Том 29, № 4 (2025): МЕДИЦИНСКАЯ ГЕНЕТИКА

Актуальность. Метод секвенирования РНК единичных клеток (scRNA-seq) является современным подходом к изучению разнообразия и неоднородности транскриптов РНК в отдельных клетках, а также к выявлению состава различных типов клеток и функций в организмах, органах и тканях. Основанный на методе NGS (секвенирование нового поколения) метод scRNA-seq предоставляет огромный объем информации при глубоком клеточном разрешении в различных областях, позволяя делать новые открытия в понимании состава и паттернов взаимодействия отдельных типов клеток в организме человека, модельных животных и растений. Несмотря на активное развитие, оптимизацию и автоматизацию в течение последних 15 лет по всему миру, в нашей стране метод scRNA-seq является относительно новым и применяется сравнительно недавно. Задача освоения и успешного внедрения в практику данного метода актуальна и критична - метод является мощным инструментом для глубокого анализа и диагностики, о чем свидетельствуют результаты исследований, в которых он применялся. В обзоре представлены основные принципы и шаги реализации метода scRNA-seq как в разрезе технической реализации и пробоподготовки в виде надстройки над классическим методом NGS, так и в усложнении и расширении процесса обработки полученных данных, применения новых алгоритмов и баз данных. Рассмотрены уже имеющиеся на рынке коммерчески доступные технологий scRNA-seq и технологии, описанные в научных источниках, послужившие им в качестве прототипов и альтернатив. Представлены примеры и результаты использования таких технологий в различных областях науки и медицины таких как онкология, сенесценция, диагностика и клинические исследования. Выводы. Разработка и успешное применение метода scRNA-seq в научной и клинической практике станет залогом широкого спектра будущих открытий и основой персонализированной диагностики и здравоохранения.

Семейная гиперхолестеринемия (СГ) - это моногенное наследственное заболевание с нарушением метаболизма липидов. Распространенность СГ в общей популяции в среднем составляет 0,32% (95% ДИ: 0,26-0,39%). Заболевание может иметь как аутосомно-доминантный, так и аутосомно-рецессивный типы наследования. Известно 8 фенотипов СГ, связанных с мутациями в генах LDLRAP1, PCSK9, APOA2, APOB, GHR, GSBS, EPHX2 и LDLR, которые могут приводить к раннему проявлению патологии. Целью данного обзора является комплексное исследование данных современной литературы по молекулярно-генетическим, биологическим и психологическим аспектам СГ. Анализ сигнальных путей при СГ выявил три кластера генов и кодируемых ими белков, ответственных за следующие процессы: сборку, ремоделирование и клиренс липопротеинов плазмы (гены: LDLR, LDLRAP1, VLDLR, NPC1L1, APOC1, LPA, CETP, MTTP, APOB, PCSK9); метаболизм холестерина (ген: PPP1R17); регуляцию уровня частиц липопротеинов плазмы (ген: ANGPTL3). Белки PCSK9, APOB и MTTP идентифицированы как ключевые элементы (центральные узлы) этих метаболических сетей. Белок PPP1R17 вовлечен в механизмы долговременной депрессии, формы синаптической пластичности. Кроме того, в литературе описана ассоциация СГ с пятью другими генами: ABCG5, ABCG8, STAP1, CYP7A1, LIPA и PNPLA5. Таким образом, для ранней диагностики и эффективного ведения пациентов с СГ необходимо учитывать не только расширенный спектр ассоциированных генов и белков, но и психологическое состояние пациентов, в частности уровень их тревожности, депрессии и стресса.

Актуальность. Рак полости рта является одним из распространенных видов рака среди новообразований головы и шеи. Рак полости рта характеризуется плохим прогнозом, отсутствием специфических биомаркеров и высокоэффективного таргетного лечения. Для изучения патогенеза данного заболевания и разработки новых методов лечения необходимы актуальные модельные системы. Понимание молекулярных особенностей рака полости рта представляет собой один из ключевых этапов в разработке новых терапевтических стратегий. В настоящее время доступен широкий спектр биологических моделей, однако их универсальность ограничена. Экспериментальные модели для исследования рака полости рта прошли путь от клеточных культур до систем in vivo, которые имитируют патологические процессы и взаимодействие опухоли и стромы. В данном обзоре мы суммировали доступную информацию о современном состоянии экспериментальных систем рака полости рта. Существующие модели in vitro включают в себя иммортализованные и первичные клеточные линии, трехмерные модели - сфероиды и органоиды. In vivo системы представлены сингенными и ксеногенными моделями, иммунодефицитными, иммунокомпетентными, гуманизированными и генно-инженерными животными. Модельные системы in vitro эффективны в изучении биологии опухолей полости рта и оценки терапевтического агента за счет высокой воспроизводимости и скорости получения результатов. Существующие клеточные линии широко используются для фундаментальных и трансляционных исследований и являются важным звеном в доклинических испытаниях. Традиционные in vivo модели применяют во второй фазе доклинических исследований при разработке лекарственных средств и являются переходным этапом к дальнейшим клиническим испытаниям. Выводы. Несмотря на значительный прогресс в разработке различных экспериментальных моделей, каждая из них имеет свои преимущества и ограничения. Не существует универсальной модели, позволяющей полностью экстраполировать получаемые результаты на человеческий организм. Поэтому при планировании исследований важно тщательно подбирать наиболее подходящие биологические модели, исходя из поставленных задач.

Актуальность. Одной из задач Антинаркотической стратегии Российской Федерации до 2030 г., утвержденной Указом Президента Российской Федерации от 23.11.2020 г. № 733, является совершенствование системы мониторинга наркоситуации, повышение оперативности и объективности исследований в сфере контроля за оборотом наркотиков. В документе также указывается, что нормативно-правовое регулирование оборота наркотиков и антинаркотической деятельности должно осуществляется с учетом анализа наркоситуации. Наряду с мониторингом употребления наркотиков чрезвычайно важно изучать ситуацию с употреблением никотинсодержащих веществ и алкоголя (постановление Правительства Российской Федерации от 20.06.2011 № 485). Особую актуальность для социально-демографической стабильности общества имеет изучение данной проблемы среди подросткового населения как в России, так и за рубежом. Цель исследования: проведение комплексного мониторинга наркологической ситуации среди подросткового населения города Москвы. Материалы и методы: м атериалом комплексного исследования послужили данные по г. Москве: медицинская статистика наркологической службы, результаты анонимного анкетирования обучающихся первых курсов колледжей, пилотное интервьюирование экспертов - специалистов наркологической службы Москвы, работающих в сфере профилактики зависимого поведения среди детей, подростков. Результаты и обсуждение. Комплексное исследование было проведено в период 2016-2023 гг. Выявлена тенденция снижения первичной обращаемости подростков за наркологической помощью, что, в первую очередь, связано с сокращением группы потребителей алкоголя, несмотря на это, в целом, ситуации с злоупотреблением подростками психоактивных веществ остается серьезной. Выводы. В связи с полученными результатами целесообразно проведение дальнейшего комплексного мониторинга наркологической ситуации среди обучающихся (подростковой молодежи) и разработка на его основе предложений по мерам профилактики среди детей, подростков и молодежи, в том числе в образовательной среде.

Актуальность. Несмотря на многолетние научные исследования и клинические результаты, онкологические заболевания остаются глобальной проблемой здравоохранения. В последние годы возрос интерес к изучению роли микроорганизмов в возникновении, прогнозе и прогрессировании онкологических заболеваний. Вероятность выделения в составе ротовой микробиоты канцерогенных микроорганизмов достаточно велика. В связи с этим, понимание роли микроорганизмов в возникновении и течении онкологической патологии в дальнейшем может способствовать разработке инновационных стратегий профилактики, лечения злокачественных новообразований и минимизации осложнений противоопухолевого лечения. Целью данного обзора является литературный анализ роли представителей микробиоты полости рта человека в возникновении и прогнозе онкологических заболеваний. В ходе исследования проведены сбор и анализ 1050 научных работ с помощью поисковых систем PubMed, Google Scholar и eLIBRARY, опубликованных с 2003 по 2024 гг., среди которых 47 работ включены в данный литературный обзор. Согласно данным проведенного литературного анализа, профилактика, диагностика и лечение онкологических заболеваний могут и должны быть дополнены стоматологическими подходами, направленными на нормализацию микробиоты полости рта. Понимание того, что санация полости рта существенно снижает ее бактериальную обсемененность и как следствие сокращает количество патогенных и онкогенных микроорганизмов, может повысить качество противоопухолевого лечения без существенных материальных и социальных затрат. Выводы. Применение современных методов диагностики и мониторинга микробиоты полости рта в стоматологии может стать основой для разработки новых стратегий профилактики и лечения злокачественных новообразований слизистой оболочки полости рта. Интеграция этих данных в клиническую практику требует междисциплинарного сотрудничества между онкологами, микробиологами и стоматологами для улучшения прогноза лечения пациентов.

Актуальность. Знание научных концепций и достижений прошлых лет обеспечивает информативную базу для современных исследований. Более того, эти достижения наполняются наибольшим смыслом, если они ассоциируются с конкретным человеком и временем, в котором они произошли. Таким образом, знание истории науки позволяет не пренебрегать интеллектуальным наследием прошлых поколений и обращать его в потенциал для развития современных исследований. В одном из своих выступлений нобелевский лауреат сэр Эндрю Хаксли отмечал, что, если бы он в свое время более детально ознакомился с литературой XIX в., то некоторые свои исследования он смог бы успешно завершить гораздо быстрее и эффективнее. Нужно сказать, что XIX в. подарил человечеству целую плеяду крупнейших ученых, совершивших поистине судьбоносные открытия. Наша статья посвящена одному из таких ученых - сэру Чарльзу Беллу (1774-1842), выдающемуся шотландскому хирургу, анатому и экспериментатору-физиологу. Результаты исследования. В ходе своей научной, преподавательской и практической медицинской деятельности Белл реализовал накопленные знания и опыт в публикации множества трактатов, не теряющих актуальности и по сей день. Свой талант художника Чарльз Белл применил в анатомии, собственноручно иллюстрируя великолепные книги, написанные в соавторстве со старшим братом, известным хирургом Джоном Беллом, и в хирургии (точнее, в военно-полевой хирургии), зарисовывая раненых после сражения при Ватерлоо. Неоценимый вклад внес ученый и в развитие неврологии. Так, имя Чарльза Белла увековечено в названии длинного грудного (или «наружного дыхательного») нерва, в описании паралича нижних двигательных нейронов лицевого нерва и в «симптоме Белла», когда глазное яблоко закатывается вверх при попытке закрыть глаз. Широко известно его описание различий между пятым и седьмым черепными нервами, а также определение морфо-функциональных особенностей передних и задних корешков спинного мозга как закон Белла. За неоценимый вклад в науку Чарльз Белл был награжден золотой медалью Королевского общества и произведен в рыцари Ганноверского гвельфийского ордена. Выводы. Выражение великого русского хирурга Н.И. Пирогова «Все, что есть высокого на свете, - искусство, вдохновение и наука…» как нельзя более подходит для характеристики его современника Чарльза Белла, соединившего в себе эти три ипостаси. Важно отметить, что рефлекторная теория, основателем которой считают Чарльза Белла, является основополагающей концепцией физиологии и медицины.

Актуальность. Исследования развития плоскоклеточного рака слизистой оболочки полости рта имеют первостепенное значение из-за широкого распространения заболевания и агрессивного течения. При гистологическом изучении развития плоскоклеточного рака слизистой оболочки полости рта не всегда возможно определить первые признаки малигнизации. Плоскоклеточный рак может развиваться из эпителиальной гиперплазии и эпителиальной дисплазии разной степени выраженности. Помимо гистологических методов исследования для опухолевых заболеваний широко используют имуногистохимический метод, при котором используют белок Ki-67, с помощью которого можно определить пролиферацию клеток эпителия, также белок Р53 кодирующий ген TP53, который является супрессором опухолевого роста. Он активируется только при наличии повреждения генома клетки. Цель - оценить экспрессию белков Ki-67 и P53 при развитии дисплазии и плоскоклеточного рака слизистой оболочки полости рта. Материал и методы. Для исследования были выделены четыре группы: 1-я группа - 16 пациентов (34,7 %) с диагнозом «эпителиальная гиперплазия», 2-я группа 8 пациентов (17,3 %) с диагнозом «эпителиальная дисплазия низкой степени», 3-я группа - 9 (19,5 %) с диагнозом «эпителиальная дисплазия высокой степени», 4-я группа - 13 (28,2 %) с диагнозом «плоскоклеточный рак». Для определения пролиферации клеток использовали мышиные моноклональные антитела к Ki-67 (клон ММ1, Diagnostic Biosystems, США). Экспрессию P53 определяли при помощи мышиных моноклональных антител к белку P53 (Clone D07, Novocastra, Великобритания). Для исследования только «мутантного типа» белка P53 использовали моноклональные кроличьи антитела P53 (Clone Y5 Epitomics, США). Результаты и обсуждения. Экспрессия белков Ki-67 и P53 отмечалась во всех группах. Однако минимальное количество иммунопозитивных клеток при исследовании P53 (Clone D07) и P53 (Clone Y5) наблюдалось в группе эпителиальная гиперплазия, а максимальное в группе плоскоклеточный рак. Увеличение количества окрашенных клеток достоверно увеличивалось по мере возрастания степени дисплазии эпителия от эпителиальной гиперплазии и эпителиальной гиперплазии низкой степени тяжести к эпителиальной гиперплазии высокой степени тяжести и плоскоклеточному раку. Выводы. Таким образом, выявление экспрессии белка Р53 (Clone Y5) в эпителии указывает на наличие изменения генетического аппарата и метаболизма клеток, что можно использовать при ранней диагностике плоскоклеточного рака слизистой оболочки полости рта.