MICROTEST FOR THE DETERMINATION OF THE AMYLOLYTIC ACTIVITY OF SALIVA ALPHA-AMYLASE


Cite item

Full Text

Abstract

It is known that the concentration of alpha-amylase in saliva can determine its catalytic activity, the decrease of which occurs during various pathological processes in the oral cavity. The overwhelming number of methods for determining the catalytic activity of enzymes involve the use of a large volume of reagents and samples, which makes it difficult to study saliva in large groups. The purpose of the study is to evaluate the possibility of using the microvariation of the reaction to determine the activity of saliva alpha-amylase, as well as to analyze the dependence of the enzyme activity on its concentration. Materials and methods. Saliva was obtained from 15 people with intact periodontal disease and the dentition, without somatic pathology. For in vitro studies, alpha-amylase solutions were prepared with an enzyme concentration of 10; five; 2.5; one; 0.5 and 0.25 mg / ml ex tempore. To save samples and reagents, the volume of the reaction participants was proportionally reduced. The further analysis procedure was carried out according to the instructions of the manufacturer of the «AMYLASE-VITAL» reagent kit to determine the activity of alpha-amylase. Statistical analysis of the results was performed using the Student’s t-test in the program Statistica 7.0. Results. The comparability of the results of determining the activity of alpha-amylase using the classical and microplate variants of the reaction is shown. With an increase in alpha-amylase concentration from 0 to 2.5 mg / ml, a directly proportional increase in enzyme activity is observed. In the case of an increase in the concentration of alpha-amylase above 2.5 mg / ml, a decrease in its activity is shown, which may be due to the precipitation of a part of the enzyme. The activity of the enzyme in saliva of practically healthy individuals using the microvariation of the reaction was 528.6 ± 2.4 U / l. In conclusion the use of a microvariant of the reaction for determining the activity of alpha-amylase may be justified for a large number of subjects. A linear dependence of the enzyme activity on its concentration in the range of 0-2.5 mg / ml is shown.

About the authors

A. P Godovalov

Acad. E.A. Wagner Perm State Medical University

614000, Perm, Russia

M. V Yakovlev

Acad. E.A. Wagner Perm State Medical University

Email: mikhailyak@mail.ru
студент стоматологического акультета ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера» Минздрава России 614000, Perm, Russia

I. I Zadorina

Acad. E.A. Wagner Perm State Medical University

614000, Perm, Russia

References

  1. Feng Y., Li Q., Chen J., Yi P., Xu X., Fan Y., et al. Salivary protease spectrum biomarkers of oral cancer. Int J. Oral Sci. 2019;11(1): 7.
  2. Zhang Q., Chen B., Zhu D., Yan F. Biomarker levels in gingival crevicular fluid of subjects with different periodontal conditions: A cross-sectional study. Arch. Oral Biol. 2016; 72: 92-8.
  3. Максутова В.О., Цветков В.О., Шпирная И.А., Ибрагимов Р.И. Определение активности амилолитических ферментов по гидролизу субстрата, иммобилизованного в полиакриламидном геле. Доклады Башкирского университета, 2017; 295): 736-40.
  4. Садовничий В.А., Ветров Д.П., Вишневский В.В. и др. Математический метод определения каталитической активности ферментов в сложных биологических растворах. Интеллектуальные системы. Теория и приложения (ранее: Интеллектуальные системы по 2014, № 2, ISSN 2075-9460). 2013; 17(1-4. - С.): 517-22.
  5. Яковлев М.В., Батог К.А. Изучение антибиопленочной активности альфа-амилазы. Материалы XVII научной конференции молодых ученых и специалистов с международным участием «Молодые ученые - медицине». Владикавказ; 2018: 339-41.
  6. Мельник К.Н., Баишева Г.М., Гильмиярова Ф.Н., Аллатова Т.А. Саливадиагностика как метод определения иммунологической адаптации к учебному стрессу в условиях различного питьевого поведения. Клиническая лабораторная диагностика. 2018; 63(6): 353-7.
  7. Биохимия ротовой жидкости в норме и при патологии. Учебно-методическое пособие. Под ред. Шестопалова А.В. /ФГБОУ ВО РНИМУ имени Н.И. Пирогова Минздрава России. М.: ИКАР; 2017.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2019 Eco-Vector


 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».