Comparative Study of the Temperature Coefficient Q10 of Hibernating Ground Squirrels Urocitellus undulatus and Cooled Rats of Different Ages

Full Text

Сокращения: HR — частота сердечных сокращений; BPM –удары сердца в минуту; ECG – электрокардиограмма; i — момент, для которого производятся расчеты; V_Ox удельные скорости потребления кислорода; T_a — температура окружения; T_b — температура тела; T_h — температура сердца; Q10 — температурный коэффициент; Q10_HR — температурный коэффициент Q10, рассчитанный из зависимости HR от величины T_h; Q10_Ox — температурный коэффициент Q10, рассчитанный из зависимости V_Ox от величины T_b.

ВВЕДЕНИЕ

При снижении температуры тела (T_b), млекопитающие могут приобрести устойчивость к действию экстремальных факторов внешней среды, острым патологическим процессам или тяжелым травмам. Охлаждение тела на несколько градусов широко используется в медицине, но естественные гибернаторы являются рекордсменами по способности переносить снижение T_b до 0°С и ниже.

Охлаждение активирует терморегуляторные реакции, необходимые для минимизации потерь тепла, такие как периферическая вазоконстрикция и пилоэрекция, а также реакции продуцирования тепла в скелетных мышцах (дрожательный термогенез) и бурой жировой ткани (недрожательный или метаболический термогенез), тем самым предотвращая снижение T_b. [1, 2]. Если система терморегуляции не справляется со своей задачей, T_b у гомойотермных животных значительно падает, что приводит к их гибели вследствие остановки сердца [3].

Однако некоторые виды млекопитающих адаптировались к охлаждению тела благодаря способности впадать в состояние пониженной активности и обмена веществ, называемом торпором. Их T_b падает до значений, которые лишь на несколько градусов превышают температуру окружающей среды (T_a) [4, 5]. Понимание естественных механизмов адаптивной гипотермии и торпора у млекопитающих имеет большое значение для использования этих состояний не только в классической медицине [6–9], но также в космической медицине [10–12] и в медицине катастроф [13–15].

В последнее время достигнут значительный прогресс в разработке фармакологических и нефармакологических подходов, способных инициировать глубокую гипотермию или формирование торпороподобных состояний у животных, не способных к гибернации в естественных условиях [16–19]. Внедрение в медицину искусственно вызываемых состояний гипотермии и торпора способствует появлению новой концепции лечения тяжелых травм, острой гипоксии, восстановления после остановки сердца, инсультов или в целях реанимации [20–22]. Кроме того, подавление клеточного метаболизма при охлаждении обеспечивает безопасные подходы для долгосрочного хранения органов и тканей, используемых в клинической трансплантологии [23–26].

Для оценки реакции организма на изменение T_b используют удобный и наглядный критерий: температурный коэффициент Q10, определяемый как скорость физиологического процесса при определенной температуре по сравнению со скоростью при температуре на 10°С ниже или выше [27–29]. Согласно правилу Вант Гоффа — Аррениуса считается, что величина Q10 ~ 2 отражает естественное влияние температуры на химические реакции. В исследованиях температурной зависимости физиологических процессов, включая HR и V_Ox, проводимых на различных животных и людях, среднее значение Q10 обычно находится в пределах от 2 до 3 [30–33].

Однако было обнаружено, что в некоторых случаях, эта величина может существенно отклоняться от указанного значения, что свидетельствует об участии физиологических механизмов регуляции скорости метаболизма. Например, у животных возможны индивидуальные различия Q10 от 1 до 8, что может быть связано с большой вариабельностью HR и V_Ox [34, 35]. Кроме того, было показано, что Q10 может сильно варьировать в зависимости от T_b в момент тестирования. Так, при исследовании метаболизма, определяемого по скорости потребления кислорода мозгом собак при охлаждении, было обнаружено, что в интервале температур от 37°C до 27°C показатель Q10 составлял 2.23, а в интервале от 27°C до 14°C средний показатель Q10 увеличивался вдвое и достигал 4.53 [36]. Значительное увеличение Q10 до 9.5, определяемого по скорости потребления кислорода, наблюдалось также у сумчатых животных в конце отогрева после гибернации, особенно в пределах термонейтральной зоны, тогда как низкие значения Q10 (Q10 = 1.9) наблюдались ниже T_a = 20°C [37]. Большая вариабельность Q10 также наблюдалась при исследовании отдельных белков, например, при оценке тепловой активации проводимости одиночных ионных каналов рецептора капсаицина VR1, ответственных за болевые ощущения при повреждающем нагревании тканей. Так, при нагревании в диапазоне физиологически нейтральных Т_а, были зарегистрированы величины Q10 < 2, а при повреждающем нагревании наблюдалось увеличение до Q10 = 32 [38]. Значительное влияние температуры на Q10 наблюдалось также при анализе проводимости потенциал-зависимых ионных каналов Na⁺ и K⁺ нервов и мышц млекопитающих. Было обнаружено, что для альфа-субъединицы этого белка зависимость проводимости от величины приложенного потенциала характеризовалась Q10 = 2.2. Для бета-субъединицы была характерна Q10 = 14, что отражает неаррениусовское отклонение указанной величины, наблюдаемое при пониженных температурах [39].

Для анализа изменчивости Q10 при различных температурах был предложен метод сканирования значения Q10, который присваивает Q10 каждой фиксированной точке T_b. Использование этого подхода позволило получить необычайные изменения значения Q10. Так, в исследовании белка TRPA1, который является молекулярной основой способности ямочных органов змей воспринимать инфракрасное излучение, значение Q10, получаемое при измерении зависимости проводимости от температуры, могло достигать ~100 000, что может объяснить исключительно высокую термическую чувствительность ямочных органов гремучей змеи [27].

В представленной работе мы предлагаем простую модификацию стандартной формулы вычисления Q10, позволяющую проводить сравнительный анализ этой величины во всем диапазоне изменений T_b. Этот подход мы используем для вычислений Q10 для зависимости HR от температуры при выходе из спячки сусликов (Urocitellus undulatus) или при отогревании лабораторных крыс после контролируемого предварительного охлаждения. В исследование также были включены крысята, у которых механизмы терморегуляции не полностью сформированы, но которые способны выдерживать большую степень охлаждения тела, чем взрослые крысы.

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты на животных

Суслики. Работа выполнена на длиннохвостых сусликах Urocitellus undulatus, Pallas (прежнее название Spermophilus undulatus) обоего пола (n = 9, вес 590 ± 50 г). Животные были отловлены в конце августа в естественной среде обитания (долина реки Лены, Якутия) и доставлены в лабораторию. В активный период сусликов содержали в индивидуальных клетках, находящихся в специальном помещении с достаточным количеством зерна и овощей и с соблюдением естественного фотопериода. В начале ноября клетки с животными переносили в темное помещение, где они содержались при температуре Т_а от 0 °С до +2°С до окончания гибернационного периода. В это время питание не предоставлялось. Для мониторинга баутов в период спячки часть сусликов индивидуально размещали в находящиеся в холодильной камере деревянные ящики (20 × 20 × 25 см), в дно которых был установлен термистор (чувствительность, 0.2°C). Во время спячки температура гнезда находилась в пределах 1–2°С. Для провокации пробуждения животных извлекали из ящика в середине баута (5–6 сутки гипотермии) и переносили в помещение с температурой воздуха 20 ± 1°С. Пробуждение сусликов в среднем занимало 170–180 мин.

Крысы. Самцов крыс Wistar, (n = 5, вес 240 ± 20 г) охлаждали с использованием метода закрытого сосуда [40, 41]. Животных помещали в герметичную камеру, объемом 5 л и Т_а =7°С, где они находились в течение 3–4 ч. Камеры были оснащены газовыми датчиками O₂ и СО₂ (Vernier, США). В процессе потребления кислорода животными в камере создавались условия гипоксии/гиперкапнии. Измерения показали, что в результате дыхания, через 3 ч содержание кислорода в камере снижалось с 21% до 5%, а содержание углекислого газа повышалось с 0.03% до 2.5%. Эти изменения приводили к подавлению метаболизма и вызывали у животных состояние гипотермии до значений Т_b =14°С — 18°С. Для восстановления физиологически нормального T_b животных извлекали из камеры, помещали в клетку и доставляли в помещение с Т_а =20 ± 1°С, где в течение 3–4 ч (в среднем, в течение 210 мин) восстанавливалась нормотермия. Данная процедура оказывала мягкое воздействие на организм, и после окончания эксперимента у животных не наблюдалось видимых отклонений в поведении [42, 43].

Крысята. Крысят Wistar раннего постнатального периода (n = 6, возраст 7—8 дней, вес 20 ± 2 грамм) охлаждали методом закрытого сосуда. Крысят содержали в герметичной камере объемом 0.8 л при Т_а = 7°С в течение 2 ч в условиях нарастающей гипоксии/гиперкапнии [40, 41], регистрируемых газовыми датчиками O₂ и СО₂ (Vernier, США), что инициировало снижение Т_b до 7°С — 10°С. После извлечения из камеры и доставки в помещение с Т_а = 20 ± 1°С, у крысят приблизительно через 3 ч (в среднем, за 170 мин) восстанавливалась нормотермия.

Измерения

На сусликах, измерения физиологических параметров проводили в процессе отогрева после 5-6 дней гибернации. На взрослых или крысах соответствующие измерения проводили при отогреве после нескольких часов охлаждения. Датчики температуры вводили в прямую кишку на глубину 4 см у крыс и сусликов или на глубину 2 см у крысят. Дистальную часть датчика надежно закрепляли у основания хвоста мягким зажимом. У крыс и сусликов, Т_b регистрировали каждую минуту с помощью датчика RET-2, у крысят — RET-3. (Physitemp, США, точность ±0.1°С).

Удельную скорость потребления кислорода (V_Ox, мл/кг/ч) регистрировали с помощью системы метаболического мониторинга ММ-100 (CWE incorporated, США). Прибор позволял проводить несколько, обычно от 3 до 10 измерений, за время эксперимента.

Для измерения частоты сердечных сокращений, иглы из нержавеющей стали вводили подкожно в плечевые области правой и левой лап для записи ECG по стандартной схеме. Проблем для закрепления датчиков не было, так как суслики находились в состоянии торпора, а крысы и крысята в состоянии так называемого «холодового наркоза». При повышении температуры до контрольных значений, животные еще оставались в состоянии пониженной двигательной активности. И хотя ЭКГ становилась более зашумленной, считывание и последующий анализ частотs сердечных сокращений (HR) не составляло труда. Данные ECG передавались на компьютер, где каждую минуту автоматически оценивалась HR.

Вычисления

Температуру сердца вычисляли из данных изменений ректальной температуры. Известно, что при выходе сусликов из гибернации передняя часть тела, включая сердце, разогревается быстрее, чем задняя часть тела. Разница температур T_h и T_b у сусликов связана с характерной особенностью кровотока этих животных при выходе из гибернации, что не наблюдается у крыс при согревании после охлаждения. Поэтому стандартные измерения ректальной температуры (Т_b) у сусликов не отражают температуру сердца (Т_h) [44]. Однако, как нами было показано ранее [45], связь между ректальной и сердечной температурами, измеренными у сусликов при спровоцированном пробуждении, представляет собой сигмоидальную кривую:

$T_h=36.88{\left[1+e^{\frac{Tb-10.08}{3.5}}\right]}^{-1}$ (1)

Где: Т_h — температура сердца (°С); Т_b — ректальная температура (°С). Коэффициенты: 36.88 — максимальная температура, достигнутая при отогреве после гибернации; 10.08 — середина сигмовидной кривой; 3.5 — крутизна сигмоидальной кривой. Установлено, что применение этой формулы дает хорошее соответствие экспериментальным точкам: n = 96, R² = 0.977 [45].

В представленной работе, все данные T_h у сусликов были получены путем вычислений по формуле (1). В экспериментах на крысах мы считали, что T_b ≈T_h. Поэтому в коррекции не было необходимости [44].

Для расчета коэффициента Q10 на основе удельных скоростей потребления кислорода (Q10_Ox) мы использовали стандартную формулу [46, 27, 32]:

$Q_{10Ox}={\left(\frac{V_{Ox1}}{V_{Ox2}}\right)}^{\frac{10}{Th2-Th1}}$ (2)

Где V_Ox1 и V_Ox2 — удельные скорости потребления кислорода при температурах T_h1 и T_h2 соответственно.

Представленная формула (2) удобна для определения температурного коэффициента Q10_Ox, поскольку имеющееся оборудование позволяло провести всего 3—10 измерений кислорода, потребляемого за все время эксперимента. Однако, поскольку для расчета Q10_HR измерения HR и T_h проводились каждую минуту в течение нескольких часов, мы получили обширный массив данных. Это позволило нам провести множественные расчеты значения Q10_HR в течение всего периода отогревания животных. Поэтому, для определения значения Q10_HR при температуре, зарегистрированной в момент времени i, мы предлагаем следующую эмпирическую модификацию стандартной (2):

$Q{10}_{HR}={\left(\frac{H{R}_{\left(i+15\right)}}{H{R}_{\left(i-15\right)}}\right)}^{\frac{10}{Th\left(i+15\right)-Th\left(i-15\right)}}$ (3)

Где HR — частота сердечных сокращений через 15 измерений после (i+15) или до (i-15) контрольного момента (i) при температурах T_h(i+15) и T_h(i-15) соответственно. Расчеты по формуле (3) дают набор значений Q10_HR для всего периода измерений. При этом, сдвиг между соседними значениями i (и соответствующими величинами Q10_HR) составляет одну минуту, а интервал через ± 15 измерений соответствует получасовому периоду, при условии проведения ежеминутных измерений.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Вычисления Q10_HR

Эксперименты на сусликах. При расчете Q10_HR по формуле (3) мы протестировали разные интервалы для i и пришли к выводу, что получасовой интервал (i ± 15 измерений) является оптимальным. При меньших значениях полученные кривые выглядели очень зашумленными, а значительное увеличение интервала приводило к огрублению результатов. Поэтому мы отдали предпочтение получасовому интервалу для всех расчетов Q10_HR, представленных в данной работе. Измерение частоты сердечных сокращений и ректальной температуры (Т_b) у сусликов начинались с 0°С — 3°С (рис. 1a). Прогревание животных продолжалось около двух часов, что позволяло сделать многочисленные измерения и провести тщательный анализ динамики изменения коэффициента Q10_HR.

 

Рис. 1. Избранные примеры экспериментов, показывающие связь коэффициентов Q10 с изменением температурных и физиологических показателей, полученных при пробуждении сусликов. (а) — Изменение во времени полученных в эксперименте параметров T_h и HR, а также величин Q10_HR, вычисленных с использованием (3). Примечание: кривая Q10_HR короче кривых Т_h и HR, поскольку, в соответствии с (3), кривая Q10_HR не включает первые и последние 15 минут измерений. (b) — Изменение во времени полученных в эксперименте параметров T_b и V_Ox, а также величин Q10_Ox вычисленных с использованием (2)

 

При спровоцированном выходе сусликов из гибернации, в первые 40 мин после начала пробуждения, при Т_h ≤ 10°С, характерные значения Q10_HR были высокими и достигали ~ 35–50 единиц (рис. 1а и 2а). При дальнейшем повышении температуры, наблюдалось постепенное снижение Q10_HR. В середине измерений, на 40–90 мин, что соответствовало интервалу температур Т_h = 10°С – 35°С (рис. 1а), значения Q10_HR постепенно снижались до величин 1.1–1.2 (рис. 1а и 2а).

 

Рис. 2. Зависимость коэффициентов Q10 от температуры. Представлена зависимость Q10_HR от T_h , а также зависимость Q10_Ox от T_b Где: (а, a’) — спящие суслики, (b, b’) — взрослые крысы, (c, c’) –крысята. Значения представлены в форме Mean ± SEM, n = 5–10. Примечание: кривые a, b и c получены с использованием (3), тогда как кривые a’, b’ и c’ получены с использованием (2). Однофакторный тест ANOVA (программное обеспечение GraphPad Prism 8) показывает, что средние данные Q10_Ox сусликов (a’) зависели от температуры: **** P < 0.0001. Зависимость от температуры наблюдалась также при анализе выделенного диапазона температур 20℃ — 35℃, когда значения находились в диапазоне 0 ≤ Q10_Ox ≤ 1, *** p < 0.0005. У взрослых крыс и крысят (b’ и c’) величины Q10_Ox статистически не завесили от температуры: p < 0.05

 

Эксперименты на крысах. В наших экспериментах, охлаждение взрослых крыс до T_b ниже 16°С приводило к их гибели. В начале согревания, у крыс Q10_HR резко увеличивалось примерно с 2.0 до 11.0 единиц (рис. 2b). Максимальное значение Q10_HR наблюдалось при 18.5°С. Однако при дальнейшем повышении T_h до 35°С, наблюдалось постепенное снижение Q10_HR примерно до 1.7.

Крысята переносили охлаждение тела лучше, чем взрослые. Известно, что в естественных условиях в гнезде T_b крысят может опускаться до 25 °С при T_a = 13°С [47]. В наших экспериментах, крысята показали хорошую выживаемость при охлаждении тела до 10°С. Установлено, что в начале согревания, при T_h ~ 10°С, величина Q10_HR достигала 50 единиц (рис. 2c), но постепенно снижалась при повышении температуры до T_h = 27°С. Дальнейший рост T_h у крысят был очень медленным, а полное восстановление T_h длилось примерно 3 ч и выходило за временные рамки наших экспериментов. Следует также отметить, что в норме, средний показатель T_b у крысят был значительно ниже, чем у взрослых крыс, и не превышал 33°С [48].

Вычисления Q10_Ox

У сусликов, при выходе из гибернации, кривая роста T_h имела S-образную форму (рис. 1b). Аналогичным образом, увеличивалась также V_Ox в первые 90 мин, в течение которых температура сердца достигала комнатной температуры (T_h = T_a = 20°С). В этот период происходило постепенное уменьшение Q10_Ox от 5 — 7 до 1 (рис. 1b и 2a’). При дальнейшем росте температуры (T_h > T_a) величина V_Ox парадоксальным образом уменьшалась (рис. 1b), что можно охарактеризовать как инверсию температурной зависимости: уменьшение потребления кислорода с увеличением T_b. Вследствие инверсии, при температуре T_b выше 20°С уровень Q10_Ox опускался ниже 1.0 (рис. 2 a’).

В отличие от сусликов, при согревании взрослых крыс и крысят, коэффициент Q10_Ox не зависел от температуры и был постоянным во всем изученном диапазоне T_b. Так, у взрослых крыс Q10_Ox находился в пределах 2.0–2.1 (рис. 2b’) в том же диапазоне температур (20°С — 32°С), в котором у сусликов наблюдалось снижение Q10_Ox до значений 1.0 — 0.0. У крысят Q10_Ox был близок к 1.2 во всем наблюдаемом диапазоне 8°С — 35°С (рис. 2c’).

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

В представленной работе мы провели сравнительное исследование изменения температурного коэффициента Q10 для двух физиологических параметров при выходе из гибернации у сусликов, являющихся природными гибернаторами, а также при отогревании предварительно охлажденных взрослых крыс и крысят, которые не способны к гибернации в естественных условиях. Для вычисления величины Q10_Ox по формуле (2) мы измеряли объем потребляемого животными кислорода (V_ox), а для вычисления величины Q10_HR по формуле (3)мы измеряли частоту сердечных сокращений (HR).

Необходимо отметить, что суслики, находящиеся в состоянии торпора, могут снижать температуру тела до околонулевых значений и находиться в этом состоянии в течение многих дней, тогда как лабораторные крысы погибают при охлаждении T_b < 16°С. Поскольку диапазон изменения T_b при согревании у сусликов был значительно больше, чем у крыс, стало возможным более детальное исследование влияния температуры на исследуемые параметры. В наших экспериментах были использованы также крысята раннего постнатального периода, что позволило расширить возможности исследования этих животных, поскольку крысята способны выдерживать более интенсивное охлаждение, чем взрослые крысы, вплоть до 10°С [49].

В наших экспериментах на сусликах было использовано спровоцированное пробуждение за счет повышения внешней температуры. Таким образом, способ отогревания был единым для всех животных, поскольку в экспериментах на предварительно охлажденных взрослых крысах и крысятах, перемещение животных в теплое помещение для отогрева было строго необходимо.

В представленном исследовании мы использовали стандартная формула (2) для расчета Q10_Ox и эмпирически модифицированная формула (3) для общего анализа Q10_HR во всем диапазоне изменений T_b. Использование модифицированной формулы было связано с тем, что стандартная формула позволяет вычислять величину Q10 только для одной, произвольно выбранной точки, что следует из формулы. При этом, температурный диапазон для вычислений также берется произвольно. При таком подходе невозможно получить объективную картину изменений этого параметра во всем диапазоне исследуемых температур. Применение модифицированной формулы для расчета Q10_HR было оправданным, поскольку мы ежеминутно регистрировали частоту сердечных сокращений во время отогрева животных, продолжавшегося несколько часов, что позволяло получить большой массив данных. Напротив, в измерениях потребления кислорода, имеющееся у нас оборудование позволяло провести в ходе эксперимента лишь несколько измерений, что делало целесообразным использование стандартной формулы для расчета Q10_Ox. Эксперименты на сусликах показали, что в начальный период повышения температуры после гибернации наблюдались неожиданно высокие значения Q10_Ox (рис. 1а, 2а’) и Q10_HR (рис. 1b и 2а). У крысят аналогичное увеличение в ранние моменты согревания выявлено также в расчетах Q10_HR (рис. 2с), но не Q10_Ox (рис. 2c’).

Известно, что выход из гибернации происходит под контролем симпатоадреналовой системы, что способствует увеличению частоты сердечных сокращений, кровотока и артериального давления. Эти изменения наиболее выражены на начальных этапах согревания тела [50]. Как недавно было показано, активация симпатической и депрессия парасимпатической нервной системы участвуют в повышении частоты сердечных сокращений во время пробуждения [51, 52, 52]. В начальный период выхода из гибернации животным необходимо удовлетворить возросшие энергетические потребности. Поэтому, активируется сердечно-сосудистая система и HR увеличивается [53, 33]. Повышение метаболической активности необходимо для энергетического обеспечения организма при согревании за счет различных физиологических процессов, таких как дрожательный и недрожательный термогенез [54, 55].

Повышенный уровень Q10_Ox и Q10_HR (рис. 2 a-c, c’) может быть связан с ускорением метаболизма и HR на фоне малых изменений T_b, наблюдающихся в начале отогрева, и может указывать на физиологическую регуляцию метаболических процессов, направленную на скорейшее повышение температуры тела за счет активации теплопродукции. Упомянутые высокие значения Q10, наблюдающиеся в начале отогрева, могут служить адаптивным механизмом, облегчающим выход из гипотермии у гибернирующих сусликов и у охлажденных крысят. Этот процесс существенно менее выражен у неадаптированных к гипотермии и неспособных гетеротермии взрослых крыс.

Можно предположить, что у крысят раннего постнатального периода проявляется способность к гетеротермии, учитывая отмеченную выше лучшую выживаемость крысят при охлаждении по сравнению со взрослыми крысами, а также повышенный уровень Q10_HR в ранний период отогрева крысят и гибернирующих сусликов. Это согласуется с высказанным ранее предположением, что у крысят нормальная температура Т_b = 33°С (что на 4°С ниже нормальной Т_b у взрослых животных) необходима для защиты их ЦНС от аноксии [48]

Известно, что виды, способные к гетеротермии, широко распространены в большинстве групп млекопитающих [31]. Следует упомянуть, что суслики и крысы близко родственны, поскольку относятся к отряду Rodentia. Однако, способность к гетеротермии или её отсутствие может наблюдаться даже у систематически близких видов. Например, было известно, что мыши при определенных условиях способны к гетеротермии, тогда как у взрослых крыс ее не наблюдалось [56]. Однако, недавно было обнаружено, что дикая австралийская кустарниковая крыса Rattus fuscipes также обладает рудиментарными способностями к гетеротермии [57].

ВЫВОДЫ

В большинстве публикаций приводятся примеры усредненных данных о значении температурного коэффициента Q10 при исследовании температурной зависимости биологических процессов, как у гибернирующих, так и у негибернирующих гомойотермных организмов. При использовании этого подхода моменты, когда изменения T_b были небольшими или нестабильными, например, на начальном или конечном этапах охлаждения или согревания, часто игнорировались как нерепрезентативные.

Основываясь на экспериментальных данных, полученных на животных разных видов и возрастов, мы предлагаем подход к полному определению Q10 во всем диапазоне изменений T_b, который позволяет нам анализировать эти “неудобные” области, где мы обнаружили необычно высокие или низкие коэффициенты Q10 по сравнению с теми, которые предсказываются теорией Вант Гоффа — Аррениуса. Такие значения не характерны для большинства химических процессов в неживой материи и могут рассматриваться как результат регуляции физиологических процессов у живых организмов.

ВКЛАД АВТОРОВ

Идея работы и планирование эксперимента (Н.М.З.), сбор данных (Н.М.З., М.О.Х.), обработка данных (Ю.С.Т.), написание и редактирование манускрипта (Ю.С.Т., Н.М.З.).

БЛАГОДАРНОСТИ

Благодарим д.ф.-м.н. Людмилу Владимировну Якушевич (ИБК РАН) за критический анализ статьи и полезные рекомендации по ее совершенствованию.

СОБЛЮДЕНИЕ ЭТИЧЕСКИХ СТАНДАРТОВ

Представленная работа выполнена в соответствии с Этическим кодексом Всемирной медицинской ассоциации (Хельсинкская декларация) Директива ЕС 2010/63/EU для экспериментов на животных. Протоколы экспериментов одобрены Комиссией по биоэтике ИБК РАН (Идентификаторы: № 4/092021 от 08.09.2021 г. и 05/092021 от 08.09.2021 г.).

ИСТОЧНИКИ ФИНАНСИРОВАНИЯ

Работа выполнена при поддержке Министерства науки и высшего образования Российской Федерации в рамках Государственного задания Институту биофизики клетки РАН, 075-00609-24-01 и Институту теоретической и экспериментальной биофизики РАН, 075-00224-24-01.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией данной статьи.

About the authors

N. M. Zakharova

Institute of Cell Biophysics of the Russian Academy of Sciences

Author for correspondence.
Email: n_m_zakharova@pbcras.ru
Russian Federation, Pushchino

Yu. S. Tarahovsky

Institute of Cell Biophysics of the Russian Academy of Sciences; Institute of Theoretical and Experimental Biophysics of the Russian Academy of Sciences

Email: tarahov@rambler.ru
Russian Federation, Pushchino; Pushchino

M. O. Khrenov

Institute of Cell Biophysics of the Russian Academy of Sciences

Email: n_m_zakharova@pbcras.ru
Russian Federation, Pushchino

References

Supplementary files