Выявление высокопатогенных ортопоксвирусов (Poxviridae: Chordopoxvirinae: Orthopoxvirus) методом дот-иммуноанализа в условиях лаборатории с высоким уровнем биологической защиты

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Введение. Высокопатогенные для человека ортопоксвирусы (ОПВ) – вирусы натуральной оспы (VARV) и оспы обезьян (MPXV) – могут вызывать системные заболевания, характеризующиеся высокой контагиозностью и нередко приводящие к смерти. В предыдущих публикациях (https://doi.org/10.3390/v14112580) мы сообщали о разработке чувствительного, быстрого и простого в использовании иммунохимического теста, потенциально пригодного для применения в очаге инфекции и в условиях лаборатории с высоким уровнем биозащиты. Прототип диагностического набора был протестирован на непатогенных и малопатогенных для человека ОПВ и специфически выявлял их с чувствительностью в диапазоне от 103 до 104 БОЕ/мл.

Цель работы – оценка чувствительности разработанного иммунохимического теста при выявлении высокопатогенных для человека MPXV и VARV, а также применимости анализа в лаборатории с высоким уровнем биологической безопасности (BSL-4).

Материалы и методы. Методом одностадийного дот-иммуноанализа в условиях лаборатории с уровнем биобезопасности BSL4 оценивали эффективность выявления вирусов в криолизатах образцов культуры клеток CV-1, инфицированных VARV и MPXV.

Результаты. Показано, что одностадийный дот-анализ позволяет обнаруживать MPXV в концентрации 2,5 × 103 БОЕ/мл, а VARV в концентрации 1,0 × 104 БОЕ/мл. Отмечено, что пары дезинфектантов (перекись водорода или формальдегид), используемых для обработки изолирующего бокса, могут влиять на эффективность проявления результатов анализа.

Заключение. Одностадийный дот-иммуноанализ может быть выполнен в лаборатории BSL-4. При ограничении контакта проявляющей системы с парами формальдегида чувствительность теста при выявлении VARV и MPXV укладывается в ранее заявленный диапазон 103–104 БОЕ/мл.

Об авторах

Анна Васильевна Ерш

ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Email: ersh_av@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0002-9220-1250

канд. биол. наук, научный сотрудник

Россия, 630559, р.п. Кольцово, Новосибирская область

Александр Георгиевич Полтавченко

ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Email: poltav@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0003-2408-5611

д-р биол. наук, ведущий научный сотрудник

Россия, 630559, р.п. Кольцово, Новосибирская область

Никита Дмитриевич Ушкаленко

ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Email: ushkalenko_nd@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0002-2171-7444

аспирант, младший научный сотрудник

Россия, 630559, р.п. Кольцово, Новосибирская область

Павел Владимирович Филатов

ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Автор, ответственный за переписку.
Email: filatov_pv@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0001-7763-3808

канд. биол. наук, научный сотрудник

Россия, 630559, р.п. Кольцово, Новосибирская область

Ксения Александровна Титова

ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Email: titova_ka@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0001-8764-9408

канд. биол. наук, старший научный сотрудник

Россия, 630559, р.п. Кольцово, Новосибирская область

Дмитрий Александрович Одношевский

ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Email: odnoshevskiy_da@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0003-0616-7488

научный сотрудник

Россия, 630559, р.п. Кольцово, Новосибирская область

Александр Александрович Сергеев

ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Email: sergeev_ala@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0001-8355-5551

канд. мед. наук, заведующий отделом «Коллекция микроорганизмов»

Россия, 630559, р.п. Кольцово, Новосибирская область

Aртемий Александрович Сергеев

ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Email: sergeev_aa@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0002-3591-1571

д-р мед. наук, зам. генерального директора по научной и эпидемиологической работе

Россия, 630559, р.п. Кольцово, Новосибирская область

Список литературы

  1. Buller R.M.L. Poxviruses. In: Cohen J., Powderly W.G., Opal S.M., eds. Infectious Diseases. Volume 2. Elsevier; 2017: 1452–7.e1.
  2. Shchelkunova G.A., Shchelkunov S.N. Smallpox, monkeypox and other human orthopoxvirus infections. Viruses. 2022; 15(1): 103. https://doi.org/10.3390/v15010103
  3. Sklenovská N. Monkeypox virus. In: Malik Y.S., Singh R.K., Dhama K., eds. Livestock Diseases and Management. Springer; 2020: 39–68.
  4. Whitley R.J. Smallpox: a potential agent of bioterrorism. Antiviral. Res. 2003; 57(1-2): 7–12. https://doi.org/10.1016/s0166-3542(02)00195-x
  5. Wallin A., Luksiene Z., Zagminas K., Surkiene G. Public health and bioterrorism: renewed threat of anthrax and smallpox. Medicina (Kaunas). 2007; 43(4): 278–84.
  6. Harapan H., Ophinni Y., Megawati D., Frediansyah A., Mamada S.S., Salampe M., et al. Monkeypox: a comprehensive review. Viruses. 2022; 14(10): 2155. https://doi.org/10.3390/v14102155
  7. Shurtleff A.C., Garza N., Lackemeyer M., Carrion R. Jr., Griffiths A., Patterson J., et al. The impact of regulations, safety considerations and physical limitations on research progress at maximum biocontainment. Viruses. 2012; 4(12): 3932–51. https://doi.org/10.3390/v4123932
  8. Bohannon J.K., Janosko K., Holbrook M.R., Barr J., Pusl D., Bollinger L., et al. Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 3. Aerobiology. J. Vis. Exp. 2016; (116): 53602. https://doi.org/10.3791/53602
  9. Townsend M.B., MacNeil A., Reynolds M.G., Hughes C.M., Olson V.A., Damon I.K., et al. Evaluation of the Tetracore Orthopox BioThreat® antigen detection assay using laboratory grown orthopoxviruses and rash illness clinical specimens. J. Virol. Methods. 2013; 187(1): 37–42. https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2012.08.023
  10. Stern D., Olson V.A., Smith S.K., Pietraszczyk M., Miller L., Miethe P., et al. Rapid and sensitive point-of-care detection of Orthopoxviruses by ABICAP immunofiltration. Virol. J. 2016; 13(1): 207. https://doi.org/10.1186/s12985-016-0665-5
  11. Ushkalenko N., Ersh A., Sergeev A., Filatov P., Poltavchenko A. Evaluation of rapid dot-immunoassay for detection orthopoxviruses using laboratory-grown viruses and animal’s clinical specimens. Viruses. 2022; 14(11): 2580. https://doi.org/10.3390/v14112580

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Ерш А.В., Полтавченко А.Г., Ушкаленко Н.Д., Филатов П.В., Титова К.А., Одношевский Д.А., Сергеев А.А., Сергеев A.А., 2025

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».