Влияние наночастиц оксида графена на апоптоз Т-лимфоцитов и клеток линии Jurkat

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Графен и его производные – материалы с уникальными физико-химическими свойствами, углубленное изучение которых позволяет рассматривать их в качестве перспективных биомедицинских агентов для адресной доставки лекарств и генов, фототермической терапии раковых заболеваний, биовизуализации и пр. Однако для этого требуется комплексное изучение влияния наноматериалов на организм, в том числе на клетки иммунной системы.

Цель нашего исследования – изучение влияния пегилированных наночастиц оксида графена (ОГ) на апоптоз Т-лимфоцитов из крови здоровых доноров, а также клеток иммортализированной Т-клеточной линии Jurkat 5332. Сравнение полученных данных позволит углубить наше понимание биосовместимости наноматериалов, а также ответит на вопрос, насколько результаты, полученные с использованием клеточных линий, справедливы для аналогичных клеток здорового организма.

В работе мы использовали наночастицы ОГ разных размеров (100-200 нм, 1-5 мкм), функционализированные линейным и разветвленным полиэтиленгликолем (ПЭГ). Клетки культивировали в течение суток при 37 °С и 5% СО2 с наночастицами в концентрациях 5 и 25 мкг/мл, после чего оценивали жизнеспособность, а также ранний и поздний апоптоз клеток линии Jurkat и CD3+ клеток здоровых доноров методом проточной цитометрии.

При изучении влияния наночастиц ОГ на Т-клетки здоровых доноров было установлено, что наночастицы малой размерности, покрытые линейным ПЭГ, в высокой концентрации (25 мкг/мл) способны достоверно понижать число живых клеток, а также увеличивать число клеток в состоянии позднего апоптоза. В то же время наночастицы большой размерности, покрытые разветвленным ПЭГ, в высокой концентрации (25 мкг/мл), увеличивали число Т-клеток, находящихся в раннем апоптозе.

Установлено, что наночастицы ОГ в исследуемых концентрациях не оказывали влияния на жизнеспособность, а также показатели апоптоза клеток линии Jurkat вне зависимости от размеров, концентрации и типа поверхностной функционализации частиц.

Полученные данные свидетельствуют о том, что наночастицы ОГ оказывают различные эффекты на здоровые и раковые Т-лимфоциты. Можно предположить, что подобные несоответствия могут быть объяснены большей устойчивостью опухолевых клеток в сравнении со здоровыми. Из этого можно сделать вывод о том, что при изучении воздействия наноматериалов на клетки нельзя ограничиваться экспериментами на клеточных линиях, так как их характеристики могут значительно отличаться от таковых у здоровых клеток.

Об авторах

Дарья Игоревна Усанина

Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН – филиал ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр» УрО РАН; ФГАОУ ВО «Пермский государственный национальный исследовательский университет»

Автор, ответственный за переписку.
Email: usanina_d@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-0436-0890

младший научный сотрудник лаборатории молекулярной иммунологии

Россия, 614081, Пермь, ул. Голева, 13; Пермь, ул. Букирева, 15

Софья Вадимовна Ужвиюк

ФГАОУ ВО «Пермский государственный национальный исследовательский университет»

Email: kochurova.sofja@yandex.ru

инженер лаборатории клеточной иммунологии и нанобиотехнологии, Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук

Пермь, ул. Букирева, 15

Светлана Анатольевна Заморина

Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН – филиал ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр» УрО РАН; ФГАОУ ВО «Пермский государственный национальный исследовательский университет»

Email: mantissa7@mail.ru

доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной иммунологии и нанобиотехнологии, профессор кафедры микробиологии и иммунологии биологического факультета

Россия, 614081, Пермь, ул. Голева, 13; Пермь, ул. Букирева, 15

Список литературы

  1. Заморина С.А., Храмцов П.В., Раев М.Б., Тимганова В.П., Бочкова М.С., Нечаев А.И., Шунькин Е.О., Хазиахматова О.Г., Малащенко В.В., Литвинова Л.С. Взаимодействие наночастиц оксида графена с клетками линии Jurkat в системе Cell-IQ // Доклады российской академии наук. Науки о жизни, 2021. Т. 501. C. 78-84. [Zamorina S.A., Khramtsov P.V., Rayev M.B., Timganova V.P., Bochkova M.S., Nechaev A.I., Shunkin E.O., Khaziakhmatova O.G., Malashchenko V.V., Litvinova L.S. Graphene oxide nanoparticles interaction with Jurkat cell line in Cell-IQ system. Doklady rossiyskoy akademii nauk. Nauki o zhizni = Reports of the Russian Academy of Sciences. Life Sciences, 2021, Vol. 501, pp. 78-84. (In Russ.)]
  2. Ужвиюк С.В., Храмцов П.В., Раев М.Б., Тимганова В.П., Бочкова М.С., Хазиахматова О.Г., Малащенко В.В., Литвинова Л.С., Заморина С.А. Взаимодействие наночастиц оксида графена с мононуклеарными клетками человека в системе Cell-IQ // Клеточные технологии в биологии и медицине, 2023. № 1. [Uzhviyuk S.V., Khramtsov P.V., Rayev M.B., Timganova V.P., Bochkova M.S., Khaziakhmatova O.G., Malashchenko V.V., Litvinova L.S., Zamorina S.A. Graphene oxide nanoparticles interaction with human mononuclear cells in Cell-IQ system. Kletochnye tekhnologii v biologii i meditsine = Cellular Technologies in Biology and Medicine, 2023, Vol. 1. (In Russ.)]
  3. Храмцов П.В., Раев М.Б., Тимганова В.П., Бочкова М.С., Заморина С.А. Взаимодействие наночастиц оксида графена с клетками иммунной системы // Гены и клетки, 2020. Т. 15, № 3. C. 29-38. [Khramtsov P.V., Rayev M.B., Timganova V.P., Bochkova M.S., Zamorina S.A. Interaction of graphene oxide nanoparticles with cells of the immune system. Geny i kletki = Genes and Cells, 2020, Vol. 15, pp. 29-38. (In Russ.)]
  4. Cai X., Tan S., Yu A., Zhang J., Liu J., Mai W., Jiang Z. Sodium 1-naphthalenesulfonate-functionalized reduced graphene oxide stabilizes silver nanoparticles with lower cytotoxicity and long-term antibacterial activity. Chem. Asian J., 2012, Vol. 7, no. 7, pp. 1664-1670.
  5. Ding Z., Zhang Z., Ma H., Chen Y. In vitro hemocompatibility and toxic mechanism of graphene oxide on human peripheral blood T lymphocytes and serum albumin. ACS Appl. Mater. Interfaces, 2014, Vol. 6, no. 22, pp. 19797-19807.
  6. Hong B.J., Compton O.C., An Z., Eryazici I., Nguyen S.T. Successful Stabilization of Graphene Oxide in Electrolyte Solutions: Enhancement of biofunctionalization and cellular uptake. ACS Nano, 2012, Vol. 6, no. 1, pp. 63-73.
  7. Khramtsov P., Bochkova M., Timganova V., Nechaev A., Uzhviyuk S., Shardina K., Maslennikova I., Rayev M., Zamorina S. Interaction of graphene oxide modified with linear and branched PEG with monocytes isolated from human blood. Nanomaterials, 2022, Vol. 12, no. 1, 126. doi: 10.3390/nano12010126.
  8. Kiew S.F., Kiew L.V., Lee H.B., Imae T., Chung L.Y. Assessing biocompatibility of graphene oxide-based nanocarriers: A review. J. Control. Release, 2016, Vol. 226, pp. 217-228.
  9. Lenardo M., Chan K.M., Hornung F., McFarland H., Siegel R., Wang J., Zheng L. Mature T lymphocyte apoptosis – immune regulation in a dynamic and unpredictable antigenic environment. Annu Rev. Immunol., 1999, Vol. 17, pp. 221-253.
  10. Liao C., Li Y., Tjong S.C. Graphene nanomaterials: synthesis, biocompatibility, and cytotoxicity. Int. J. Mol. Sci., 2018, Vol. 19, no. 11, 3564. doi: 10.3390/ijms19113564.
  11. Ou L., Lin S., Song B., Liu J., Lai R., Shao L. The mechanisms of graphene-based materials-induced programmed cell death: a review of apoptosis, autophagy, and programmed necrosis. Int. J. Nanomedicine, 2017, Vol. 12, pp. 6633-6646.
  12. Rhazouani A., Gamrani H., El Achaby M., Aziz K., Gebrati L., Uddin M.S., Aziz F. Synthesis and toxicity of graphene oxide nanoparticles: a literature review of in vitro and in vivo studies. Biomed Res Int., 2021, Vol. 2021, 5518999. doi: 10.1155/2021/5518999.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рисунок 1. Влияние оксида графена на жизнеспособность T-лимфоцитов из крови здоровых доноров и клеток линии Jurkat

Скачать (189KB)
3. Рисунок 2. Влияние оксида графена на ранний и поздний апоптоз Т-лимфоцитов и клеток линии Jurkat

Скачать (386KB)

© Усанина Д.И., Ужвиюк С.В., Заморина С.А., 2023

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах