PRODUCTION OF BETULA PENDULA POLLEN Bet v 2 ALLERGEN WITH IMMUNOREGULATORY SIGNALS AND ITS RECOGNITION BY IgE ANTIBODIES


Cite item

Full Text

Open Access Open Access
Restricted Access Access granted
Restricted Access Subscription Access

Abstract

Background. Creation of recombinant proteins, containing profilin and signal peptides which provide proteasomal and lysosomal degradation pathways of proteins. Materials and methods. Plasmid pET-Bet v 2, encoding Bet v 2 allergen, was used as a base vector. Two signal peptides: C-terminal fragment of ornithine decarboxylase (ODCsig) and N-terminal fragment of human invariant chain (Ii) — were cloned into this vector. Recombinant proteins were produced in BL21 (DE3) strain of E. coli. The recombinant protein was purified using NiNTA agarose. Immunological specificity of the recombinant proteins was estimated by means of immune-enzyme methods using sera of patients suffering from birch pollen allergy. Results. Bet v 2 allergen (profilin) of Betula pendula pollen was modified by immunoregulatory peptides in order to change the IgE/IgG response ratio. Ornithine decarboxylase proteasome degradation signal was used to enhance the Th1 response and human invariant chain signal directed to lysosomes was used in order to enhance Th2 response. The production system of recombinant allergen Bet v 2 preparation suitable for immunological tests was developed. The produced highly purified chimeric proteins preparations bound IgE antibodies of allergic to birch pollen patients' sera efficiently. Conclusion. The new chimeric allergens based on Bet v 2 protein of Betula pendula pollen were created and isolated.

About the authors

N L Ryabova

Institute of Immunology

Russia

Y V Kuzmenko

Federal State-financed Institution of Science «Institute of Molecular Biology V.A. Engelhardt, Academy of Sciences

Russia

V V Tyutyaeva

Federal State-financed Institution of Science «Institute of Molecular Biology V.A. Engelhardt, Academy of Sciences

Russia

I V Andreev

Institute of Immunology

Russia

M N Sankov

Institute of Immunology

Russia

E S Starodubova

Federal State-financed Institution of Science «Institute of Molecular Biology V.A. Engelhardt, Academy of Sciences

Russia

O V Preobrazhenskaya

Federal State-financed Institution of Science «Institute of Molecular Biology V.A. Engelhardt, Academy of Sciences

Russia

A I Martynov

Institute of Immunology

Email: medimm@mail.ru
Russia

V L Karpov

Federal State-financed Institution of Science «Institute of Molecular Biology V.A. Engelhardt, Academy of Sciences

Russia

References

  1. Gafvelin G., Parmley S., Neimert-Andersson T. et al. Hypoallergens for allergen-specific immunotherapy by directed molecular evolution of mite group 2 allergens. The Journal of biological chemistry. 2007, v. 9, p. 3778-3787.
  2. Leifert J.A., Rodriguez-Carreno М.Р., Rodriguez F. et al. Targeting plasmid-encoded proteins to the antigen presentation pathways. Immunol. Rev. 2004, v. 199, p. 40-53.
  3. Стародубова Е.С., Исагулянц М.Г., Карпов В.Л. Регуляция процессинга иммуногена: сигнальные последовательности и их использование для создания нового поколения ДНК-вакцин. Acta Naturae. 2010, № 1, c. 59-65.
  4. Sirvent S., Tordesillas L., Villalba М. et al. Pollen and plant food profilin allergens show equivalent IgE reactivity, Ann. Allergy Asthma Immunol. 2011, v. 106, p. 429-435.
  5. Стародубова Е.С., Исагулянц М.Г., Карпов В.Л. Искусственное увеличение скорости утилизации обратной транскриптазы ВИЧ-1 по протеасомному пути. Мол. биол. 2006, № 6, c. 983-989.
  6. Бызова Н.А., Сотников Д.В., Жердев А.В. и соавт. Иммунохроматографический анализ уровня специфического сывороточного IgE человека для диагностики аллергии на пыльцу тимофеевки луговой. Иммунология. 2010, № 1, c. 47-51.
  7. Braciale T.J., Morrison L.A., Sweetser М.T. et al. Antigen presentation pathways to class I and class II MHC-restricted T lymphocytes. Immunol. Rev. 1987, v. 98, p. 95-114.
  8. Ciechanover A. Intracellular protein degradation: from a vague idea thru the lysosome and the ubiquitin-proteasome system and onto human diseases and drug targeting. Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 2005, v. 6, p. 79-87.
  9. Murakami Y., Matsufuji S., Kameji T et al. Ornithine decarboxylase is degraded by the 26S proteasome without ubiquitination. Nature. 1992, v. 360, p. 597-599.
  10. Zhang М., Pickart С.М., Coffino P. Determinants of proteasome recognition of ornithine decarboxylase, a ubiquitin-independent substrate. EMBO J. 2003, v. 22, p. 1489-1496.
  11. Bakke O., Dobberstein B. MHC class II-associated invariant chain contains a sorting signal for endosomal compartments. Cell. 1990, v. 63, p. 707-716.
  12. Odorizzi C.G., Trowbridge I.S., Xue L. et al. Sorting signals in the MHC class II invariant chain cytoplasmic tail and transmembrane region determine trafficking to an endocytic processing compartment. J. Cell Biol. 1994, v. 126, p. 317-330.
  13. Wallner М., Himly М., Neubauer A. et al. The influence of recombinant production on the immunologic behavior of birch pollen isoallergens. PloS one. 2009, v. 4, p. 8457.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2013 Pharmarus Print Media

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».