Метгемоглобинредуктазная активность ядерных эритроцитов морского ерша (Scorpaena porcus, Linnaeus, 1758) в норме и в условиях окислительных нагрузок (эксперименты in vitro)

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

На примере Scorpaena porcus (Linnaeus, 1758) предложена методика оценки метгемоглобинредуктазной активности ядерных эритроцитов костистых рыб. В условиях эксперимента in vitro эритроцитарную взвесь данного вида взвешивали в растворах с различной концентрацией NaNO2, после отмывки от данного соединения изучали процесс восстановления метгемоглобина (MetHb) на протяжении 150 мин. О функциональном состоянии гемоглобина судили по результатам спектрального анализа. Изучение кинетики восстановления MetHb показало, что зависимость хорошо описывалась уравнением экспоненциальной функции при коэффициенте детерминации (R2) более 0.9. Характер зависимости сохранялся при различных уровнях окислительной нагрузки. Это позволило рассчитать константу скорости первого порядка k (25 оС). У данного вида она составила 5.75–6.45 (10–3) мин–1. Установлено, что MetHb-редуктазная активность ядерных эритроцитов морского ерша повышалась при увеличении окислительной нагрузки. При концентрации NaNO2 6.0 mM она составляла 1.73 ± 0.21 µM MetHb мин-1 г-1 Hb.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

А. А. Солдатов

Федеральный исследовательский центр «Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского РАН»; Севастопольский государственный университет

Автор, ответственный за переписку.
Email: alekssoldatov@yandex.ru
Россия, проспект Нахимова, 2, Севастополь, 299011; ул. Университетская, 33, Севастополь, 299053

Н. Е. Шалагина

Федеральный исследовательский центр «Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского РАН»

Email: alekssoldatov@yandex.ru
Россия, проспект Нахимова, 2, Севастополь, 299011

В. Н. Рычкова

Федеральный исследовательский центр «Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского РАН»

Email: alekssoldatov@yandex.ru
Россия, проспект Нахимова, 2, Севастополь, 299011

Т. А. Кухарева

Федеральный исследовательский центр «Институт биологии южных морей им. А.О. Ковалевского РАН»

Email: alekssoldatov@yandex.ru
Россия, проспект Нахимова, 2, Севастополь, 299011

Список литературы

  1. Andreyeva A. Y., Soldatov A. A., Mukhanov V. S. The influence of acute hypoxia on the functional and morphological state of the black scorpionfish red blood cells // In Vitro Cellular & Developmental Biology – Animal. 2017. V. 53. P. 312–319. doi: 10.1007/s11626-016-0111-4
  2. Benesch R. E., Benesch R., Yung S. Equations for the spectrophotometric analysis of hemoglobin mixtures // Anal. Biochem. 1973. V. 55. P. 245–248. doi: 10.1016/0003-2697(73)90309-6
  3. Blair B., Barlow C., Martin E., Schumaker R., McIntyre J. Methemoglobin determination by multi-component analysis in coho salmon (Oncorhynchus kisutch) possessing unstable hemoglobin // Methods. 2020. V. 7. № 100836. doi.org/10.1016/j.mex.2020.100836
  4. Gam L. T. H., Jensen F. B., Damsgaard C., Huong D. T. T., Phuong N. T., Bayley M. Extreme nitrite tolerance in the clown knifefish Chitala ornate is linked to up-regulation of methaemoglobin reductase activity. Aquat. Toxicol. 2017. V. 187. P. 9–17. doi: 10.1016/j.aquatox.2017.03.013
  5. Gladwin M. T., Kim-Shapiro D. B. The functional nitrite reductase activity of the hemiglobins. Blood. 2008. V. 112. P. 2636–2647. doi: 10.1182/blood-2008-01-115261
  6. Graham M. S., Fletcher G. L. High concentrations of methemoglobin in five species of temperate marine teleosts // J. Exp. Zool. 1986. V. 239. P. 139–142. doi: 10.1002/jez.1402390117
  7. Jensen B., Fago A. A Novel Possible Role for Met Hemoglobin as Carrier of Hydrogen Sulfide in the Blood // Antioxidants & Redox Signaling. 2020. V. 32. № 4. P. 258–265. doi: 10.1089/ars.2019.7877
  8. Jensen F. B., Nielsen K. Methemoglobin reductase activity in intact fish red blood cells // Comp. Biochem. Physiol. Part A: Mol. & Integ. Physiol. 2018. V. 216. P. 14–19. doi.org/10.1016/j.cbpa.2017.11.004
  9. Maestre R., Pazos M., Medina I. Involvement of methemoglobin (MetHb) formation and hemin loss in the pro-oxidant activity of fish hemoglobins // J. Agric. Food Chem. 2009. V. 57. P. 7013–21. doi: 10.1021/jf9006664
  10. Mansouri A., Lurie A. A. Concise review: methemoglobinemia. Am. J. Hematol. 1993. V. 42. P. 7–12. doi: 10.1002/ajh.2830420104
  11. Powell M. D., Perry S. F. Respiratory and acid-base pathophysiology of hydrogen peroxide in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) // Aquat. Toxicol. 1997. V. 37. P. 99–112. doi.org/10.1016/S0166-445X(96)00826-0
  12. Power G. G., Bragg S. L., Oshiro B. T., Dejam A., Hunter C. J., Blood A. B. A novel method of measuring reduction of nitrite-induced methemoglobin applied to fetal and adult blood of humans and sheep // J. Appl. Physiol. 2007. V. 103. P. 1359–1365. doi: 10.1152/japplphysiol.00443.2007
  13. Sajiki J., Takahashi K. In Vitro Formation of Methemoglobin by Lipophilic Fractions in Fishes and the Causative Substance // Eisei-Kagaku. 1991. V. 37. P. 467–472. doi: 10.1248/JHS1956.37.467
  14. Saleh M. C., McConkey S. NADH-dependent cytochrome b5 reductase and NADPH methemoglobin reductase activity in the erythrocytes of Oncorhynchus mykiss // Fish Physiol. Biochem. 2012. V. 38. P. 1807–1813. doi: 10.1007/s10695-012-9677-2
  15. Schechter A. N. Hemoglobin research and the origins of molecular medicine // Blood. 2008. V. 112. P. 3927–3938. doi: 10.1182/blood-2008-04-078188
  16. Soldatov A. A. Physiological Aspects of Effects of Urethane Anesthesia on the Organism of Marine Fishes // Hydrobiol. J. 2005. V. 41. P. 113–126. doi: 10.1615/HydrobJ.v41.i1.130
  17. Soldatov A. A. Cases of a Spontaneous Increase in Methemoglobin Concentration in Fish Blood during the Annual Cycle // Inland Water Biology. 2023. V. 16. P. 769–775. doi.org/10.1134/S1995082923040181
  18. Sztiller M., Puchala M., Kowalczyk A. et al. The influence of ferrylhemoglobin and methemoglobin on the human erythrocyte membrane // Red. Rep. 2006. V. 11. P. 263–271. doi: 10.1179/135100006X155012
  19. Tiihonen K., Nikinmaa M. Short communication substrate utilization by carp (Cyprinus carpio) erythrocytes // J. Exp. Biol. 1991. V. 161. № 1. P. 509–514. doi: 10.1242/jeb.161.1.509
  20. Welbourn E. M., Wilson M. T., Yusof A. et al. The mechanism of formation, structure and physiological relevance of covalent hemoglobin attachment to the erythrocyte membrane // Free Rad. Biol. Med. 2017. V. 103. P. 95–106. doi.org/10.1016/j.freeradbiomed.2016.12.024
  21. Woo S. P.S., Liu W., Au D. W.T. et al. Antioxidant responses and lipid peroxidation in gills and erythrocytes of fish (Rhabdosarga sarba) upon exposure to Chattonella marina and hydrogen peroxide: Implications on the cause of fish kills // J. Exp. Mar. Biol. Ecol. 2006. V. 336. P. 230–241. doi: 10.1016/j.jembe.2006.05.013

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Спектральные характеристики гемолизатов морского ерша в норме и в условиях окислительной нагрузки (а – при 1.5 mM NaNO2; б – при 3.0 mM NaNO2; в – при 6.0 mM NaNO2; зеленый спектр – до внесения NaNO2; красный спектр – сразу после внесения NaNO2; синий спектр – спустя 150 мин после отмывки от NaNO2)

Скачать (29KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Пример кинетической кривой восстановления MetHb после устранения окислительной нагрузки (NaNO2) (а – обычная шкала, б – логарифмическая шкала)

Скачать (22KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Кинетические характеристики процесса восстановление MetHb после устранения окислительной нагрузки разной интенсивности (1 – при 1.5 mM NaNO2; 2 – при 3.0 mM NaNO2; 3 – при 6.0 mM NaNO2)

Скачать (23KB)
Метаданные
5. Рис. 4. Константа скорости реакции (k) первого порядка (1 – при 1.5 mM NaNO2; 2 – при 3.0 mM NaNO2; 3 – при 6.0 mM NaNO2)

Скачать (12KB)
Метаданные
6. Рис. 5. MetHb-редуктазная активность ядерных эритроцитов морского ерша при окислительной нагрузке разной интенсивности (1 – при 1.5 mM NaNO2; 2 – при 3.0 mM NaNO2; 3 – при 6.0 mM NaNO2)

Скачать (16KB)
Метаданные

© Российская академия наук, 2025

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».