Production of Soluble Human Gamma Interferon in the  Escherichia coli  Expression System with a Decrease in Cultivation Temperature

E. A. Volosnikova; Волосникова Е. А.; T. I. Esina; Есина Т. И.; D. N. Shcherbakov; Щербаков Д. Н.; N. V. Volkova; Волкова Н. В.; Ya. S. Gogina; Гогина Я. С.; T. A. Tereshchenko; Терещенко Т. А.; E. D. Danilenko; Даниленко Е. Д.

doi:10.31857/S0555109923020174

Получение растворимого интерферона гамма человека в системе экспрессии Escherichia coli при снижении температуры культивирования

Авторы: Волосникова Е.А.¹, Есина Т.И.¹, Щербаков Д.Н.¹, Волкова Н.В.¹, Гогина Я.С.¹, Терещенко Т.А.¹, Даниленко Е.Д.¹
Учреждения:
1. Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии “Вектор” Роспотребнадзора
Выпуск: Том 59, № 2 (2023)
Страницы: 167-173
Раздел: Статьи
URL: https://journals.rcsi.science/0555-1099/article/view/138755
DOI: https://doi.org/10.31857/S0555109923020174
EDN: https://elibrary.ru/LVLPXU
ID: 138755

Цитировать

Полный текст

Аннотация
Об авторах
Список литературы
Дополнительные файлы
Статистика

Аннотация

Сконструирован рекомбинантный штамм–продуцент интерферона гамма человека (ИФН-γ) E. coli BL 21/pЕТ-IFN-γ, обеспечивающий высокий уровень его экспрессии. Разработан способ получения растворимой формы рекомбинантного ИФН-γ, включающий наработку биомассы штамма-продуцента, содержащего целевой белок в количестве 32–37% от общего содержания клеточных белков, из которых 15–17% в растворимой форме, выделение и очистку белка. Процесс выделения и очистки включал стадии дезинтеграции, осветление лизата клеток, хроматографической очистки и диализа. Разработанный способ позволил получить из 1 г влажной биомассы до 5 мг препарата с чистотой не менее 95% и высокой специфической (противовирусной) активностью.

Ключевые слова

рекомбинантный интерферон гамма человека, штамм-продуцент, культивирование, хроматография, специфическая активность

Список литературы

Pandey R., Prabhu A.A., Dasu V.V. // Separation Science and Technology. 2018. V. 53. № 3. P. 487–495. https://doi.org/10.1080/01496395.2017.1395463
Razaghi A., Owens L., Heimann K. // J. Biotechnol. 2016. V. 240. P. 48–60. https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2016.10.022
Khalilzadeh R., Shojaosadati S.A., Bahrami A., Maghsoudi N. // Biotechnology Letters. 2003. V. 25. № 23. P. 1989–1992. https://doi.org/10.1023/b:bile.0000004390.98648.25
Rosano G.L., Ceccarelli E.A. // Front. Microbiol. 2014. V. 5. P. 172. https://doi.org/10.3389/fmicb.2014.00172
Malhotra A. // Methods in Enzymol. 2009. V. 463. P. 239–258. https://doi.org/10.1016/S0076-6879(09)63016-0
Leibly D.J., Nguyen T.N., Kao L.T., Hewitt S.N., Barrett L.K., Van Voorhis W.C. // PlOS ONE. 2012. V. 7. №. 12. P. e52482. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0052482
Tileva M., Krachmarova E., Ivanov I., Maskos K., Nacheva G. // Protein Expr. Purif. 2016. V. 117. P. 26–34. https://doi.org/10.1016/j.pep.2015.09.022
Государственная фармакопея РФ XIV изд. Т.2. ОФС.1.7.2.0002.15 Биологические методы испытания препаратов интерферона с использованием культур клеток. С. 2740–2749. https://femb.ru/record/pharmacopea14
Хайруллин Р.Ф. Экспрессия рекомбинантных белков в E. coli: учебн. пособие. / Ред. Р.Ф. Хайруллин, Р.Г. Киямова, А.А. Ризванов. Казань: Изд-во Казанского ун-та, 2018. 142 с.
Закабунин А.И., Барановская Г.А., Пустошилова Н.М., Майстренко В.Ф., Гаврюченкова Л.П., Громова О.А. Способ получения рекомбинантного интерферона – гамма человека. Патент РФ. 1999. № 2132386.