Ионы меди снижают токсическое действие азида натрия и липополисахарида на культивированные зернистые нейроны мозжечка

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Ионы меди (Cu2+) являются структурными элементами белков, в том числе цитохром с-оксидазы (комплекс IV) — фермента, катализирующего конечный этап переноса электронов на кислород в процессе окислительного фосфорилирования в митохондриях. Поддержание гомеостаза Cu2+ в головном мозге очень важно, и его нарушение в центральной нервной системе вовлечено в патогенез многих нейродегенеративных заболеваний и патологических состояний головного мозга.

Цель исследования — определить влияние нетоксических концентраций ионов меди на гибель культивированных зернистых нейронов мозжечка, вызванную липополисахаридом (ЛПС; модель воспаления in vitro) и азидом натрия (NaN3, ингибитор цитохром с-оксидазы).

Материалы и методы. ЛПС (10 мкг/мл) или NaN3 (250 мкМ) добавляли на 7–8-й день in vitro в среду культивирования клеток мозжечка крыс на 24 ч. Уровень нитритов измеряли в среде культивирования методом Грисса, оптическую плотность регистрировали при длине волны 540 нм с помощью спектрофотометра, а число живых нейронов оценивали методом подсчёта морфологически интактных клеток.

Результаты. Добавление в среду культивирования ЛПС снижало выживаемость нейронов до 15 ± 2% относительно контроля, а NaN3 — до 20 ± 3%. В присутствии Cu2+ (0,5–5,0 мкМ) выживаемость нейронов дозозависимо повышалась: на фоне 5 мкМ Cu2+ при токсическом воздействии ЛПС — до 78 ± 4%, а при действии NaN3 — до 86 ± 6%. В среде культивирования контрольных культур содержание нитритов составляло 2,0 ± 0,2 мкМ. Добавление ЛПС вызывало повышение уровня нитритов до 8,5 ± 0,5 мкМ. Ионы меди не оказывали достоверного влияния на накопление нитритов в среде культивирования.

Заключение. Показана возможность защитного действия ионов меди на нейроны при токсичности, вызванной ЛПС и NaN3. Видимо, эта защита обусловлена взаимодействием Cu2+ с комплексом IV цепи переноса электронов в митохондриях, а не подавлением продукции оксида азота, не исключено также влияние Cu2+ на белки путей апоптоза.

Об авторах

Елена Викторовна Стельмашук

ФГБНУ «Научный центр неврологии»

Автор, ответственный за переписку.
Email: estelmash@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-2533-7673

д.б.н., в.н.с. лаб. нейробиологии и тканевой инженерии Института мозга 

Россия, Москва

Ольга Петровна Александрова

ФГБНУ «Научный центр неврологии»

Email: molka-molka@yandex.ru
ORCID iD: 0009-0006-9109-1463

к.б.н., н.с. лаб. нейробиологии и тканевой инженерии Института мозга 

Россия, Москва

Елизавета Евгеньевна  Генрихс

ФГБНУ «Научный центр неврологии»

Email: genrikhs@neurilogy.ru
ORCID iD: 0000-0002-3203-0250

к.б.н., с.н.с. лаб. нейробиологии и тканевой инженерии Института мозга 

Россия, Москва

Ешвандра Верма

Университет Чаудхари Чаран Сингх

Email: yeshvandra@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-5994-7501

магистр филологии, доктор философии, первый старший доцент кафедры токсикологии 

Индия, Мирут

Алла Борисовна Салмина

ФГБНУ «Научный центр неврологии»

Email: allasalmina@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-4012-6348

д.м.н., г.н.с., руководитель лаб. нейробиологии и тканевой инженерии и отдела молекулярных и клеточных механизмов нейропластичности Института мозга 

Россия, Москва

Николай Константинович Исаев

ФГБНУ «Научный центр неврологии»; ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»

Email: nisaev61@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-8427-1163

д.б.н., в.н.с. лаб. нейробиологии и тканевой инженерии Института мозга ФГБНУ «Научный центр неврологии»; доцент каф. клеточной биологии и гистологии биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова

Россия, Москва; Москва

Список литературы

  1. Gromadzka G., Tarnacka B., Flaga A., Adamczyk A. Copper dyshomeostasis in neurodegenerative diseases-therapeutic implications. Int. J. Mol. Sci. 2020;21(23):9259. doi: 10.3390/ijms21239259
  2. An Y., Li S., Huang X. et al. The role of Copper homeostasis in brain disease. Int J. Mol. Sci. 2022;23(22):13850. doi: 10.3390/ijms232213850
  3. Bost M., Houdart S., Oberli M. et al. Dietary copper and human health: current evidence and unresolved issues. J. Trace Elem. Med. Biol. 2016;35:107–115. doi: 10.1016/j.jtemb.2016.02.006
  4. Сальков В.Н., Худоерков Р.М., Сухоруков В.С. Патогенетические аспекты повреждений головного мозга при болезни Вильсона–Коновалова. Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2020;65(6):22–28. Salkov V.N., Khudoerkov R.M., Sukhorukov V.S. Pathogenetic aspects of brain lesions in Wilson–Konovalov disease. Russian Bulletin of Perinatology and Pediatrics. 2020;65(6):22–28 (in Russ.) doi: 10.21508/1027-4065-2020-65-6-22-28
  5. Isaev N.K., Stelmashook E.V., Genrikhs E.E. Role of zinc and copper ions in the pathogenetic mechanisms of traumatic brain injury and Alzheimer's disease. Rev. Neurosci. 2020;31(3):233–243. doi: 10.1515/revneuro-2019-0052
  6. Гулевская Т.С., Чайковская Р.П., Ануфриев П.Л. Патоморфология головного мозга при гепатолентикулярной дегенерации (болезни Вильсона–Коновалова). Анналы клинической и экспериментальной неврологии. 2020;14(2):50–61. Gulevskaya T.S., Chaykovskaya R.P., Anufriev P.L. Cerebral pathology in hepatolenticular degeneration (Wilson disease). Annals of Clinical and Experimental Neurology. 2020;14(2):50–61. (in Russ) doi: 10.25692/ACEN.2020.2.7
  7. Fujimoto Y., Maruta S., Yoshida A., Fujita T. Effect of transition metal ions on lipid peroxidation of rabbit renal cortical mitochondria. Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 1984;44(3):495–498.
  8. Jimenez Del Rio M., Velez-Pardo C. Transition metal-induced apoptosis in lymphocytes via hydroxyl radical generation, mitochondria dysfunction, and caspase-3 activation: an in vitro model for neurodegeneration. Arch. Med. Res. 2004;35(3):185–193. doi: 10.1016/j.arcmed.2004.01.001
  9. Su X.Y., Wu W.H., Huang Z.P. et al. Hydrogen peroxide can be generated by tau in the presence of Cu(II). Biochem. Biophys. Res. Commun. 2007;358(2):661–665. doi: 10.1016/j.bbrc.2007.04.191
  10. Stelmashook E.V., Genrikhs E.E., Kapkaeva M.R. et al. N-acetyl-l-cysteine in the presence of Cu2+ induces oxidative stress and death of granule neurons in dissociated cultures of rat cerebellum. Biochemistry (Mosc.). 2017;82(10):1176–1182. doi: 10.1134/S0006297917100108
  11. Stelmashook E.V., Isaev N.K., Genrikhs E.E., et al. Role of zinc and copper ions in the pathogenetic mechanisms of Alzheimer's and Parkinson's diseases. Biochemistry (Mosc.). 2014;79(5):391–396. doi: 10.1134/S0006297914050022
  12. Agarwal P., Ayton S., Agrawal S. et al. Brain copper may protect from cognitive decline and Alzheimer's disease pathology: a community-based study. Mol. Psychiatry. 2022;27(10):4307–4313. doi: 10.1038/s41380-022-01802-5
  13. Whitehouse M.W., Walker W.R. Copper and inflammation. Agents Actions. 1978;8(1-2):85–90. doi: 10.1007/BF01972407
  14. Berthon G. Is copper pro- or anti-inflammatory? A reconciling view and a novel approach for the use of copper in the control of inflammation. Agents Actions. 1993;39(3–4):210–217. doi: 10.1007/BF01998975
  15. Caetano-Silva M.E., Rund L.A., Vailati-Riboni M. et al. Copper-binding peptides attenuate microglia inflammation through suppression of NF-kB pathway. Mol. Nutr. Food Res. 2021;65(22):e2100153. doi: 10.1002/mnfr.202100153
  16. Bal-Price A., Brown G.C. Inflammatory neurodegeneration mediated by nitric oxide from activated glia-inhibiting neuronal respiration, causing glutamate release and excitotoxicity. J. Neurosci. 2001;21(17):6480–6491. doi: 10.1523/JNEUROSCI.21-17-06480.2001
  17. Ghasemi M., Mayasi Y., Hannoun A. et al. Nitric oxide and mitochondrial function in neurological diseases. Neuroscience. 2018;376:48–71. doi: 10.1016/j.neuroscience.2018.02.017
  18. Singh S., Zhuo M., Gorgun F.M., Englander E.W. Overexpressed neuroglobin raises threshold for nitric oxide-induced impairment of mitochondrial respiratory activities and stress signaling in primary cortical neurons. Nitric Oxide. 2013;32:21–28. doi: 10.1016/j.niox.2013.03.008
  19. Brunori M., Giuffrè A., Forte E. et al. Control of cytochrome c oxidase activity by nitric oxide. Biochim. Biophys. Acta. 2004;1655(1–3):365–371. doi: 10.1016/j.bbabio.2003.06.008
  20. Mason M.G., Nicholls P., Wilson M.T., Cooper C.E. Nitric oxide inhibition of respiration involves both competitive (heme) and noncompetitive (copper) binding to cytochrome c oxidase. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2006;103(3):708–713. doi: 10.1073/pnas.0506562103
  21. Torres J., Wilson M.T. The reactions of copper proteins with nitric oxide. Biochim. Biophys. Acta. 1999;1411(2–3):310–322. doi: 10.1016/s0005-2728(99)00022-5
  22. Larsen F.J., Schiffer T.A., Weitzberg E., Lundberg J.O. Regulation of mitochondrial function and energetics by reactive nitrogen oxides. Free Radic. Biol. Med. 2012;53(10):1919–1928. doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2012.08.580
  23. Tsvetkov P., Coy S., Petrova B. et al. Copper induces cell death by targeting lipoylated TCA cycle proteins. Science. 2022;375(6586):1254–1261. doi: 10.1126/science.abf0529
  24. Rubio-Osornio M., Orozco-Ibarra M., Díaz-Ruiz A. et al. Copper sulfate pretreatment prevents mitochondrial electron transport chain damage and apoptosis against MPP+-induced neurotoxicity. Chem. Biol. Interact. 2017;271:1–8. doi: 10.1016/j.cbi.2017.04.016
  25. Islas-Cortez M., Rios C., Rubio-Osornio M. et al. Characterization of the antiapoptotic effect of copper sulfate on striatal and midbrain damage induced by MPP+ in rats. Neurotoxicology. 2021;82:18–25. doi: 10.1016/j.neuro.2020.10.011
  26. Alcaraz-Zubeldia M., Boll-Woehrlen M.C., Montes-López S. et al. Copper sulfate prevents tyrosine hydroxylase reduced activity and motor deficits in a Parkinson's disease model in mice. Rev. Invest. Clin. 2009;61(5):405–411.
  27. Varhaug K.N., Kråkenes T., Alme M.N. et al. Mitochondrial complex IV is lost in neurons in the cuprizone mouse model. Mitochondrion. 2020;50:58–62. doi: 10.1016/j.mito.2019.09.003
  28. Shiri E., Pasbakhsh P., Borhani-Haghighi M. et al. Mesenchymal stem cells ameliorate cuprizone-induced demyelination by targeting oxidative stress and mitochondrial dysfunction. Cell. Mol. Neurobiol. 2021;41(7):1467–1481. doi: 10.1007/s10571-020-00910-6

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Влияние различных концентраций ионов меди на выживаемость культивированных зернистых нейронов мозжечка крыс.

Скачать (14KB)
3. Рис. 2. Ионы меди снижают токсическое действие ЛПС на культивированные зернистые нейроны мозжечка крыс.

Скачать (40KB)
4. Рис. 3. Ионы меди снижают токсическое действие NaN3 (чёрные столбики) на культивированные зернистые нейроны мозжечка крыс.

Скачать (36KB)
5. Рис. 4. Количество нитритов (NO) в среде культивирования зернистых нейронов мозжечка крыс.

Скачать (16KB)

© Стельмашук Е.В., Александрова О.П., Генрихс Е.Е., Верма Е., Салмина А.Б., Исаев Н.К., 2023

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».