Иммунофенотип маркёров дифференцировки дендритных клеток при раке молочной железы в условиях in vitro

Обоснование. Во время созревания дендритные клетки начинают синтезировать пептиды, которые включают молекулы главного комплекса гистосовместимости MHC-II, костимулирующие молекулы CD40⁺, CD80⁺ и CD86⁺, а также CD83⁺. У онкологических больных дисфункция дендритных клеток может привести к серьёзным последствиям в виде дефицита противоопухолевого иммунитета, прогрессии опухоли и снижения ответа на иммунотерапию. Всё это важно учитывать для переосмысления стратегии иммунотерапии опухоли. Таким образом, подходы, направленные на усиление жизнеспособности дендритных клеток, профилактику их дисфункции и поляризации, следует рассматривать как необходимый этап работы по увеличению эффективности дендритно-клеточных вакцин.

Цель — оценка особенностей экспрессии дифференцировочных маркёров созревания дендритных клеток, полученных из моноцитов периферической крови в условиях культивирования у пациентов с раком молочной железы.

Материалы и методы. С информированного добровольного согласия были обследованы 19 пациентов с диагнозом «рак молочной железы». Мононуклеарные клетки выделяли на градиенте плотности Ficoll. Для адгезии моноцитов на дно культуральных флаконов площадью 75 см² их предварительно инкубировали в течение 1,5 ч в условиях 5% СО₂ при 37 ℃. К прикрепившимся моноцитам добавляли ростовые факторы и факторы дифференцировки — GM-CSF (40 мкл) и IL-4 (40 мкл), которые вносили на 1-й, 3-й и 5-й дни культивирования. Иммунофенотипирование дендритных клеток проводили на 7-й и 9-й дни культивирования методом проточной цитофлуориметрии.

Результаты. Данные проточной цитофлуориметрии указывают, что жизнеспособность культивируемых дендритных клеток у онкобольных существенно снижается на 9-й день по сравнению с 7-м днём культивирования. На 9-й день отмечается значимое повышение экспрессии CD80⁺ (в 2,40, p=0,028)) и снижение СD83⁺ (в 1,65, p=0,036) по сравнению с 7-м днём.

Заключение. В целом отмечаются значимые признаки созревания дендритных клеток: потеря маркёра моноцитов CD14⁺, повышенная экспрессия CD80⁺, СD83⁺, СD86⁺ — основных маркёров. Снижение СD83⁺ можно рассматривать как подавление чрезмерной активации иммунных реакций. В дальнейшем необходимо более углублённое изучение особенностей созревания и активации культивированных дендритных клеток для понимания механизмов и факторов, влияющих на снижение эффективности иммунотерапии аутологичной дендритно-клеточной вакциной.