Production and evaluation of the clinical efficacy of the recombinant T. pallidum antigen Tp0453 for syphilis diagnosis


Cite item

Full Text

Abstract

Goal. Production of a recombinant T. pallidum antigen Tp0453 and the evaluation of the efficacy of its clinical use for syphilis diagnosis. Materials and methods. To produce the target recombinant T. pallidum antigen, a Tp0453 protein coding fragment of the DNA of the causative agent of syphilis, was cloned into the pET28а vector. Heterological expression of the recombinant T. pallidum antigen was performed in the E. coli BL21 (DE3) strain. The recombinant Tp0453 six-histidine-tagged protein was purified by the metal-chelate affinity chromatography. The resulting homogenous recombinant T. pallidum Tp0453 protein was used to reveal specific IgG antibodies in the serum of syphilis patients using a microarray technology. Results and conclusion. The use of the resulting recombinant protein enabled authors to reveal anti- T. pallidum antibodies in the blood serum of patients suffering from syphilis (primary, secondary, early and late latent syphilis). None of the uninfected controls had a significant reactivity to the recombinant Tp0453. These data allow to propose, that the recombinant protein Tp0453 show promise for laboratory diagnosis of syphilis. The introduction of Tp0453 antigen into the test systems for diagnosis of syphilis (ELISA, immunoblotting or microarray) increases the potential of serodiagnosis of this disease due to the broader range of the revealed antitreponemal antibodies.

About the authors

R F KHAIRULLIN

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology, Ministry of Healthcare of the Russian Federation

Email: khairullin@cnikvi.ru
к.х.н., старший научный сотрудник отдела лабораторной диагностики ИППП и дерматозов

A V RUNINA

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology, Ministry of Healthcare of the Russian Federation

лаборант-исследователь отдела лабораторной диагностики ИППП и дерматозов

K V ROG

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology, Ministry of Healthcare of the Russian Federation

младший научный сотрудник отдела лабораторной диагностики ИППП и дерматозов

N V FRIGO

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology, Ministry of Healthcare of the Russian Federation

д.м.н., заместитель директора по научно-образовательной работе

S V ROTANOV

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology, Ministry of Healthcare of the Russian Federation

д.м.н., доцент, врач Лабораторного центра

References

  1. Черешнев В.А., Патрушева Н.Б., Бейкин Я.Б. и др. Сифилис: Иммунитет и лабораторная диагностика. Екатеринбург: УрО РАН; 2006
  2. Соколовский Е., Фриго Н., Ротанов С. Руководство по лабораторной диагностике сифилиса в странах Восточной Европы. Вестн дерматол и венерол 2008; (1): 87—96
  3. Овчинников Н.М., Беднова В.Н., Делекторский В.В. Лабораторная диагностика заболеваний, передающихся половым путем. М: Медицина; 1987
  4. Китаева Н.В., Фриго Н.В., Мелехина Л.Е. Актуальные проблемы сифилидологии. Современные технологии диагностики сифилитической инфекции. Вестн дерматол и венерол 2008; (5): 51—59
  5. Китаева Н.В., Фриго Н.В., Ротанов С.В., Хайруллин Р.Ф. Перспективы диагностического использования протеомных технологий в диагностике ИПППизаболеваний кожи. Вестн дерматол и венерол 2010; (4): 17—27
  6. Sambri V., Marangoni A., Simone M. et al. Evaluation of recomWell Treponema, a novel recombinant antigen-based enzyme-linked immunosorbent assay for the diagnosis of syphilis. Clin Microbiol Infect 2001; 7: 200—205
  7. Хайруллин Р.Ф., Ротанов С.В., Фриго Н.В., Белоусова А.В. Биоинформатический анализ специфических антигенов T. pallidum. Вестн дерматол и венерол 2012; (5): 56—64
  8. Carlson J.A., Dabiri G., Cribier B., Sell S. The im-munopathobiology of syphilis: the manifestations and course of syphilis are determined by the level of delayed-type hypersensitivity. Am J Dermatopathol 2011; 33: 433—460
  9. Cox D.L., Luthra A., Dunham-Ems S. et al. Surface immunolabeling and consensus computational framework to identify candidate rare outer membrane proteins of Treponema pallidum. Infect Immun 2010; 78: 5178—5194.
  10. Luthra A., Zhu G., Desrosiers D.C. et al. The transition from closed to open conformation of Treponema pallidum outer membrane-associated lipoprotein Tp0453 involves membrane sensing and integration by two amphipathic helices. J Biol Chem 2011; 286: 41656—41668.
  11. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 1970; 227: 680—685.
  12. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem 1976; 72: 248—254.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML

Copyright (c) 2013 KHAIRULLIN R.F., RUNINA A.V., ROG K.V., FRIGO N.V., ROTANOV S.V.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных

 

Используя сайт https://journals.rcsi.science, я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных») даю согласие на обработку персональных данных на этом сайте (текст Согласия) и на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика» (текст Согласия).