APPLICATION OF DIFFERENT FLUORESCENT DYES FOR THE CELL NUCLEUS STAINING IN A FIXED BIOLIDGICAL MATERIAL


Cite item

Full Text

Open Access Open Access
Restricted Access Access granted
Restricted Access Subscription Access

Abstract

Fluorescent nuclear dyes are widely applicable to cell nucleus staining in various tissues. Application of dye for concrete research is serious problem and it is necessary to consider a number of parameters, such as extent of chromatin condensation in studied cells, method of tissue fixation etc. Features of fluorescent staining were studied for cells of various tissues fixed in zinc-ethanol-formaldehyde, 10% neutral formalin, Bouin’s fluid. The optimal staining protocol was developed for each fluorescent dye. Each protocol considers some features of used dye and method of material processing. The possibility of effective combination of nuclear fluorescent staining with immunofluorescent methods was also shown.

About the authors

M A Syrczova

Institute of Experimental Medicine of the North West Branch of the Russian Academy of Medical Science

Email: marina.syrczova@mail.ru
лаборант-исследователь отдела общей и частной морфологии St.-Petersburg, Russia

E A Kolos

Institute of Experimental Medicine of the North West Branch of the Russian Academy of Medical Science

Email: Koloselena1984@yandex.ru
младший научный сотрудник отдела общей и частной морфологии St.-Petersburg, Russia

V A Snegova

Institute of Experimental Medicine of the North West Branch of the Russian Academy of Medical Science

Email: biolaber@inbox.ru
старший научный сотрудник отдела общей и частной морфологии St.-Petersburg, Russia

V V Guselnicova

Institute of Experimental Medicine of the North West Branch of the Russian Academy of Medical Science; St.-Petersburg State University

Email: Guselnicova.Valeriia@yandex.ru
младший научный сотрудник отдела общей и частной морфологии St.-Petersburg, Russia

References

  1. Коржевский Д.Э., Кирик О.В., Сухорукова Е.Г., Гиляров А.В., Соловьев К.В., Грудинина Н.А. Изучение пространственной организации астроцитов головного мозга при помощи конфокальной лазерной микроскопии // Морфология. - 2009. - Т. 135, № 3. - С. 76-79.
  2. Лёвшин В.Л. Фотолюминесценция жидких и твердых веществ. - М. - Л.: Гостехиздат, 1951. - 456 с.
  3. Вежеева О.А., Сергеева Т.Н., Сергеев В.Г. Ингибирование нейровоспаления редуцирует дегенерацию дофаминергических нейронов черной субстанции мозга, индуцированную гиперэксперессией в них рекомбинантного гена альфа-синуклеина человека // Медицинский академический журнал. - 2013. - Т. 13, № 3. - С. 71-77.
  4. Коржевский Д.Э., Кирик О.В., Карпенко М.Н. Теоретические основы и практическое применение методов иммуногистохимии (руководство) / под ред. Д.Э. Коржевского. - СПб.: СпецЛит, 2012. - 116 с.
  5. Коржевский Д.Э., Кирик О.В. Специальные методы окраски, используемые для изучения структур клеточного ядра // Морфологическая диагностика. Подготовка материала для гистологического исследования и электронной микроскопии (руководство) / под ред. Д.Э. Коржевского. - СПб.: СпецЛит, 2012. - С. 59-65.
  6. Коржевский Д.Э. Нейрогенез и нейральные стволовые клетки // Медицинский академический журнал. - 2010. - Т. 10, № 4. - С. 175-182.
  7. Коржевский Д.Э., Гиляров А.В. Основы гистологической техники. - СПб.: СпецЛит, 2010. - 96 с.
  8. Коржевский Д.Э., Григорьев И.П., Новикова А. Д., Ковальчук В.А., Кирик О.В. Холинергические структуры поясной коры головного мозга крысы // Медицинский академический журнал. - 2013. - Т. 13, № 4. - С. 49-53.
  9. Suzuki T., Fujikura K., Higashiyama T., Takata K. DNA staining for fluorescence and laser confocal microscopy // J. Histochem. Cytochem. - 1997. - Vol. 45, № 1. - P. 49-53.
  10. Takata K., Hirano H. Use of fluorescein-phalloidin and DAPI as a counterstain for immunofluorescence microscopic studies with semithin frozen sections // Acta Histochem. Cytochem. - 1990. - Vol. 23, № 5. - P. 679-683.
  11. Сибирцев В.С. Флуоресцентные ДНК-зонды: исследование механизмов изменения спектральных свойств и особенностей практического применения // Биохимия. - 2007. - Т. 72, вып. 8. - С. 1090-1106.
  12. Matsuzaki T., Suzuki T., Fujikura K., Takata K. Nuclear staining for laser confocal microscopy // Acta Histochem. Cytochem. - 1997. - Vol. 30. - P. 309-314.
  13. Suzuki T., Matsuzaki T., Takata K. Fluorescence counter-staining of cell nuclear DNA for Multi-Color Laser Confocal Microscopy // Acta histochemica et cytochemica. - 1998. - Vol. 31, № 4. - P. 297-301.
  14. Никитин С.М., Гроховский С.Л., Жузе А.Л., Михайлов М.В., Заседателев А.С., Гурский Г.В., Готтих Б.П. Лиганды, обладающие сродством к определенным или последовательностям оснований ДНК // Биоорганическая химия. - 1981. - Т. 7, № 4. - С. 542-551.
  15. Битехтина М.А., Векшин Н.Л. 7-Аминоактиномицин как флуоресцентный зонд на расплетание и денатурацию ДНК // Биоорганическая химия. - 2008. - Т. 34, № 6. - С. 781-785.
  16. Greenlee J.E., Keeney P.M. Immunofluorescent labelling of K-papovavirus antigens in glycol methacrylate embedded material: a method for studying infected cell populations by fluorescence microscopy and histological staining of adjacent sections // Stain Technol. - 1982. - Vol. 57, № 4. - P. 197-205.
  17. Коржевский Д.Э., Сухорукова Е.Г., Гилерович Е.Г., Петрова Е.С. Преимущества и недостатки цинк-этанол-формальдегида как фиксатора для иммуноцитохимических исследований конфокальной лазерной микроскопии // Морфология. - 2013. - Т. 143, № 2. - С. 81-85.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2014 Syrczova M.A., Kolos E.A., Snegova V.A., Guselnicova V.V.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».