Possibilities of histological examination in studying the adequacy of corneal saturation with riboflavin solution during partial deepithelization

Cover Page

Cite item

Full Text

Abstract

A comparative analysis of corneal saturation with riboflavin solution during standard, modified and transepithelial techniques of corneal collagen crosslinking on 15 porcine cadaveric eyes using the histologic method of investigation was carried out. The results of the study confirmed the need for corneal de-epithelialization to ensure sufficient saturation of the cornea with riboflavin solution. Partial de-epithelization in the area of keratoconus is admissible at carrying out ultraviolet crosslinking of corneal collagen (UV-CXL), because, according to the results of the histological method of research, there is a spreading of riboflavin solution into the corneal stroma under the intact epithelium.

Full Text

Кератоконус является прогрессирующим, невоспалительным, двусторонним (но обычно асимметричным) заболеванием роговицы, которое характеризуется истончением, ослаблением и эктазией ее парааксиальных зон, что приводит к искажению роговичной поверхности [1].

Для лечения начальных стадий кератоконуса применяется ультрафиолетовый кросслинкинг роговичного коллагена (Уф-КРК), разработанный в конце 1990-х гг. группой авторов из Дрезденского университета, обеспечивающий образование новых ковалентных связей между волокнами коллагена роговицы при фотополимеризации ее стромальных волокон за счет комбинированного воздействия фотосенсибилизатора – 0,1%-го раствора рибофлавина и ультрафиолетового излучения с длиной волны 365 нм [2]. Кросслинкинг роговичного коллагена выполняется путем полной механической деэпителизации зоны роговицы диаметром 7–9 мм, что обеспечивает глубокое проникновение рибофлавина в строму роговицы [3]. Главный недостаток классической методики Уф-КРК состоит в длительном и сложном периоде реабилитации, обусловленном обширной зоной деэпителизированной роговицы и выраженным болевым синдромом в раннем послеоперационном периоде. По настоящее время исследователями ведется поиск возможных путей усовершенствования классической методики Уф-КРК, чтобы улучшить переносимость операции пациентами, повысить ее эффективность [4, 5. 6, 7, 8, 9]. Основным направлением научного поиска по оптимизации классической методики кросслинкинга на в настоящее время является изучение биомеханических свойств роговицы, а также клиническое подтверждение идеи локального изменения биомеханических свойств роговицы при развитии кератоконуса [10]. Возможность оценить биомеханику роговицы in vivo в центральной оптической зоне появилась с внедрением в клиническую практику пневмотонометров с функцией анализа, возникающей под действием воздушного импульса деформации роговицы [11, 12, 13, 14, 15, 16]. Исследование биомеханики иных зон роговицы осуществимо только с помощью математической модели роговицы, построенной на основе метода конечных элементов [17, 18, 19, 20, 21, 22]. В Клинике Волгоградского филиала разработана персонализированная топографически и томографически ориентированная локальная методика УФ-КРК, заключающаяся в определении на основе математического моделирования распределения интенсивностей напряжений и деформаций в объеме роговицы у пациента с кератоконусом, определении положения и размеров ослабленной области роговицы (рис. 1 а, б).

 

Рис. 1. Компьютерная модель роговицы с кератоконусом: а – распределение коэффициента снижения жесткости роговицы, б – распределение интенсивности деформации роговицы, в – карта пахиметрии пациента

 

Обозначение границ искомой зоны кератоконуса при проведении персонализированной методики УФ-КРК обеспечивается топографически-ориентированной деэпителизацией в режиме частичной фототерапевтической кератэктомии (ФТК) с помощью эксимерного лазера [23]. Насыщение роговицы раствором рибофлавина выполняется как и при стандартной методике кросслинкинга. Воздействие УФ-облучением осуществляют как на участок деэпителизированной роговицы в области кератоконуса, где получают максимальное насыщение фотосенсибилизатором и происходит стандартный ультрафиолетовый кросслинкинг, так и на перифокальную зону недеэпителизированной роговицы, где происходит трансэпителиальный ультрафиолетовый кросслинкинг с более поверхностным эффектом (рис. 2).

 

Рис. 2. Этап УФ-облучения при проведении модифицированной методики кросслинкинга роговичного коллагена

 

Одним из условий, обеспечивающих безопасность и эффективность проведения операции УФ-КРК, является достижение достаточного уровня насыщения роговицы раствором рибофлавина как в толщине роговицы, так и по площади. В ходе экспериментального этапа работы был применен гистологический метод исследования достаточности насыщения роговицы раствором рибофлавина [24], позволяющий оценить морфологические изменения в строме роговицы при проведении стандартной и модифицированной методики ультрафиолетового кросслинкинга роговичного коллагена.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Оценить достаточность насыщения роговицы 0,1%-м раствором рибофлавина «Декстралинк» с помощью гистологического метода исследования при выполнении модифицированной методики кросслинкинга роговичного коллагена в сравнении со стандартной методикой.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проводилось на 15 свиных кадаверных глазах (давность забора – 2 часа). Кадаверные глаза были распределены в 3 группы: 1-я группа (5 глаз) – глаза, подвергшиеся модифицированной методике Уф-КРК, 2-я группа (5 глаз) – глаза, подвергшиеся стандартной методике Уф-КРК, в 3-ю группу вошли 5 интактных глаз, где насыщение 0,1%-м раствором рибофлавина и дальнейшее УФ-облучение проходило без предварительной деэпителизации.

В ходе эксперимента каждый глаз помещали в держатель, для создания необходимого уровня тургора глазного яблока, после чего в 1-й группе проводили эксимерлазерную абляцию зоной диаметром 5,0 мм круглой формы на глубину 20 мкм эпителиального слоя, под контролем интраоперационной on-line пахиметрии (опция эксимерного лазера Schwind – Amaris 1050), во 2-й группе эпителий удаляли механически в центральной оптической зоне диаметром 8 мм, в 3-й группе деэпителизация не проводилась (рис. 3).

 

Рис. 3. Фото роговиц свиных кадаверных глаз после проведения частичной эксимерлазерной (а) и полной механической (б) деэпителизации

 

Далее, во всех группах осуществлялось насыщение роговицы 0,1%-м раствором рибофлавина на декстране Т500 «Декстралинк» путем инстилляций каждые 2 мин в течение 30 мин (рис. 4), затем проводился этап УФ облучения в течение 10 мин мощностью 18 мВт/см², после чего роговицы изолировались и погружались для фиксации в 10%-й раствор забуференного формалина на 2 дня.

 

Рис. 4. Фото роговиц свиных кадаверных глаз на этапе насыщения роговицы раствором рибофлавина после проведения частичной эксимерлазерной (а) и полной механической (б) деэпителизации

 

Для дальнейшего гистологического исследования проводилось обезвоживание роговиц в возрастающей концентрации спиртов, просветление в ксилоле и заливка в парафин. Изготовление срезов проводилось на ротационном микрокератоме Leica 2160 (Германия). Серийные поперечные срезы роговицы помещались на предметные стекла с poly-L-Lysin (Menzel-Glaser).

При окраске по Ван Гизону срезы перекрашивались в свежеприготовленном гематоксилине Вейгерта с выдержкой в нем 3–5 мин, после чего промывались в двух порциях водопроводной воды, ввиду обильного отхождения краски, окрашивались в пикрофуксине 2–3 мин, прополаскивались в воде в течение 5–10–15 с, проводились через 96°-й спирт с выдержкой в нем 1–2–3 мину и просветлялись в карбол-ксилоле с заключением в бальзам.

Пикрофуксин обладает дифференцирующим действием (за счет пикриновой кислоты) по отношению к железному гематоксилину, почему и допускается перекрашивание последним. Качество окраски контролируется под микроскопом, для чего срез повторно извлекают из пикрофуксина и быстро прополаскивают в воде.

Срезы окрашивались по Ван Гизону для визуализации плотности и ориентации коллагеновых волокон в строме роговицы. Сравнивались результаты гистологического исследования интактных роговиц, а также подвергнутых стандартной и модифицированной методикам кросслинкинга роговичного коллагена.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В первой группе в эксперименте полностью удалялся передний эпителий роговицы в зоне диаметром 8,0 мм. В препаратах роговицы, окрашенных по Ван Гизону, при полном отсутствии эпителия наблюдалось сохранение боуменовой мембраны в виде поверхностной гомогенной пластинки, в поверхностной строме – разобщение пучков коллагеновых волокон, появление обширных сливных межламеллярных лакунарных пространств между передней и средней стромой. При этом в толще средней и задней стромы наблюдались явления отека, инфильтрации ткани (рис. 5).

 

Рис. 5. Роговица свиного кадаверного глаза после полной механической деэпителизации, окраска по Ван Гизону, об. ×10

 

Во второй группе, где проводилась ограниченная по диаметру эксимерлазерная деэпителизация на глубину ⅔ эпителиального слоя с последующим механическим удалением оставшейся ⅓ эпителия, визуализировались как деэпителизированные участки, так и зоны с сохраненным эпителием, где определялась слоистость его строения от рядов кубических до плоских клеток без элементов ороговения (рис. 6). При окраске по Ван Гизону видно, что такие участки деэпителизации дали возможность пройти раствору рибофлавина в строму роговицы на всю ее глубину, что отразилось в появлении лакунарных пространств на всей площади поперечного среза роговицы до десцеметовой мембраны. Коллагеновые волокна при этом сохранили однонаправленность ориентации параллельно поверхности роговицы.

 

Рис. 6. Роговица свиного кадаверного глаза после проведения частичной эксимерлазерной деэпителизации, окраска по Ван Гизону, об. ×10

 

Наибольшее разрыхление передней стромы роговицы отмечалось в проекции зоны деэпителизации. Однако аналогичная картина с появлением большого количества лакунарных пространств между волокнами коллагена наблюдалась и под сохраненным эпителием, что говорит о наличии межламеллярного распространения раствора рибофлавина на область, превышающую по размерам зону деэпителизации, что подтверждает целесообразность проведения деэпителизации только в зоне кератоконуса и осуществления ультафиолетового облучения как в зоне полной деэпителизации, так и перифокально с захватом роговицы с сохранным эпителием.

 

Рис. 7. Интактная роговица свиного кадаверного глаза, окраска по Ван Гизону, об. ×10

 

В группе интактных роговиц в препаратах визуализировались как сохранный эпителий с единичными мелкими зонами десквамации поверхностных слоев клеток, боуменова мембрана и стромальный слой с явлениями отека и набухания, но без наличия лакун между волокнами коллагена, что говорит о том, что интактный эпителий препятствует проникновению раствора рибофлавина в строму роговицы (рис. 7).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Применение гистологических методов исследования позволило доказать достаточность насыщения роговицы раствором рибофлавина при выполнении модифицированной методики в сравнении со стандартной методикой кросслинкинга роговичного коллагена, что определяет безопасность модифицированной методики УФ-КРК. Также гистологический метод исследования позволяет обосновать необходимость проведения деэпителизации роговицы для обеспечения достаточности насыщения роговицы раствором рибофлавина. Частичная деэпителизация в области кератоконуса допустима при проведении Уф-КРК, поскольку, по результатам гистологического метода исследования, отмечается распространение раствора рибофлавина в строму роговицы под интактный эпителий.

 

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Competing interests. The authors declare that they have no competing interests.

×

About the authors

Elena G. Solodkova

Volgograd State Medical University; Eye Microsurgery named after Academician S.N. Fedorov. Volgograd branch

Author for correspondence.
Email: solo23el@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-7786-5665

Candidate of Medical Sciences, Acting Director, Academician S. N. Fedorov Eye Microsurgery, Associate Professor of the Department of Surgical Diseases No. 2

Russian Federation, Volgograd; Volgograd

Svetlana B. Izmailova

Eye Microsurgery named after Academician S.N. Fedorov

Email: fgu@mntk.ru
ORCID iD: 0000-0002-3516-1774

MD, Head of the Department of Transplantation and Opto-Reconstructive Surgery of the anterior segment of the eyeball

Russian Federation, Moscow

Igor N. Zakharov

Volgograd State Technical University

Email: sopromat@vstu.ru
ORCID iD: 0000-0001-7177-7245

Doctor of Technical Sciences, Head of the Department of Materials Resistance

Russian Federation, Volgograd

Viktor P. Fokin

Eye Microsurgery named after Academician S.N. Fedorov. Volgograd branch

Email: fokin@isee.ru
ORCID iD: 0000-0002-2513-9709

Doctor of Medical Sciences, Professor, Chief Specialist of the Organizational and Methodological Department

Russian Federation, Volgograd

Sergey V. Balalin

Volgograd State Medical University; Eye Microsurgery named after Academician S.N. Fedorov. Volgograd branch

Email: s.v.balalin@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-5250-3692

Doctor of Medical Sciences, Professor of the Department of Surgical Diseases No. 2, Head of the Scientific Department

Russian Federation, Volgograd; Volgograd

Valery L. Zagrebin

Volgograd State Medical University

Email: vlzagrebin@volgmed.ru
ORCID iD: 0000-0002-9559-9196

Candidate of Medical Sciences, Associate Professor, Head of the Department of Histology, Embryology, Cytology

Russian Federation, Volgograd

Evgeny V. Lobanov

Eye Microsurgery named after Academician S.N. Fedorov. Volgograd branch

Email: omt@isee.ru
ORCID iD: 0000-0001-9112-3230

Engineer of the Department for Repair and Maintenance of Medical Equipment

Russian Federation, Volgograd

Van Hoang Le

Volgograd State Technical University

Email: sopromat@vstu.ru
ORCID iD: 0000-0002-1536-3061

Postgraduate student

Russian Federation, Volgograd

References

  1. Feinbaum K. Modern aspects of etiopathogenesis and treatment of keratoconus. Oftal’mokhirurgiya = Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2011;3:80-83 (In Russ.).
  2. Spoerl E., Wollensak G., Seiler T. Inceased Resistance of Crosslinkinked Cornea against Enzymatic Digestion. Current Eye Research. 2004;29(1):35–40. doi: 10.1080/02713680490513182.
  3. Wollensak G., Spoerl E., Seiler T. Riboflavin/Ultraviolet-A Induced Collagen – Crosslinking for the Treatment of Keratokonus. American Journal of Ophthalmology. 2003;135:620–627. doi: 10.1016/s0002-9394(02)02220-1.
  4. Malyugin B.E., Izmailova S.B., Shatskikh A.V. et al. Experimental substantiation of the effectiveness of different methods of riboflavin delivery to the corneal stroma as the initial step of UV-crosslinking. Oftal’mokhirurgiya = Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2014;1:24–29. (In Russ.).
  5. Boriskina L.N., Blinkova E.S., Solodkova E.G. Method of keratoconus treatment. Patent of the Russian Federation. № 2556791. Zavl. 09.06.2014. Published. 20.07.2015. Bul. 2015; 20. (In Russ.).
  6. Sinha Roy A., Dupps W.Jr. Patient-specific computational modeling of keratoconus progression and differential responses to collagen cross-linking. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 2011;52:9174–9187. doi: 10.1167/iovs.11-7395.
  7. Seiler T.G., Fischinger I., Koller T. et al. Customized corneal cross-linking: one-year results. American Journal of Ophthalmology. 2016;166:14–21. doi: 10.1016/j.ajo.2016.02.029
  8. Shetty R., Pahuja N., Roshan T., Deshmukh R., Francis M., Ghosh A., PhD, Roy S. Customized corneal cross-linking using different UVA beam profiles. Journal of Refractive Surgery. 2017;33(10):676–682. doi: 10.3928/1081597X-20170621-07
  9. Cassagne M., Pierné K., Galiacy S.D. et al. Customized topography-guided corneal collagen cross-linking for keratoconus. Journal of Refractive Surgery. 2017;33(5):290–297. doi: 10.3928/1081597X-20170201-02
  10. Roberts C.J., Dupps W.Jr. Biomechanics of corneal ectasia and biomechanical treatments. Journal of Cataract & Refractive Surgery. 2014;40:991–998. doi: 10.1016/j.jcrs.2014.04.013.
  11. Ambrosio R.Jr., Lopes B.T., Faria-Correira F. et al. Integration of Scheimpflug-based corneal tomography and biomechanical assessments for enhancing ectasia detection. Journal of Refractive Surgery. 2017;33(7):434–444. doi: 10.3928/1081597X-20170426-02/
  12. Joda A.A., Shervin M.M., Kook D., Elsheikh A. Development and validation of a correction equation for Corvis tonometry. Computer Methods in Biomechanics and Biomedical. 2016;19:943–953. doi: 10.1080/10255842.2015.1077515.
  13. Luce D.A. Determining in vivo biomechanical properties of the cornea with an ocular response analyzer. Journal of Cataract & Refractive Surgery. 2005;31(1):156–162. doi: 10.1016/j.jcrs.2004.10.044.
  14. Roberts С.J., Mahmoud A.M., Bons J.P. et al. Introduction of two novel stiffness parameters at interpretation of air puff-induced biomechanical deformation response parameters with a dnamic Scheimpflug analyser. Journal of Refractive Surgery. 2017;33(4):266–273. doi: 10.3928/1081597X-20161221-03.
  15. Izquierdo L., Gilani F., Henriquez M. et al. Independent population validation of the Belin/Ambrysio enhanced ectasia display: Implications for keratoconus studies and screening. International Journal of Keratoconus and Ectatic Corneal Diseases. 2014;3(1):1–8. doi: 10.5005/jp-journals-10025-1069.
  16. Vinciguerra R., Elsheikh A., Roberts C.J. et al. Influence of pachymetry and intraocular pressure on dynamic corneal response parameters in healthy patients. Journal of Refractive Surgery. 2016;32:550–561. doi: 10.3928/1081597X-20160524-01.
  17. Louise P. G. E., Marcella Q.S., Bernardo T.L., et al. A.Jr. Biomechanical diagnostics of the cornea. Eye Vis (Lond). 2020;5;7–9. doi: 10.1186/s40662-020-0174-x.
  18. Ambrosio R.Jr., Noguerira L.P., Caldas D.L., et al. Evaluation of corneal shape and biomechanics before LASIK. International Ophthalmology Clinics. 2011;51:11–38. doi: 10.1097/IIO.0b013e31820f1d2d.
  19. Stein A.A., Moiseeva I.N., Lyubimov G.A. Mathematical model of the cornea of the eye, taking into account the exponential nonlinearity of its elastic properties under the condition of geometric smallness of deformations. Rossiiskii zhurnal biomekhaniki = Russian Journal of Biomechanics. 2019;23(3):375–390. (In Russ.).
  20. Abyaneh M.H., Wildman R.D., Ashcroft I.A., Ruiz P.D. A hybrid approach to determining cornea mechanical properties in vivo using a combination of nano-indentation and inverse finite element analysis. Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 2013;27:239–248. doi: 10.1016/j.jmbbm.2013.05.016.
  21. Pandolfi A. Cornea modelling. Eye and Vision. 2020;7:2. doi: 10.1186/s40662-019-0166-x.
  22. Nikitin I.S., Zhuravlev A.B., Iroshnikov N.G. et al. Mechanical-mathematical model of intrastromal shape correction of the cornea in keratoconus. Rossiiskii zhurnal biomekhaniki = Russian Journal of Biomechanics. 2017;21:404–417. (In Russ.) doi: 10.15593/RZhBiomeh/2017.4.07.
  23. Solodkova E.G., Malyugin B.E., Fokin V.P., Balalin S.V. et al. Analysis of the results of a modified personalized topographically and tomographically oriented technique of ultraviolet corneal collagen crosslinking. Vestnik oftal’mologii = Russian Annals of Ophthalmology. 2023;3:5–14. (In Russ.). doi: 10.17116/oftalma20231390315.
  24. Bikbov M.M., Shevchuk N.E., Halimov N.B., Zainullina N.B. Experimental study of saturation of cornea and anterior chamber moisture with photosensitizers. VII Rossiiskii obshchenatsional’nyi oftal’mologicheskii forum: sbornik nauchnykh trudov nauchno-prakticheskoi konferentsmii s mezhdunarodnym uchastiem = VII Russian national ophthalmologic forum: collection of scientific papers of scientific and practical conference with international participation. 2014;2:401–405. (In Russ.).

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download
2. Fig. 1. Computer model of the cornea with keratoconus: a – distribution of the coefficient of reduction of corneal rigidity, b – distribution of the intensity of corneal deformation, c – pachymetry map of the patient

Download (106KB)
Indexing metadata
3. Fig. 2. UV irradiation stage during the modified corneal collagen crosslinking technique

Download (205KB)
Indexing metadata
4. Fig. 3. Photo of corneas of pig cadaver eyes after partial excimer laser (a) and complete mechanical (b) de-epithelialization

Download (141KB)
Indexing metadata
5. Fig. 4. Photo of corneas of pig cadaver eyes at the stage of saturation of the cornea with riboflavin solution after partial excimer laser (a) and complete mechanical (b) de-epithelialization

Download (135KB)
Indexing metadata
6. Fig. 5. Cornea of ​​a pig cadaver eye after complete mechanical de-epithelialization, stained according to Van Gieson, ob. ×10

Download (207KB)
Indexing metadata
7. Fig. 6. Cornea of ​​a pig cadaver eye after partial excimer laser de-epithelialization, stained according to Van Gieson, ob. ×10

Download (220KB)
Indexing metadata
8. Fig. 7. Intact cornea of ​​a pig cadaver eye, stained according to Van Gieson, ob. ×10

Download (137KB)
Indexing metadata

Copyright (c) 2024 Солодкова Е.G., Измайлова С.B., Захаров И.N., Фокин В.P., Балалин С.V., Загребин В.L., Лобанов E.V., Лэ В.H.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».