THE INVESTIGATION OF DNA DAMAGE IN LYMPHOCYTES BY COMET ASSAY IN CHRONIC VIRAL HEPATITIS B PATIENTS


Cite item

Full Text

Abstract

The investigation of the degree of the lymphocyte DNA damage in chronic viral hepatitis B (HBV) patients is of interest for several reasons. Firstly, it is possible to judge indirectly about the depth of the pathological process at the level of the whole organism, with bearing in mind features of the pathogenic replication of hepatitis B virus. Secondly, it is possible to give an estimation of the degree of genotoxic impact of the virus on blood cells that plays an essential role in the shaping of the immune response of the body. The study was executed on 50 blood samples from HBV patients, divided in 5 groups on the fibrosis grade according to METAVIR score: F0 (n = 10), F1 (N = 10), F2 (N = 10), F3 (n = 10), F4 (n = 10). The control group was consisted of 43 volunteers matched by the age and gender without concomitant diseases. From blood samples taken at the time of the admission to the hospital lymphocytes were isolated by density gradient on Ficoll-urografin. The degree of DNA damage in lymphocytes was determined by virtue of alkaline version of the DNA comet assay. There was noted the direct relationship between an increase in % DNA in the tail of comets and the grade of liver fibrosis. So in the control group, % DNA in the tail accounted for 3.75 ± 1.44. In the F0 group % of DNA in the tail was 5.07 ± 1.25, F1 - 6.79 ± 1.79, F2 - 7.65 ± 1.62, F3 - 8.05 ± 1.18, F4 - 9.84 ± 3.09. It is noteworthy that in groups F2, F3, F4 differences were statistically significant in comparison with the control group. Also there was noted the presence of apoptotic cells in F3, F4 groups: 1 and 0.88%, respectively. Identified changes are both important in the description of to molecular patterns of the pathogenesis of chronic hepatitis B associated with damage, and also can serve as an indirect indication of the stage of liver fibrosis.

About the authors

A. O Mikhailov

Pacific State Medical University

Email: mao1991@mail.ru
2, Ostryakov Avenue, Vladivostok, 690002, Russian Federation

A. F Popov

Pacific State Medical University

2, Ostryakov Avenue, Vladivostok, 690002, Russian Federation

N. S Ivanova

Pacific State Medical University

2, Ostryakov Avenue, Vladivostok, 690002, Russian Federation

A. I Simakova

Pacific State Medical University

2, Ostryakov Avenue, Vladivostok, 690002, Russian Federation

References

  1. Balogh J., Victor D., Asham E.H., Burroughs S.G. Hepatocellular carcinoma: a review. J. Hepatocell. Carcinoma. 2016; 3: 41-53.
  2. Ucur A., Palanduz S., Cefle K., Ozturk S., Tutkan G., Vatansever S. et al. Sister chromatid exchange and mitotic index in patients with cirrhosis related to hepatitis B and C viruses and in chronic carriers. Hepatogastroenterology. 2003; 50 (54): 2137-40.
  3. Bhargava A., Khan S., Panwar H., Pathak N., Punde R.P. et al. Occult hepatitis B virus infection with low viremia induces DNA damage, apoptosis and oxidative stress in peripheral blood lymphocytes. Virus Res. 2010; 153 (1): 143-50.
  4. Kasai H. What causes human cancer? Approaches from the chemistry of DNA damage. Free Genes Environ. 2016; 38: 19.
  5. Bolukbas C., Bolukbas F.F., Kocyigit A., Aslan M., Selek S. et al. Relationship between levels of DNA damage in lymphocytes and histopathological severity of chronic hepatitis C and various clinical forms of hepatitis B. J. Gastroenterol. Hepatol. 2006; 21 (3): 610-6.
  6. Grossi S., Sumberaz A., Gosmar M., Mattioli F., Testino G., Martelli A. DNA damage in peripheral blood lymphocytes of patients with cirrhosis related to alcohol abuse or to hepatitis B and C viruses. Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. 2008; 20 (1): 22-5.
  7. Sakae P.N., Ihara S.S., Ribeiro D.A., de Carvalho L., Parise E.R. Insulin resistance is associated with DNA damage in peripheral blood cells in non-diabetic patients with genotype 1 chronic hepatitis C. Free Radic. Res. 2013; 47 (9): 750-6.
  8. Решетняк В.И., Шарафанова Т.И., Ильченко Л.Ю. Порошенко Г.Г. Исследование структуры ДНК лимфоцитов периферической крови у больных хроническими вирусными поражениями печени. Бюлл. экспер. биол. 2002; (4): 459-62.
  9. Olive P.L., Banáth J.P., Durand R.E. Detection of etoposide resistance by measuring DNA damage in individual Chinese hamster cells. J. Natl. Cancer Inst. 1990; 82 (9): 779-83.
  10. Байкова Т.А., Лопаткина Т.Н. Многообразие внепеченочных проявлений хронических вирусных гепатитов B и C, общие принципы лечения. Тер. арх. 2013; 85 (4): 106-10.
  11. Alavian S.M., Showraki A. Hepatitis B and its relationship with oxidative stress. Hepat. Mon. 2016; 16 (9): e37 973.
  12. Tarocchi M., Polvani S., Marroncini G., Galli A. Molecular mechanism of hepatitis B virus-induced hepatocarcinogenesis. World J. Gastroenterol. 2014; 20 (33): 11 630-40.
  13. Дюйзен И.В., Иванис В.А., Михайлов А.О., Менчинская Е.С. и др. Исследование содержания нейрональных маркеров при некоторых инфекционных заболеваниях. Тихоокеанский медицинский журнал. 2015; 60 (2): 27-30.
  14. Su T.H., Kao J.H., Liu C.J. Molecular mechanism and treatment of viral hepatitis-related liver fibrosis. Int. J. Mol. Sci. 2014; 15 (6): 10 578-604.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2017 Eco-vector


 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».