Различные формы супероксиддисмутазы из корней проростков гороха различаются по чувствительности к cAMP и ионам кальция

Установлено, что циклический аденозин монофосфат (cAMP) и ионы кальция (Са²⁺) способны дозозависимо модулировать активность различных форм супероксиддисмутазы (СОД) в клетках корня проростков гороха сорта Рондо. Влияние cAMP на активность СОД исследовали на интактных проростках, инкубируя их корни в растворе жирорастворимого аналога cAMP н-дибутирил-cAMP, что приводило к повышению внутриклеточной концентрации cAMP, а общая активность СОД, измеряемая в супернатанте, полученном из гомогената корней, возрастала до 230%. Инкубация аналогичных корней в растворе ингибитора трансмембранной аденилатциклазы сурамина существенно снижала эндогенный уровень cAMP, а активность СОД уменьшалась до 40%. В работе проводили ингибиторный анализ СОД: в присутствии 3мМ KCN или 3мМ Н₂О₂ активность этого фермента уменьшалась на 40 или 50%. Инкубация проростков в растворе LaCl₃ приводила к снижению общей активности СОД до 73%, ингибиторы незначительно уменьшали активность фермента. Предварительная обработка проростов 1мМ EGTA снижала общую активность СОД до 68%, а ингибиторы фермента не оказывали никакого дополнительного эффекта. Влияние недостатка или избытка Са²⁺ на активность СОД изучали в гомогенате корней проростков гороха. 100 мМ EGTA снижал активность этого фермента до 81%, а ингибиторы СОД (Н₂О₂ и KCN) уменьшали ее активность до 65 и 51% соответственно. Добавление к гомогенату 500 нМ CaCl₂ незначительно повышало общую активность СОД, при этом KCN немного уменьшал активность фермента. Добавление 500 мкМ CaCl₂ не изменяло активность СОД, применение на этом фоне KCN снижало ее на 30%, а добавление Н₂О₂ не влияло на активность фермента. Сделан вывод о том, что cAMP оказывает косвенное влияние на активность СОД, тогда как ионы кальция, вероятно, воздействуют непосредственно на активный центр молекулы фермента; при этом каждая форма СОД отличается по чувствительности к кальцию.