Разработка и валидация методики количественного определения молсидомина в различных тканях крыс с помощью ВЭЖХ-МС/МС

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Актуальность. Молсидомин – широко используемый в клинической практике вазоактивный лекарственный препарат из группы сиднониминов. Использование молсидомина в качестве препарата сравнения при проведении фармакокинетических исследований новых фармакологических средств группы сиднониминов требует разработки и внедрения точных и воспроизводимых методик количественного определения данного лекарственного средства в органах и тканях подопытных животных.

Цель исследования – разработка и валидация методики количественного определения молсидомина в различных тканях крыс с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС).

Материал и методы. Количественное определение молсидомина в плазме крови и гомогенатах тканей крыс проводили методом ВЭЖХ-МС/МС. В основе пробоподготовки биологического материала использовали метод осаждения белков метанолом. Хроматографическое разделение осуществляли водным раствором метанола на колонке Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 4.6x100 mm 2.7 Micron.

Результаты. Разработанная биоаналитическая методика валидирована по следующим показателям: селективность, матричный эффект, перенос пробы, линейность аналитического диапазона, нижний предел количественного определения, внутри- и межсерийная точность и прецизионность, фактор разбавления, стабильность определяемых веществ на этапах анализа.

Выводы. Разработана и валидирована методика количественного определения молсидомина в плазме крови и гомогенатах тканей крыс. Аналитический диапазон составил 5,0–1000,0 нг/мл для плазмы крови, гомогенатов печени, почек, головного мозга и селезенки; 1,0–1000,0 нг/мл для гомогенатов скелетных мышц и тканей сердца; 10,0–1000,0 нг/мл для гомогената жировой ткани, что позволяет использовать разработанную методику для проведения фармакокинетических исследований молсидомина.

Об авторах

Н. С. Попов

ФГБОУ ВО Тверской ГМУ Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: ns.popov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-1792-7414

к.фарм.н., зав. научно-исследовательской лабораторией, доцент кафедры фармакологии и клинической фармакологии

Россия, Тверь

В. Ю. Балабаньян

Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова

Email: ns.popov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5744-7060

д.фарм.н., доцент, вед. науч. сотрудник, лаборатория трансляционной медицины, факультет фундаментальной медицины

Россия, Москва

М. С. Баранов

Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН

Email: ns.popov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-9339-7603

к.х.н., ст. науч. сотрудник, группа химии гетероциклических соединений

Россия, Москва

Список литературы

  1. Horton A., Schiefer I.T. Pharmacokinetics and pharmacodynam-ics of nitric oxide mimetic agents. Nitric Oxide. 2019; 84: 69–78. DOI: org/10.1016/j.niox.2019.01.001.
  2. Paes de Barros M., Casares Araujo-Chaves J., Marlise Mendes Brito A., Lourenço Nantes-Cardoso I. Oxidative/nitrative me-chanism of molsidomine mitotoxicity assayed by the cytochro-me c reaction with SIN-1 in models of biological membranes. Chemical Research in Toxicology. 2020; 33(11): 2775–2784. DOI: org/10.1021/acs.chemrestox.0c00122.
  3. Чистик Т.В. Донаторы оксида азота в терапии пациентов с ишемической болезнью сердца: фокус на молсидомин. Артериальная гипертензия. 2018; 2 (58). DOI: org/10.22141/2224-1485.2.58.2018.131062.
  4. Косарев В.В., Бабанов С.А. Современные подходы к антиангинальной терапии при ишемической болезни сердца: в фокусе сиднонимины. Русский медицинский журнал. 2011; 14: 895–901.
  5. Hernández-Melesio M.A., Alcaraz-Zubeldia M., Jiménez-Capdeville M.E., Martínez-Lazcano J.C., Santoyo-Pérez M.E., Quevedo-Corona L., Pérez-Severiano F. Nitric oxide donor molsidomine promotes retrieval of object recognition memory in a model of cognitive deficit induced by 192 IgG-saporin. Be-havioural brain research. 2019; 366: 108–117. DOI: org/10.1016/j.bbr.2019.03.031.
  6. Никонов В.В., Киношенко Е.И., Курсов С.В. Нитраты в клинической практике. Медицина неотложных состояний. 2020; 16(4). DOI.org/10.22141/2224-0586.16.4.2020.207928.
  7. Messin R., Opolski G., Fenyvesi T., Carreer-Bruhwyler F., Du-bois C., Famaey J. P., Géczy J. Efficacy and safety of molsidomine once-a-day in patients with stable angina pectoris. International journal of cardiology. 2005; 98(1): 79–89. DOI: org/10.1016/j.ijcard.2004.01.007.
  8. Миронов А.Н. Руководство по экспертизе лекарственных средств. Т. II. М.: Гриф и К. 2013: 280.
  9. Food and Drug Administration. Available at: https://www. fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/ bioanalytical-method-validation-guidance-industry.
  10. European Medicines Agency. Available at: https://www.ema. europa.eu/en/bioanalytical-method-validation.
  11. Slatter J.G., Stalker D.J., Feenstra K.L., Welshman I.R., Bruss J.B., Sams J.P., Shobe E.M. Pharmacokinetics, metabolism, and excretion of linezolid following an oral dose of [14C] linezolid to healthy human subjects. Drug Metabolism and Disposition. 2001; 29(8): 1136–1145.
  12. Dutot C., Moreau J., Cordonnier P., Spreux-Varoquaux O., Klein C., Ostrowski J., Pays M. Determination of the active me-tabolite of molsidomine in human plasma by reversed-phase high-performance liquid chromatography. Journal of Chroma-tography B: Biomedical Sciences and Applications. 1990; 528: 435–446. DOI: org/10.1016/S0378-4347(00)82401-9.
  13. Richter L. H., Jacobs C. M., Mahfoud F., Kindermann I., Böhm M., Meyer M. R. Development and application of a LC-HRMS/MS method for analyzing antihypertensive drugs in oral fluid for monitoring drug adherence. Analytica chimica acta. 2019; 1070: 69–79. DOI:org/10.1016/j.aca.2019.04.026.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Структурные формулы молсидомина (A) и линезолида (B)

Скачать (2KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Масс-спектры ионов-предшественников и ионов-продуктов молсидомина и линезолида в режиме регистрации положительных ионов

Скачать (58KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Хроматограмма модельного образца интактной плазмы крыс с концентрацией молсидомина 500 нг/мл

Скачать (26KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Хроматограмма образца интактной плазмы крови крыс

Скачать (34KB)
Метаданные
6. Рис. 5. График зависимости отношения площади пика молсидомина к площади пика линезолида от концентрации молсидомина в плазме крови крыс

Скачать (12KB)
Метаданные
7. Рис. 6. Хроматограмма образца плазмы крови крыс с концентрацией молсидомина на уровне НПКО

Скачать (30KB)
Метаданные

Согласие на обработку персональных данных

 

Используя сайт https://journals.rcsi.science, я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных») даю согласие на обработку персональных данных на этом сайте (текст Согласия) и на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика» (текст Согласия).