхиальной астмой (БА). Материалы и методы. 52 ребенка в возрасте от 1 до 4 лет, больных БА, имевших микоплазменные антигены в крови, обследованы до лечения микоплазменной инфекции, 15 больных обследованы также через I,5 мес после лечения. Для обнаружения антигенов и ДНК микоплазм использовали реакцию агрегат-гемагглютинации (РАГА), метод прямой иммунофлюоресценции (РИФ) и реакцию полимеразной цепной реакции (ПЦР). Результаты. В РАГА Mycoplasma pneumoniae (Mpn) выявлена у 65,4% больных, Mycoplasma hominis (Mh) — у 32,7%, Ureaplasma urealyticum — у 50%, Mycoplasma arthritidis — у 46,2%, Mycoplasma fermentrans — у 46,2%. Более детально исследовали Mpn и Mh. Антигены Mpn и Mh выявляли в РАГА в крови пациентов значительно чаще, чем ДНК методом ПЦР. ДНК в составе циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) выявляли чаще, чем в свободном состоянии. После лечения азитромицином количество проб, положительных по антигенам и ДНК в свободном состоянии и в составе ЦИК, уменьшилось. В большинстве случаев ДНК обнаруживаемая в сыворотке крови в свободном и в связанном с ЦИК состоянии принадлежит живым персистирующим клеткам микоплазм. Заключение. Расширение возможностей диагностики микоплазменной инфекции при БА у детей позволяет применять комплексный подход к лабораторной диагностике, контролю лечения, прогнозированию течения заболевания.

Наиболее благоприятный прогноз при своевременно установленном диагнозе и правильно подобранной терапии имеют первичные иммунодефициты с нарушением в гуморальном звене иммунитета. Несмотря на длительный опыт использования внутривенных иммуноглобулинов (ВВИГ) при данной патологии, единого мнения о дозах и интервалах введения данных препаратов нет. В статье представлены клинические данные использования препарата 10% иммуноглобулина G Гамунекс в режиме индивидуализации дозы у больных с ПИД с нарушением синтеза иммуноглобулинов.