РОЛЬ ГЕНОВ RAD50 И SMARCA5 В РЕГУЛЯЦИИ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИК ЦИСПЛАТИНУ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК РАКА ЯИЧНИКАИ РАКА ГОЛОВЫ И ШЕИ


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования - оценка влияния генов RAD50 и SMARCA5 на чувствительность к цисплатину и другим ДНК-повреждающим агентам, используемым в терапии опухолевых заболеваний (5-фторурацил, олапариб), оценка роли данных генов в регуляции ответа на повреждение ДНК в клеточных линиях рака яичника (OVCAR8) и головы и шеи (SCC61, SCC25). Материал и методы. Нами была выполнена трансфекция опухолевых клеток малыми интерферирующими РНК (миРНК) («Qiagen», Германия) для осуществления нокдауна генов RAD50 и SMARCA5, а также контрольных генов. Выживаемость опухолевых клеток в присутствии и отсутствие ДНК-повреждающих агентов оценивали спектрофотометрическим методом с использованием реагента CellTiterBlue («Promega», США). Для оценки роли RAD50 и SMARCA5 в регуляции ответа на повреждение ДНК мы выполнили анализ фосфорилирования гистонового белка H2AX методом иммунофлуоресцентной микроскопии. Результаты. Нами было показано влияние генов RAD50 и SMARCA5 на выживаемость опухолевых клеток и регуляцию чувствительности к цисплатину и другим ДНК-повреждающим агентам (5-фторурацил, олапариб) в клеточных линиях рака головы и шеи (SCC61, SCC25) и рака яичника (OVCAR-8). Полученные данные указывают на роль SMARCA5 в регуляции базового уровня фосфорилирования гистонового белка H2AX в отсутствие повреждения ДНК. Заключение. Полученные нами данные характеризуют гены RAD50 и SMARCA5 как перспективные терапевтические мишени в лечении и предиктивные маркеры ответа на терапию цисплатином и другими ДНК-повреждающими препаратами у пациентов с плоскоклеточной карциномой головы и шеи и раком яичника.

Об авторах

Анна Владиславовна Гапонова

ФГАОУ ВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет»

Email: annagaponova28@gmail.com
младший научный сотрудник кафедры биохимии; 420008, г. Казань, ул. Кремлевская, д. 18 420008, г. Казань, Россия

И. Г Серебрийский

ФГАОУ ВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет»

420008, г. Казань, Россия

Р. Г Киямова

ФГАОУ ВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет»

420008, г. Казань, Россия

Список литературы

  1. Chu G. Cellular responses to cisplatin. The roles of DNA-binding proteins and DNA repair. J. Biol. Chem. 1994; 269(2): 787-90.
  2. Perez R.P. Cellular and molecular determinants of cisplatin resistance. Eur. J. Cancer. 1998; 34(10):1535-42.
  3. Johnson S.W., Perez R.P., Godwin A.K., Yeung A.T., Handel L.M., Ozols R.F., Hamilton T.C. Role of platinum-DNA adduct formation and removal in cisplatin resistance in human ovarian cancer cell lines. Biochem. Pharmacol. 1994; 47(4): 689-97.
  4. Johnson S.W., Swiggard P.A., Handel L.M., Brennan J.M., Godwin A.K., Owls R.F. et al. Relationship between platinum-DNA adduct formation and removal and cisplatin cytotoxicity in cisplatin-sensitive and -resistant human ovarian cancer cells. Cancer Res. 1994; 54(22): 5911-6.
  5. Tan D.S., Kaye S.B. Chemotherapy for patients with BRCA1 and BRCA2-mutated ovarian cancer: same or different? Am. Soc. Clin. Oncol. Educ. Book. 2015: 114-21.
  6. Kiyamova R., Kostianets O., Malyuchik S., Filonenko V., Usenko V., Gurtovyy V. et al. Identification of tumor-associated antigens from medullary breast carcinoma by a modified SEREX approach. Mol. Biotechnol. 2010; 46(2): 105-12.
  7. Kostianets О., Shyian M., Demidov S., Antoniuk S., Gout I., Filonenko V., Kiyamova R. Serological analysis of SEREX-defined medullary breasr carcinoma-associated antigens. Cancer Invest. 2012; 30(7): 519-27.
  8. Kostianets O., Antoniuk S., Filonenko V., Kiyamova R. Immunohistochemical analysis of medullary breast carcinoma autoantigens in different histological types of breast carcinomas. Diagn. Pathol. 2012; 7(1):161. doi: 10.1186/1746-1596-7-161.
  9. Bartkova J., Tommiska J., Oplustilova L., Aaltonen K., Tamminen A., Heikkinen T. et al. Aberrations of the MRE11-RAD50-NBS1 DNA damage sensor complex in human breast cancer: MRE11 as a candidate familial cancer-predisposing gene. Mol. Oncol. 2008; 2(4): 296-316.
  10. Tommiska J., Seal S., Renwick A., Barfoot R., Baskcomb L., Jayatilake H. et al. Evaluation of RAD50 in familial breast cancer predisposition. Int. J. Cancer. 2006; 118(11): 2911-6.
  11. Abuzeid W.M., Jiang X., Shi G., Wang H., Paulson D., Araki K. et al. Molecular disruption of RAD50 sensitizes human tumor cells to cisplatin-based chemotherapy. J. Clin. Invest. 2009; 119(7): 1974-85.
  12. Flores-Perez A., Rafaelli L.E., Ramírez-Torres N., Aréchaga-Ocampo E., Frías S., Sánchez S. et al. RAD50 targeting impairs DNA damage response and sensitizes human breast cancer cells to cisplatin therapy. Cancer. Biol. Ther. 2014; 15(6): 777-88.
  13. Smeenk G., Wiegant W.W., Marteijn J.A., Luijsterburg M.S., Sroczynski N., Costelloe T. et al. Poly(ADP-ribosyl)ation links the chromatin remodeler SMARCA5/SNF2H to RNF168-dependent DNA damage signaling. J. Cell. Sci. 2013; 126(4): 889-903.
  14. Xu X., Xie K., Zhang X.Q., Pridgen E.M., Park G.Y., Cui D.S. et al. Enhancing tumor cell response to chemotherapy through nanoparticle-mediated codelivery of siRNA and cisplatin prodrug. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2013; 110(46): 18638-43.
  15. Doles J., Oliver T.G., Cameron E.R., Hsu G., Jacks T., Walker G.C., Hemann M.T. Suppression of Rev3, the catalytic subunit of Pol{zeta}, sensitizes drug-resistant lung tumors to chemotherapy. Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 2010; 107(48): 20786-91.
  16. Huang K.K., Jang K.W., Kim S., Kim H.S., Kim S.M., Kwon H.J. et al. Exome sequencing reveals recurrent REV3L mutations in cisplatin-resistant squamous cell carcinoma of head and neck. Sci. Rep. 2016; 6: 19552.
  17. Sharma A., Singh K., Almasan A. Histone H2AX phosphorylation: a marker for DNA damage. Meth. Mol. Biol. 2012; 920: 613-26.
  18. Turinetto V., Giachino C. Multiple facets of histone variant H2AX: a DNA double-strand-break marker with several biological functions. Nucleic Acids Res. 2015; 43(5): 2489-98.
  19. Pabla N., Huang S., Mi Q.S., Daniel R., Dong Z. ATR-Chk2 signaling in p53 activation and DNA damage response during cisplatin-induced apoptosis. J. Biol. Chem. 2008; 283(10): 6572-83.
  20. Jackson S.P. Sensing and repairing DNA double-strand breaks. Carcinogenesis. 2002; 23(5): 687-96.
  21. Paull T.T., Rogakou E.P., Yamazaki V., Kirchgessner C.U., Gellert M., Bonner W.M. A critical role for histone H2AX in recruitment of repair factors to nuclear foci after DNA damage. Curr. Biol. 2000; 10(15): 886-95.
  22. Jin Q., Mao X., Li B., Guan S., Yao F., Jin F. Overexpression of SMARCA5 correlates with cell proliferation and migration in breast cancer. Tumour Biol. 2015; 36(3): 1895-902.
  23. Heikkinen K., Rapakko K., Karppinen S.M., Erkko H., Knuutila S., Lundán T. et al. RAD50 and NBS1 are breast cancer susceptibility genes associated with genomic instability. Carcinogenesis. 2006; 27(8): 1593-9.
  24. Wyatt M.D., Wilson D.M. Participation of DNA repair in the response to 5-fluorouracil. Cell Mol. Life Sci. 2009; 66(5): 788-99.
  25. Adamsen B.L., Kravik K.L., De Angelis P.M. DNA damage signaling in response to 5-fluorouracil in three colorectal cancer cell lines with different mismatch repair and TP53 status. Int. J. Oncol. 2011; 39(3): 673-82.
  26. Martin L.P., Hamilton T.C., Schilder R.J. Platinum resistance: the role of DNA repair pathways. Clin. Cancer Res. 2008; 14(5): 1291-5.
  27. Meehan R.S., Chen A.P. New treatment option for ovarian cancer: PARP inhibitors. Gynecol. Oncol. Res. Pract. 2016; 3: 3.

© ООО "Эко-Вектор", 2017


 


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах