Мыши В6.А-Dysfprmd/GeneJ как генетическая модель дисферлинопатии

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель. Поведенческое и патоморфологическое фенотипирование мышей, нокаутных по гену DYSF, играющему важнейшую роль в развитии и прогрессировании дисферлинопатии.

Материалы и методы. В работе использована сублиния мышей B6.A-Dysfprmd/GeneJ (Bla/J). В ходе исследования определяли мышечную активность при помощи следующих тестов: «Перевернутая сетка», «Сила хватки», «Удержание на проволоке», «Вынужденное плавание с грузом», «Удержание животного на скользком вертикальном стержне». Выполнено гистологическое и иммунофлюоресцентное исследование скелетной мускулатуры (m. gastrocnemius, m. tibialis). Оценено наличие и распределение белка дисферлина, описаны общие гистологические изменения скелетной мышцы, характерные для мышей в возрасте 12 и 24 недель. Также выполнен морфометрический анализ с определением следующих параметров: доля некротизированных мышечных волокон; доля волокон с центрально расположенными ядрами; средний диаметр мышечного волокна.

Результаты. Тест «Сила хватки» и «Принудительное плавание с грузом» выявили снижение силы передних конечностей и выносливости у исследуемых мышей сублинии Bla/J по сравнению с контрольной линией. Сохранность физической работоспособности проверена при помощи тестов «Проволочный тест» и «Удержание животного на скользком вертикальном стержне», которые показали статистически значимое различие между исследуемыми мышами и контролем. Координация движений и мышечная сила конечностей, исследованных в тесте «Перевёрнутая сетка», в данных возрастных метках не изменена. Уменьшение силы хватки передних конечностей, снижение физической выносливости с возрастом отражает прогрессирование основного мышечного заболевания. Гистологическими методами в скелетной мускулатуре выявлены признаки миопатического паттерна повреждения: некротизированные мышечные волокна, умеренная лимфо-макрофагальная инфильтрация, увеличение по сравнению с контролем доли волокон с центрально расположенными ядрами, среднего диаметра волокна. Белок дисферлин в тканях мышц не обнаружен.

Заключение. С учетом результатов проведенных тестов показано, что отсутствие экспрессии гена Dysf-/- у мышей сублинии Bla/J приводило к мышечной дистрофии с началом развития фенотипических проявлений болезни в 12 недель жизни и их пиком к 24 неделе. Патогистологические фенотипические проявления болезни в целом неспецифичны и соответствовали данным прижизненного патологоанатомического исследования у пациентов с диферлинопатией. Мыши исследуемой сублинии Bla/J являются репрезентативной моделью дисферлинопатии и могут быть использованы для оценки новых терапевтических средств для лечения данного заболевания.

Об авторах

Михаил Викторович Корокин

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Автор, ответственный за переписку.
Email: korokin@bsu.edu.ru
ORCID iD: 0000-0001-5402-0697

доктор медицинских наук, доцент кафедры фармакологии и клинической фармакологии

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85

Елена Валерьевна Кузубова

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Email: 1015artek1015@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-2425-5027

младший научный сотрудник лаборатории генетических технологий и генного редактирования для биомедицины и ветеринарии

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85

Александра Игоревна Радченко

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Email: sandrinkaradchenko@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-4554-2116

младший научный сотрудник лаборатории генетических технологий и генного редактирования для биомедицины и ветеринарии

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85

Роман Вадимович Деев

ФГБОУ ВО «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И. Мечникова» Министерства здравоохранения Российской Федерации; Публичное акционерное общество «Институт стволовых клеток человека»

Email: romdey@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-8389-3841

кандидат медицинских наук, доцент, и.о. заведующего кафедрой патологической анатомии, директор по науке

Россия, 191015, Санкт-Петербург, ул. Кирочная, д. 41; 117292, Москва, пр-т 60-Летия Октября, д. 10а

Иван Антонович Яковлев

Общество с ограниченной ответственностью «Генотаргет»

Email: ivan@ivan-ya.ru
ORCID iD: 0000-0001-8127-4078

генеральный директор

Россия, 121205, Москва, Инновационный центр «Сколково», ул. Нобеля, д. 7, пом. 48

Алексей Васильевич Дейкин

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Email: alexei@deikin.ru
ORCID iD: 0000-0001-9960-0863

кандидат биологических наук, доцент кафедры фармакологии и клинической фармакологии

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85

Никита Сергеевич Жунусов

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Email: nzhunu@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-1969-3615

ассистент кафедры фармакологии и клинической фармакологии

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85

Анастасия Михайловна Краюшкина

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Email: krayushkina_2016@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6830-3820

ассистент кафедры фармакологии и клинической фармакологии

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85

Владимир Михайлович Покровский

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Email: pokrovskiy@bsu.edu.ru
ORCID iD: 0000-0002-1493-3376

ассистент кафедры фармакологии и клинической фармакологии

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85

Олеся Андреевна Пученкова

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Email: lesya759@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-7657-0937

ординатор медицинского института

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85

Кирилл Дмитриевич Чапров

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»; Институт физиологически активных веществ ФГБУН федерального исследовательского центра проблем химической физики и медицинской химии Российской академии наук (ИФАВ РАН)

Email: chapkir@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-0258-1879

младший научный сотрудник Лаборатория моделирования и генной терапии заболеваний человека, младший научный сотрудник

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85; 142432, Черноголовка, Северный проезд, д. 1

Наталья Викторовна Екимова

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

Email: ekimova@bsu.edu.ru
ORCID iD: 0000-0002-3629-048X

ассистент кафедры фармакологии и клинической фармакологии

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85

Сергей Николаевич Бардаков

ФГБВОУ ВО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова» Министерства обороны Российской Федерации

Email: epistaxis@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-3804-6245

врач-невролог, преподаватель кафедры нервных болезней

Россия, 194044, Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, д. 6

Ольга Николаевна Чернова

ФГБОУ ВО «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И. Мечникова» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: olgachernova92@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-6310-9319

ассистент кафедры морфологии человека

Россия, 191015, Санкт-Петербург, ул. Кирочная, д. 41

Алексей Михайлович Емелин

ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»; ФГБОУ ВО «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И. Мечникова» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: eamar40rn@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-4109-0105

ассистент кафедры патологической анатомии, аспирант кафедры патологической анатомии

Россия, 308015, Белгород, ул. Победы, д. 85; 191015, Санкт-Петербург, ул. Кирочная, д. 41

Игорь Сергеевич Лимаев

ФГБОУ ВО «Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И. Мечникова» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: ig.limaev@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-0994-9787

старший лаборант кафедры патологической анатомии

Россия, 191015, Санкт-Петербург, ул. Кирочная, д. 41

Список литературы

  1. Reash N.F., James M.K., Alfano L.N., Mayhew A.G., Jacobs M., Iammarino M.A., Holsten S., Sakamoto C., Tateishi T., Yajima H., Duong T., de Wolf B., Gee R., Bharucha-Goebel D.X., Bravver E., Mori-Yoshimura M., Bushby K., Rufibach L.E., Straub V., Lowes L.P.; Jain COS Consortium. Comparison of strength testing modalities in dysferlinopathy // Muscle Nerve. – 2022. – Vol. 66, No. 2. – P. 159–166. doi: 10.1002/mus.27570
  2. Contreras-Cubas C., Barajas-Olmos F., Frayre-Martínez M.I., Siordia-Reyes G., Guízar-Sánchez C.C., García-Ortiz H., Orozco L., Baca V. Dysferlinopathy misdiagnosed with juvenile polymyositis in the pre-symptomatic stage of hyperCKemia: a case report and literature review // BMC Med. Genomics. – 2022. – Vol. 15, No. 1. – Art. No. 139. doi: 10.1186/s12920-022-01284-y
  3. Bardakov S.N., Tsargush V.A., Carlier P.G., Nikitin S.S., Kurbatov S.A., Titova A.A., Umakhanova Z.R., Akhmedova P.G., Magomedova R.M., Zheleznyak I.S., Emelyantsev A.A., Berezhnaya E.N., Yakovlev I., Isaev A.A., Deev R.V. Magnetic resonance imaging pattern variability in dysferlinopathy // Acta Myol. – 2021. – Vol. 40, No. 4. – P. 158–171. doi: 10.36185/2532-1900-059
  4. Seo K., Kim E.K., Choi J., Kim D.S., Shin J.H. Functional recovery of a novel knockin mouse model of dysferlinopathy by readthrough of nonsense mutation // Mol. Ther. Methods Clin. Dev. – 2021. – Vol. 1, No. 21. – P. 702–709. doi: 10.1016/j.omtm.2021.04.015
  5. Kokubu Y., Nagino T., Sasa K., Oikawa T., Miyake K., Kume A., Fukuda M., Fuse H., Tozawa R., Sakurai H. Phenotypic Drug Screening for Dysferlinopathy Using Patient-Derived Induced Pluripotent Stem Cells // Stem Cells Transl. Med. – 2019. – Vol. 8, No. 10. – P. 1017–1029. doi: 10.1002/sctm.18-0280
  6. Корокин М.В., Солдатов В.О., Гудырев О.С., Коклин И.С., Таран Э.И., Мишенин М.О., Корокина Л.В., Кочкаров А.А., Покровский М.В., Вараксин М.В., Чупахин О.Н. Роль метаболизма кортизола в реализации патогенетических звеньев развития остеопороза – обоснование поиска новых фармакотерапевтических мишеней (обзор) // Научные результаты биомедицинских исследований. – 2022. – Т. 8, № 4. – С. 457–473. doi: 10.18413/2658-6533-2022-8-4-0-5
  7. Fanin M., Angelini C. Progress and challenges in diagnosis of dysferlinopathy // Muscle Nerve. – 2016. – Vol. 54, No. 5. – P. 821–835. doi: 10.1002/mus.25367
  8. Кузубова Е.В., Радченко А.И., Покровский В.М., Патраханов Е.А., Новикова А.А., Степенко Ю.В., Дейкин А.В. Патологические состояния, ассоциированные с белком тау: механизмы развития и возможные биологические мишени для фармакологической коррекции тау-протеинопатии (обзор) // Научные результаты биомедицинских исследований. – 2022. – Т. 8, № 4. – С. 474–797. doi: 10.18413/2658-6533-2022-8-4-0-6
  9. Moore U., Jacobs M., James M.K., Mayhew A.G., Fernandez-Torron R., Feng J., Cnaan A., Eagle M., Bettinson K., Rufibach L.E., Lofra R.M., Blamire A.M., Carlier P.G., Mittal P., Lowes L.P., Alfano L., Rose K., Duong T., Berry K.M., Montiel-Morillo E., Pedrosa-Hernández I., Holsten S., Sanjak M., Ashida A., Sakamoto C., Tateishi T., Yajima H., Canal A., Ollivier G., Decostre V., Mendez J.B., Sánchez-Aguilera Praxedes N., Thiele S., Siener C., Shierbecker J., Florence J.M., Vandevelde B., DeWolf B., Hutchence M., Gee R., Prügel J., Maron E., Hilsden H., Lochmüller H., Grieben U., Spuler S., Tesi Rocha C., Day J.W., Jones K.J., Bharucha-Goebel D.X., Salort-Campana E., Harms M., Pestronk A., Krause S., Schreiber-Katz O., Walter M.C., Paradas C., Hogrel J.Y., Stojkovic T., Takeda S., Mori-Yoshimura M., Bravver E., Sparks S., Díaz-Manera J., Bello L., Semplicini C., Pegoraro E., Mendell J.R., Bushby K., Straub V; Jain COS Consortium. Assessment of disease progression in dysferlinopathy: A 1-year cohort study // Neurology. – 2019. – Vol. 92, No. 5. – P. 461–474. doi: 10.1212/WNL.0000000000006858
  10. Harris E., Bladen C.L., Mayhew A., James M., Bettinson K., Moore U., Smith F.E., Rufibach L., Cnaan A., Bharucha-Goebel D.X., Blamire A.M., Bravver E., Carlier P.G., Day J.W., Díaz-Manera J., Eagle M., Grieben U., Harms M., Jones K.J., Lochmüller H., Mendell J.R., Mori-Yoshimura M., Paradas C., Pegoraro E., Pestronk A., Salort-Campana E., Schreiber-Katz O., Semplicini C., Spuler S., Stojkovic T., Straub V., Takeda S., Rocha C.T., Walter M.C., Bushby K.; Jain COS Consortium. The Clinical Outcome Study for dysferlinopathy: An international multicenter study // Neurol. Genet. – 2016. – Vol. 2, No. 4. – Art. ID: e89. doi: 10.1212/NXG.0000000000000089
  11. Jacobs M.B., James M.K., Lowes L.P., Alfano L.N., Eagle M., Muni L.R., Moore U., Feng J., Rufibach L.E., Rose K., Duong T., Bello L., Pedrosa-Hernández I., Holsten S., Sakamoto C., Canal A., Sanchez-Aguilera Práxedes N., Thiele S., Siener C., Vandevelde B., DeWolf B., Maron E., Guglieri M., Hogrel J.Y., Blamire A.M., Carlier P.G., Spuler S., Day J.W., Jones K.J., Bharucha-Goebel D.X., Salort-Campana E., Pestronk A., Walter M.C., Paradas C., Stojkovic T., Mori-Yoshimura M., Bravver E., Díaz-Manera J., Pegoraro E., Mendell J.R.; Jain COS Consortium, Mayhew A.G., Straub V. Assessing Dysferlinopathy Patients Over Three Years With a New Motor Scale // Ann. Neurol. – 2021. – Vol. 6, No. 1. – P. 967–978. doi: 10.1002/ana.26044
  12. Mercuri E., Muntoni F. Muscular dystrophies // Lancet. – 2013. – Vol. 9, No. 381. – Р. 845–860. doi: 10.1016/S0140-6736(12)61897-2
  13. Crudele J.M., Chamberlain J.S. AAV-based gene therapies for the muscular dystrophies // Hum. Mol. Genet. – 2019. – Vol. 28, No. 1. – Р. 102–107. doi: 10.1093/hmg/ddz128
  14. Niewiadomski W., Palasz E., Skupinska M., Zylinski M., Steczkowska M., Gasiorowska A., Niewiadomska G., Riedel G. TracMouse: A computer aided movement analysis script for the mouse inverted horizontal grid test // Sci. Rep. – 2016. – Vol. 16, No. 6. – Art. ID: 39331. doi: 10.1038/srep39331
  15. Лысикова Е.А., Чапров К.Д. Нокаут генов α-, β-, и γ-синуклеинов у мышей приводит к изменению содержания ряда липидов в печени и плазме крови // Научные результаты биомедицинских исследований. – 2022. – Т. 8, № 4. – С. 448–456. doi: 10.18413/2658-6533-2022-8-4-0-4
  16. Чапров К.Д., Тетерина Е.В., Роман А.Ю., Иванова Т.А., Голоборщева В.В., Кучеряну В.Г., Морозов С.Г., Лысикова Е.А., Лыткина О.А., Королева И.В., Попова Н.Я., Антохин А.И., Овчинников Р.К., Кухарский М.С. Сравнительный анализ нейротоксического эффекта МФТП на двух линиях мышей с конститутивным нокаутом гена альфа-синуклеина // Молекулярная биология. – 2021. Т. 55. – №1. – С. 152–163. doi: 10.31857/S0026898421010031
  17. Spurney C.F., Gordish-Dressman H., Guerron A.D., Sali A., Pandey G.S., Rawat R., Van Der Meulen J.H., Cha H.J., Pistilli E.E., Partridge T.A., Hoffman E.P., Nagaraju K. Preclinical drug trials in the mdx mouse: assessment of reliable and sensitive outcome measures // Muscle Nerve. – 2009. – Vol. 39, No. 5. – Р. 591–602. doi: 10.1002/mus.21211
  18. Reeves S.L., Fleming K.E., Zhang L., Scimemi A. M-Track: A New Software for Automated Detection of Grooming Trajectories in Mice // PLoS Comput. Biol. – 2016. – Vol. 12, No. 9. – Art. ID: No. e1005115. doi: 10.1371/journal.pcbi.1005115
  19. Nagaraju K., Raben N., Loeffler L., Parker T., Rochon P.J., Lee E., Danning C., Wada R., Thompson C., Bahtiyar G., Craft J., Hooft Van Huijsduijnen, R., Plotz P. Conditional up-regulation of MHC class I in skeletal muscle leads to self-sustaining autoimmune myositis and myositis- specific autoantibodies // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 2000. – Vol. 97, No. 16. – Р. 9209–9214. doi: 10.1073/pnas.97.16.9209
  20. García-Campos P., Báez-Matus X., Jara-Gutiérrez C., Paz-Araos M., Astorga C., Cea L.A., Rodríguez V., Bevilacqua J.A., Caviedes P., Cárdenas A.M. N-Acetylcysteine Reduces Skeletal Muscles Oxidative Stress and Improves Grip Strength in Dysferlin-Deficient Bla/J Mice. Int. J. Mol. Sci. – 2020. – Vol. 21, No. 12. – Art. No. 4293. doi: 10.3390/ijms21124293
  21. Veniaminova E., Oplatchikova M., Bettendorff L., Kotenkova E., Lysko A., Vasilevskaya E., Kalueff A.V., Fedulova L., Umriukhin A., Lesch K.P., Anthony D.C., Strekalova T. Prefrontal cortex inflammation and liver pathologies accompany cognitive and motor deficits following Western diet consumption in non-obese female mice // Life Sci. – 2020. – Vol. 241. – Art. No. 117163. doi: 10.1016/j.lfs.2019.117163
  22. Спасов А.А., Жуковская О.Н., Мальцев Д.В., Мирошников М.В., Скрипка М.О., Султанова К.Т., Морковник А.С. Анксиолитическая активность производных 11 Н-2,3,4,5-тетрагидро[1,3]диазепино[1,2-a]бензимидазола и 2-меркаптобен- зимидазола // Биоорганическая химия. – 2021. – Т. 46, № 1. – P. 92–100. doi: 10.31857/S0132342320010145
  23. Полякова Л.В., Жукова Е.С., Иркаева А.М., Чугунова В.В., Щербатюк Т.Г., Позднякова М.А., Умнягина И.А. Концепция применения теста «вынужденное плавание с грузом» для экспериментального моделирования трудового процесса на лабораторных животных. Тезисы Девятой конференции специалистов по лабораторным животным Rus-LASA // Лабораторные животные для научных исследований. – 2021. – №4. doi: 10.29296/2618723X-RusLASA2021-06
  24. Зайцева М.С., Иванов Д.Г., Александровская Н.В. Работоспособность крыс в тесте «Вынужденное плавание с грузом» и причины её вариабельности // Биомедицина. – 2015. – No. 4. – P. 30–42.
  25. Шустов Е.Б., Новиков В.С., Берзин И.А., Ким А.Е., Болотова В.Ц. Функциональное спортивное питание для единоборцев: разработка и критерии эффективности // Биомедицина. – 2017. – №1. – С. 10–23.
  26. Chernova O.N., Chekmareva I.A., Mavlikeev M.O., Yakovlev I.A., Kiyasov A.P., Deev R.V. Structural and ultrastructural changes in the skeletal muscles of dysferlin-deficient mice during postnatal ontogenesis // Ultrastruct. Pathol. – 2022. – Vol. 46, No. 4. – P. 359–367. doi: 10.1080/01913123.2022.2105464
  27. Chernova O.N., Mavlikeev M.O., Kiyasov A.P., Bozo I.Y., Deev R.V. Reactive Changes in Elements of Stromal-Vascular Differons of Dysferlin-Deficient Skeletal Muscles after Procaine Injection // Bull. Exp. Biol. Med. – 2021. – Vol. 170, No. 5. – P. 677–681. doi: 10.1007/s10517-021-05131-5
  28. Chakravorty S., Nallamilli B.R.R., Khadilkar S.V., Singla M.B., Bhutada A., Dastur R., Gaitonde P.S., Rufibach L.E., Gloster L., Hegde M. Clinical and Genomic Evaluation of 207 Genetic Myopathies in the Indian Subcontinent // Front. Neurol. – 2020. – No. 11. – Art. No. 559327. doi: 10.3389/fneur.2020.559327
  29. Хухарева Д.Д., Гусева К.Д., Суханова Ю.А., Себенцова Е.А., Левицкая Н.Г. Физиологические эффекты острой неонатальной нормобарической гипоксии у мышей линии C57BL/6 // Журнал высшей нервной деятельности им. И.П. Павлова. – 2020. – Т. 70, № 4. – С. 515–527. doi: 10.31857/S0044467720040048
  30. Ho M., Post C.M., Donahue L.R., Lidov H.G., Bronson R.T., Goolsby H., Watkins S.C., Cox G.A., Brown R.H. Disruption of muscle membrane and phenotype divergence in two novel mouse models of dysferlin deficiency // Hum. Mol. Gen. – 2004. – Vol. 13, No. 18. – P. 1999–2010. doi: 10.1093/hmg/ddh212
  31. Hornsey M.A., Laval S.H., Barresi R., Lochmüller H., Bushby K. Muscular dystrophy in dysferlin-deficient mouse models // Neuromuscul. Disord. – 2013. – Vol. 23, No. 5. – P. 377–387. doi: 10.1016/j.nmd.2013.02.004
  32. Grounds M.D., Terrill J.R., Radley-Crabb H.G., Robertson T., Papadimitriou J., Spuler S., Shavlakadze T. Lipid accumulation in dysferlin-deficient muscles // Am. J. Pathol. – 2014. – Vol. 184, No. 6. – P. 1668–1676. doi: 10.1016/j.ajpath.2014.02.005
  33. Lloyd E.M., Xu H., Murphy R.M., Grounds M.D., Pinniger G.J. Dysferlin-deficiency has greater impact on function of slow muscles, compared with fast, in aged BLAJ mice // PLoS One. – 2019. – Vol. 14, No. 4. – Art. ID: No. e0214908. doi: 10.1371/journal.pone.0214908

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рисунок 1 – Схема положения праймеров для амплификации геномного участка (дикий тип) и участка 3’ LTR ретротранспозона (мутант). Примечание: ДТ – дикий тип; DYSF-F – общий прямой праймер; DYSF-R – общий обратный праймер; ETn-OR – прямой праймер, гомологичный участку 3’ LTR ретротранспозона; 5’LTR – 5’-длинные концевые повторы; 3’LTR – 3’ – длинные концевые повторы.

Скачать (229KB)
Метаданные
3. Рисунок 2 – Детектирование наличия ретротранспозона у Bla/J мышей методом ПЦР. Примечание: размер продукта WT (дикий тип) 204 п.о.; размер продукта Bla/J 237 п.о.; NTC – отрицательный контроль без матрицы.

Скачать (151KB)
Метаданные
4. Рисунок 3 – Физиологические параметры мышей линии Bla/J. Примечание: анализ оценки силы хватки передних конечностей в тесте «Сила хватки» (A и B), выносливость в тесте «Принудительное плавание с грузом» ( С и D), физическую работоспособность в тестах «Проволочный тест» (E и F) и «Удержание животного на скользком вертикальном стержне» (G и H), координации движений и мышечной силы конечностей в тесте «Перевёрнутая сетка» (K и L). Экспериментальные Bla/J и контрольные мыши без модификации генома (WT) были протестированы в возрасте 12 (A, C, E, G, K) и 24 недель (B, D, F, H, L). Представлены медианы и стандартная ошибка среднего, количество животных указано в нижней части соответствующего столбца. Выборки проверены на нормальность, а статистическая достоверность оценивалась с помощью U-критерия Манна-Уитни (** p <0,01; ***p <0,0004, ****p <0,0001).

Скачать (161KB)
Метаданные
5. Рисунок 4 – Иммунофлюоресцентная реакция с антителами к дисферлину. Примечание: А – мышь C57Bl; Б – мышь линии Bla/J. Красный цвет – детектируемый дисферлин саркоплазматической локализации, синий цвет – ядра. Докраска: DAPI. Ув. ×200

Скачать (88KB)
Метаданные
6. Рисунок 5 – Поперечно-полосатая скелетная мышечная ткань изученных животных. Примечание: А – контроль, C57Bl; Б–Г – Bla/J. 1 – эндомизиальный и перимизиальный отек; 2 – волокна с центрально расположенными ядрами; 3 – лимфо-макрофагальная инфильтрация вокруг некротизированных мышечных волокон; 4 – некротизированные мышечные волокна, в т.ч. с макрофагальной инвазией; 5 – округлые мышечные волокна. Окраска: эозин. Ув.: А–В ×200, Г ×400

Скачать (320KB)
Метаданные
7. Рисунок 6 – Морфометрические параметры поперечно-полосатой скелетной мышечной ткани мышей линии Bla/J на сроках 12 и 24 недель жизни. Примечание: А – доля некротизированных мышечных волокон; Б – Средняя площадь поперечного сечения мышечного волокна; В – доля центральноядерных мышечных волокон (ЦЯМВ); Г – доля соединительной ткани в скелетной мышце (*p < 0,05)

Скачать (145KB)
Метаданные

© Корокин М.В., Кузубова Е.В., Радченко А.И., Деев Р.В., Яковлев И.А., Дейкин А.В., Жунусов Н.С., Краюшкина А.М., Покровский В.М., Пученкова О.А., Чапров К.Д., Екимова Н.В., Бардаков С.Н., Чернова О.Н., Емелин А.М., Лимаев И.С., 2023

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
 

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах