Динамика заживления и изменение бактериальной обсемененности инфицированной раны при применении пептида GHK и его структурных аналогов

Введение. В настоящее время перспективным направлением представляется использование для ускорения раневого процесса трипептида NH₂-Gly-L-His-L-Lys-COOH (GHK), который действует на процессы регенерации ткани, обладает антиоксидантными, иммунотропными и противовоспалительными эффектами. При этом недостатком всех пептидов является их быстрая деградация протеолитическими ферментами. Одним из способов повышения устойчивости пептидных молекул является включение в их структуру D-изомеров аминокислот. Ранее нами было установлено, что GHK-D-Ala оказывал более выраженное влияние на регенеративные процессы в ране, способствовал увеличению в ране количества клеток фибробластического ряда, макрофагов на фоне уменьшения числа гранулоцитов и лимфоцитов, представлено существенное влияние D-Ala-GHK и GHK-D-Ala на показатели врожденного иммунитета и перекисного окисления липидов.

Цель. Оценить динамику заживления и бактериальной обсемененности инфицированной раны при применении пептида глицил-гистидил-лизин и его структурных модификаций с D-аланином (D-Ala).

Материалы и методы. Эксперименты выполнены на крысах линии Wistar. В работе использовали пептид GHK и его структурные аналоги D-Ala-GHK и GHK-D-Ala; вводили внутрикожно вокруг раны в дозах 0,5 мкг/кг и 1,5 мкг/кг каждые 24 ч. на протяжении 3, 7 или 10 сут. Оценивали площадь раны с расчетом коэффициента относительного ранозаживления (КОР), скорость заживления, сроки исчезновения перифокального отека, очищения раны, появления грануляций и начала краевой эпителизации. Бактериальную обсемененность определяли путем подсчета колоний на питательных средах после посева на них материала из биоптата раны.

Результаты. На 3 сут. КОР увеличился в 3,2–5,3 раза (p < 0,05–0,01) после использования пептидов D-Alа-GHK и GHK-D-Ala в обеих дозах при отсутствии эффекта после введения GHK. На 7 сут. уменьшение площади раны достигло статистически значимых различий во всех подопытных группах. К 10 сут. также во всех группах использование пептидов вызвало уменьшение площади раны при наибольшей выраженности после введения пептида GHK-D-Ala (93%, p < 0,001). На 7–10 сут. GHK-D-Ala увеличил скорость заживления в 4,7–5,3 раза (p < 0,05–0,01) при отсутствии существенных изменений после введения GHK и D-Alа-GHK. Также GHK-D-Ala в обеих дозах способствовал наиболее раннему исчезновению перифокального отека, очищению раны, появлению грануляций и началу краевой эпителизации. Значимое снижение бактериальной обсемененности наблюдалось после введения всех пептидов на 7 и 10 сут. при наибольшей выраженности после применения GHK-D-Ala.

Заключение. В условиях инфицированной кожной раны применение пептида GHK и его структурных аналогов D-Alа-GHK и GHK-D-Ala ускоряет ее заживление на фоне снижения бактериальной обсемененности. При этом наиболее выраженные изменения данных показателей отмечались после введения пептида GHK-D-Ala, что указывает на важное значение защиты молекулы GHK от действия карбоксипептидаз. Перспективным продолжением исследований в данном направлении может являться разработка местного средства с антибактериальным действием для стимуляции процессов регенерации в ране.