Влияние кисспептина на субпопуляционный состав регуляторных клеток (Th17, Treg, iNKT) тимуса in vitro
- Авторы: Орлова Е.Г.1, Логинова О.А.1, Горбунова О.Л.1, Ширшев С.В.1
-
Учреждения:
- ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»
- Выпуск: Том 27, № 4 (2024)
- Страницы: 1077-1084
- Раздел: КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
- URL: https://journals.rcsi.science/1028-7221/article/view/267931
- DOI: https://doi.org/10.46235/1028-7221-16681-TKE
- ID: 267931
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Пептидный гормон кисспептин, продуцируемый нейронами передней зоны гипоталамуса, является ключевым регулятором становления гонадостата и репродуктивной функции и обладает иммунорегуляторной активностью. При беременности кисспептин активно продуцируется плацентой, присутствует в периферической крови и оказывает влияние на клетки иммунной системы, которые экспрессируют специфические рецепторы к гормону, в том числе на клетки тимуса. Однако эффекты гормона на тимопоэз в аспекте беременности не изучены. Поэтому цель работы – изучить влияние киcспептина в концентрации, характерной для беременности, на субпопуляционный состав регуляторных клеток тимуса in vitro. Тимоциты культивировали 72 ч с кисспептином в концентрации (9,6 пМ), характеризующей его максимальный уровень в периферической крови при беременности, в присутствии CD3/CD28-активирующих частиц и далее оценивали субпопуляционный состав регуляторных клеток, экспрессию в них Ki-67, Bcl-2 методом проточной цитометрии. Оценивали процентное содержание Т-регуляторных лимфоцитов (Treg), как процент CD4+CD25+FoxP3+ клеток; T-хелперов, продуцирующих интерлейкин-17 (Th17), как процент CD4+IL-17A+RORγt+ клеток; инвариантных Т-лимфоцитов с функциями натуральных киллеров (iNKT), как процент CD3hiVa24Ja18+ клеток в культуре тимоцитов. В ряд проб для индукции апоптоза вносили дексаметазон (10-6М). Отдельно оценивали влияние примированных кисспептином плазмацитоидных дендритных клеток (пДК) тимуса на субпопуляционный состав регуляторных клеток (Th17, Treg, iNKT) в культуре тимоцитов. Для этого выделенные методом иммуномагнитной сепарации пДК тимуса культивировали сутки с кисспептином, а далее добавляли в культуру интактные аутологичные тимоциты в соотношении 1:10 и культивировали еще 72 ч. Установлено, что инкубация тимоцитов с кисспептином не влияла на процентное содержание Treg, iNKT и Th17 в культуре in vitro, а также экспрессию Ki-67 и Bcl-2 в этих клетках. В условиях индукции апоптоза дексаметазоном выявлено увеличение процента Bcl-2+Th17-клеток под влиянием кисспептина. При инкубации тимоцитов с примированными кисспептином пДК выявлено увеличение процентного содержания Th17 в культуре тимоцитов, тогда как количество Treg и iNKT не изменялось. Можно заключить, что кисспептин регулирует процентное содержание Th17 в культуре тимоцитов in vitro, опосредуя свои эффекты влиянием на пДК тимуса. А действуя непосредственно на тимоциты, увеличивает устойчивость тимических Th17 к дексаметазон-индуцированному апоптозу. В целом, полученные результаты расширяют наши представления о гормональной регуляции механизмов, контролирующих соотношение регуляторных клеток при беременности.
Ключевые слова
Полный текст
Открыть статью на сайте журналаОб авторах
Е. Г. Орлова
ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»
Автор, ответственный за переписку.
Email: orlova_katy@mail.ru
д.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории иммунорегуляции, Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук
Россия, 614081, г. Пермь, ул. Голева, 13О. А. Логинова
ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»
Email: orlova_katy@mail.ru
к.б.н., младший научный сотрудник лаборатории иммунорегуляции, Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук
Россия, 614081, г. Пермь, ул. Голева, 13О. Л. Горбунова
ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»
Email: orlova_katy@mail.ru
к.б.н., научный сотрудник лаборатории иммунорегуляции, Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук
Россия, 614081, г. Пермь, ул. Голева, 13С. В. Ширшев
ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»
Email: shirshev@iegm.ru
д.м.н., профессор, заслуженный деятель науки РФ, заведующий лабораторией иммунорегуляции, Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук
Россия, 614081, г. Пермь, ул. Голева, 13Список литературы
- Горбунова О.Л., Ширшев С.В. Роль кисспептина в формировании иммунологической толерантности при беременности // Доклады АН, 2014. Т. 457, № 4. С. 494-497. [Gorbunova O.L., Shirshev S.V. The role of kisspeptin in immune tolerance formation during pregnancy. Doklady akademii nauk = Reports of the Academy of Sciences, 2014, Vol. 457, no. 1, pp. 494-497. (In Russ.)]
- Ширшев С.В., Орлова Е.Г., Логинова О.А., Некрасова И.В., Горбунова О.Л., Масленникова И.Л. Гормональная регуляция дифференцировки дендритных клеток тимуса // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2018. Т. 165, № 2. С. 193-197. [Shirshev S.V., Orlova E.G., Loginova O.A., Nekrasova I.V., Gorbunova O.L., Maslennikova I.L. Hormonal Regulation of Dendritic Cell Differentiation in the Thymus. Byulleten eksperimentalnoy biologii i meditsiny = Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2018, Vol. 165, no. 2, pp. 193-197. (In Russ.)]
- Dhillo W.S., Murphy K.G., Bloom S.R. The neuroendocrine physiology of kisspeptin in the human. Rev. Endocr. Metab. Disord., 2007, Vol. 8, no. 1, pp. 41-46.
- Evans V.A., Lal L., Akkina R., Solomon A., Wright E., Lewin S.R., Cameron P.U. Thymic plasmacytoid dendritic cells are susceptible to productive HIV-1 infection and efficiently transfer R5 HIV-1 to thymocytes in vitro. Retrovirology, 2011, Vol. 8, 43. doi: 10.1186/1742-4690-8-43.
- Hellberg S., Mehta R.B., Forsberg A. et al. Maintained thymic output of conventional and regulatory T cells during human pregnancy. J. Allergy Clin. Immunol., 2019, Vol. 143, no. 2, pp. 771-775.e7.
- Horikoshi Y., Matsumoto H., Takatsu Y., Ohtaki T., Kitada C., Usuki S., Fujino M. Dramatic elevation of plasma metastin concentrations in human pregnancy: metastin as a novel placenta-derived hormone in humans. J. Clin. Endocrinol. Metab., 2003, Vol. 88, no. 2, pp. 914-919.
- Khalaf W.S., Mahmoud M.R.A, Elkhatib W.F., Hashem H.R., Soliman W.E. Phenotypic characterization of NKT-like cells and evaluation of specifically related cytokines for the prediction of unexplained recurrent miscarriage. Heliyon, 2021, Vol. 7, no. 11, e08409. doi: 10.1016/j.heliyon.2021.e08409.
- Ohtaki T., Shintani Y., Honda S., Matsumoto H., Hori A., Kanehashi K., Terao Y., Kumano S., Takatsu Y., Masuda Y., Ishibashi Y., Watanabe T., Asada M., Yamada T., Suenaga M., Kitada C., Usuki S., Kurokawa T., Onda H., Nishimura O., Fujino M. Metastasis suppressor gene KiSS-1 encodes peptide ligand of a G-protein-coupled receptor. Nature, 2001, Vol. 411, no. 6837, pp. 613-617.
- Orlova E., Loginova O., Shirshev S. Leptin regulates thymic plasmacytoid dendritic cell ability to influence the thymocyte distribution in vitro. Int. Immunopharmacol., 2023, Vol. 117, 109912. doi: 10.1016/j.intimp.2023.109912.
- Saito S., Nakashima A., Shima T., Ito M. Th1/Th2/Th17 and regulatory T-cell paradigm in pregnancy. Am. J. Reprod. Immunol., 2010, Vol. 63, no. 6, pp. 601-610.
- Stoeckle C., Rota I.A., Tolosa E., Haller C., Melms A., Adamopoulou E. Isolation of myeloid dendritic cells and epithelial cells from human thymus. J. Vis. Exp., 2013, Vol. 79, e50951. doi: 10.3791/50951.
- Wagner M.I., Mai C., Schmitt E., Mahnke K., Meuer S., Eckstein V., Ho A.D., Schaier M., Zeier M., Spratte J., Fluhr H., Steinborn A. The role of recent thymic emigrant-regulatory T-cell (RTE-Treg) differentiation during pregnancy. Immunol. Cell Biol., 2015, Vol. 93, no. 10, pp. 858-867.
- Xing R., Liu F., Yang Y., Cui X., Wang T., Xie L., Zhao Y., Fang L., Yi T., Zheng B., Liu M., Chen H. GPR54 deficiency reduces the Treg population and aggravates experimental autoimmune encephalomyelitis in mice. Sci. China Life Sci., 2018, Vol. 61, no. 6, pp. 675-687.
Дополнительные файлы
