Молекулярная диагностика ангиоиммунобластной Т-клеточной лимфомы


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель: определить показания и последовательность проведения молекулярных исследований при ангиоиммунобластной Т-клеточной лимфоме (АИТЛ) в различном биологическом материале. Материалы и методы. Молекулярные исследования проведены у 84 первичных больных АИТЛ. Медиана возраста составила 61 (29-81) год, соотношение мужчины/женщины - 48/36. Оценку T-клеточной и В-клеточной клональности проводили по реаранжировкам генов цепей T-клеточного рецептора и тяжелых цепей иммуноглобулинов. Для количественного определения клеток с мутацией G17V гена RHOA применяли полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в реальном времени с аллель - специфичными LNA модифицированными праймерами. Результаты. В биоптатах лимфатических узлов реаранжировки генов цепей Т-клеточных рецепторов определены у 76 (90,5%) из 84 больных и отсутствовали в 8 (9,5%) случаях. Выявление одинаковых клональных продуктов амплификации генов TCRG и TCRB в биоптате лимфатического узла и в образцах периферической крови и/или костного мозга свидетельствовало о лейкемизации опухолевого процесса и наблюдалось у 64,7% больных. Определение в образцах периферической крови и/или костного мозга клональных продуктов, отсутствующих в лимфатическом узле, обусловлено реактивной цитотоксической популяцией лимфоцитов и наблюдалось в 58,8% случаев АИТЛ. Одновременное выявление Т- и В-клеточной клональности в биоптате лимфатического узла отмечалось у 20 (24,7%) из 81 больного. Клетки с мутацией G17V гена RHOA выявлены в биоптатах лимфоузлов у 45 (54,9%) из 82 пациентов. Применение метода аллель - специфичной ПЦР с LNA модифицированными праймерами позволило выявить лейкемизацию опухолевого процесса у 100% и поражение костного мозга - у 93,9% пациентов с выявленной мутацией в лимфоузлах. Заключение. В результате выполненной работы определены показания и последовательность проведения молекулярных исследований при АИТЛ в различном биологическом материале. Количественная аллель - специфичная ПЦР с LNA модифицированными праймерами для определения мутации G17V гена RHOA обладает высокой чувствительностью, позволяет верифицировать лейкемизацию опухолевого процесса и проводить мониторинг минимальной резидуальной болезни во время терапии.

Об авторах

Наталья Геннадьевна Чернова

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России

Email: ngchernova@mail.ru
к.м.н., врач-гематолог отд-ния интенсивной высокодозной химиотерапии лимфом с круглосуточным и дневным стационаром ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, тел.: 8(495)612-48-10, 8(916)660-27-63; e-mail: ngchernova@mail.ru; ORCID: 0000-0002-0827-4052 Москва, Россия

Юлия Владимировна Сидорова

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России

к.м.н., с.н.с. лаб. молекулярной гематологии ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России; ORCID: 0000-0003-1936-0084 Москва, Россия

Светлана Юрьевна Смирнова

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России

н.с. лаб. молекулярной гематологии ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России; ORCID: 0000-0001-6220-8868 Москва, Россия

Наталья Валерьевна Рыжикова

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России

н.с. лаб. молекулярной гематологии ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России; ORCID: 0000-0003-2424-9524 Москва, Россия

Елена Евгеньевна Никулина

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России

н.с. лаб. молекулярной гематологии ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России; ORCID: 0000-0003-3914-8611 Москва, Россия

Алла Михайловна Ковригина

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России

д.б.н., проф., зав. патологоанатомическим отд-нием ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России; ORCID: 0000-0002-1082-8659 Москва, Россия

Марина Николаевна Синицына

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России

н.с. патологоанатомического отд-ния ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России; ORCID: 0000-0002-0750-8005 Москва, Россия

Андрей Борисович Судариков

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России

д.б.н., зав. лаб. молекулярной гематологии ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России; ORCID: 0000-0001-9463-9187 Москва, Россия

Список литературы

  1. Swerdlow S.H, Campo E, Harris N.L, Jaffe E.S, Pileri S.A, Stein H, Thiele J, Arber D.A, Hasserjian R.P, Le Beau M.M, Orazi A, Siebert R. WHO classification of tumors of haematopoietic and lymphoid tissues. Lyon: IARC, 2017:407-10.
  2. Frizzera G, Moran E.M, Rappaport H. Angioimmunoblastic lymphadenopathy with dysproteinaemia. Lancet. 1974;1:1070-3.
  3. Lukes R.J, Tindle B.H. Immunoblastic lymphadenopathy. A hyperimmune entity resembling Hodgkin's disease. N Engl J Med. 1975;292(1):1-8.
  4. Frizzera G, Moran E.M, Rappaport H. Angio - immunoblastic lymphadenopathy: diagnosis and clinical course. Am J Med.1975;59:803-18.
  5. Willenbrock K, Renné C, Gaulard P, Hansmann M.L. In angioimmunoblastic T-cell lymphoma, neoplastic T cells may be a minor cell population. A molecular single - cell and immunohistochemical study. Virchows Arch. 2005;446(1):15-20. doi: 10.1007/s00428-004-1114-1
  6. de Leval L, Gisselbrecht C, Gaulard P. Advances in the understanding and management of angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Br J Haematol. 2010;148(5):673-89. doi: 10.1111/j.1365-2141.2009.08003.x
  7. Weiss L.M, Jaffe E.S, Liu X.F, Chen Y.Y, Shibata D, Medeiros L.J. Detection and localization of Epstein-Barr viral genomes in angioimmunoblastic lymphadenopathy and angioimmunoblastic lymphadenopathy - like lymphoma. Blood. 1992;79:1789-95.
  8. Dogan A, Attygalle A.D, Kyriakou C. Angioimunoblastic T-cell lymphoma. Br J Haematol. 2003;121:681-91.
  9. Стефанов Д.Н., Ковригина А.М., Поддубная И.В. Новая концепция происхождения ангиоиммунобластной Т-клеточной лимфомы: от молекулярной биологии к терапии. Бюллетень СО РАМН. 2011;31(2):14-9.
  10. Dupuis J, Boye K, Martin N, Copie-Bergman C, Plonquet A, Fabiani B, Baglin A.C, Haioun C, Delfau-Larue M.H, Gaulard P. Expression of CXCL13 by neoplastic cells in angioimmunoblastic T-cell lymphoma (AITL). A new diagnostic marker providing evidence that AITL derives from follicular helper T-cells. Am J Surg Pathol. 2006;30:490-4.
  11. Lachenal F, Berger F, Ghesquières H, Biron P, Hot A, Callet-Bauchu E, Chassagne C, Coiffier B, Durieu I, Rousset H, Salles G. Angioimmunoblastic T-cell lymphoma: clinical and laboratory features at diagnosis in 77 patients. Medicine (Baltimore). 2007;86(5):282-92. doi: 10.1097/MD.0b013e3181573059
  12. Чернова Н.Г., Виноградова Ю.Е., Сидорова Ю.В., Капланская И.Б., Гилязитдинова Е.А., Горенкова Л.Г., Марьин Д.С., Кременецкая А.М., Воробьев А.И., Кравченко С.К. Длительные режимы цитостатической терапии ангиоиммунобластной Т-клеточной лимфомы. Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. 2014;7(1):57-62.
  13. Tan B.T, Warnke R.A, Arber D.A. The frequency of B- and T-cell gene rearrangements and Epstein-Barr virus in T-cell lymphomas: a comparison between angioimmunoblastic T-cell lymphoma and peripheral T-cell lymphoma, unspecified with and without associated B-cell proliferations. J Mol Diagn. 2006;8(4):466-75. doi: 10.2353/jmoldx.2006.060016
  14. Сидорова Ю.В., Никулина Е.Е., Чернова Н.Г., Горенкова Л.Г., Гилязитдинова Е.А., Кравченко С.К., Ковригина А.М., Судариков А.Б. Определение клональности методом ПЦР при ангиоиммунобластной Т-клеточной лимфоме. Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. 2014;7(2):192-6.
  15. Чернова Н.Г., Сидорова Ю.В., Захарько Е.И., Наумова Е.В., Рыжикова Н.В., Гальцева И.В., Двирнык В.Н., Смирнова С.Ю., Судариков А.Б., Кохно А.В., Моисеева Т.Н., Луговская С.А., Звонков Е.Е., Савченко В.Г. Проточная цитометрия и ПЦР-исследование Т-клеточной клональности в разграничении опухолевой и реактивной пролиферации больших гранулярных лимфоцитов. Гематология и трансфузиология. 2018;2:124-33. doi: 10.25837/HAT.2018.48.2.003
  16. Сидорова Ю.В., Никитин Е.А., Меликян А.Л., Пивник А.В., Судариков А.Б. Определение T-клеточной клональности при инфекционном мононуклеозе методом ПЦР-SSCP-TCRγ. Гематология и трансфузиология. 2004;49(6):1-7.
  17. Smirnova S.J, Sidorova J.V, Tsvetaeva N.V, Nikulina O.F, Biderman B.V, Nikulina E.E, Kulikov S.M, Sudarikov A.B. Expansion of CD8+ cells in autoimmune hemolytic anemia. Autoimmunity. 2016;49(3):147-54. doi: 10.3109/08916934.2016.1138219
  18. Sakata-Yanagimoto M, Enami T, Yoshida K, Shiraishi Y, Ishii R, Miyake Y, Muto H, Tsuyama N, Sato-Otsubo A, Okuno Y, Sakata S, Kamada Y, Nakamoto-Matsubara R, Tran N.B, Izutsu K, Sato Y, Ohta Y, Furuta J, Shimizu S, Komeno T, Sato Y, Ito T, Noguchi M, Noguchi E, Sanada M, Chiba K, Tanaka H, Suzukawa K, Nanmoku T, Hasegawa Y, Nureki O, Miyano S, Nakamura N, Takeuchi K, Ogawa S, Chiba S. Somatic RHOA mutation in angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Nat Genet. 2014;46(2):171-5. doi: 10.1038/ng.2872
  19. Nakamoto-Matsubara R, Sakata-Yanagimoto M, Enami T, Yoshida K, Yanagimoto S, Shiozawa Y, Nanmoku T, Satomi K, Muto H, Obara N, Kato T, Kurita N, Yokoyama Y, Izutsu K, Ota Y, Sanada M, Shimizu S, Komeno T, Sato Y, Ito T, Kitabayashi I, Takeuchi K, Nakamura N, Ogawa S, Chiba S. Detection of the G17V RHOA mutation in angioimmunoblastic T-cell lymphoma and related lymphomas using quantitative allele - specific PCR. PLoS One. 2014;9(10):e109714. doi: 10.1371/journal.pone.010 9714
  20. Kataoka K, Ogawa S. Variegated RHOA mutations in human cancers. Exp Hematol. 2016;44(12):1123-9. doi: 10.1016/j.exphem.2016.09.002
  21. Manso R, González-Rincón J, Rodríguez-Justo M, Roncador G, Gоmez S, Sánchez-Beato M, Piris M.A, Rodriguez-Pinilla S.M. Overlap at the molecular and immunohistochemical levels between angioimmunoblastic T-cell lymphoma and a subgroup of peripheral T-cell lymphomas without specific morphological features. Oncotarget. 2018;9(22):16124-33. doi: 10.18632/oncotarget.24592
  22. Dongen J.J, Langerak A.W, Bruggemann M, Evans P.A, Hummel M, Lavender F.L, Delabesse E, Davi F, Schuuring E, Garcia-Sanz R, Krieken J.H, Droese J, Gonzalez D, Bastard C, White H.E, Spaargaren M, Gonzalez M, Parreira A, Smith J.L, Morgan G.J, Kneba M, Macintyre E.A. Design and standardization of PCR primers and protocols for detection of clonal immunoglobulin and T-cell receptor gene recombinations in suspect lymphoproliferations: report of the BIOMED-2 Concerted Action BMH4-CT98-3936. Leukemia. 2003;17(12):2257-317. doi: 10.1038/sj.leu.2403202
  23. Sidorova Yu.V, Chernova N.G, Sinitsyna M.N, Aleksenko M.Y, Glinshchikova O.A, Smirnova S.Yu, Ryzhikova N.V, Nikulina E.E, Zakharko E.I, Rybkina E.B, Dvirnyk V.N, Kovrigina A.M, Zvonkov E.E, Sudarikov A.B. Monitoring of RHOA G17V mutation during the course of therapy in patients with angioimmunoblastic T-cell lymphoma by quantitative allele - specific PCR with LNA-modified primers. Hemasphere. Abstract book. 23rd Congress of the European Hematology Association. 2018;2(S):89-90.
  24. Smirnova S, Sidorova Y, Chernova N, Zvonkov E, Sinitsyna M, Sychevskaya K, Glinshchikova O, Ryzhikova N, Kovrigina A, Sudarikov A. CD8+ T-cell clones persistent in bone marrow and peripheral blood during course of CD4+ angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Haematologica. 2017;102(suppl 1):578, E1403.
  25. Zaki M.A, Wada N, Kohara M, Ikeda J, Hori Y, Fujita S, Ogawa H, Sugiyama H, Hino M, Kanakura Y, Morii E, Aozasa K. Presence of B-cell clones in T-cell lymphoma. Eur J Haematol. 2011;86(5):412-9. doi: 10.1111/j.1600-0609.2011.01597.x
  26. Higgins J.P, van de Rijn M, Jones C.D, Zehnder J.L, Warnke R.A. Peripheral T-cell lymphoma complicated by a proliferation of large B-cells. Am J Clin Pathol. 2000;114:236-47.
  27. Lome-Maldonado C, Canioni D, Hermine O, Delabesse E, Damotte D, Raffoux E, Gaulard P, Macintyre E, Brousse N. Angioimmunoblastic T-cell lymphoma (AILD-TL) rich in large B-cells and associated with Epstein-Barr virus infection. A different subtype of AILD-TL? Leukemia. 2002;16:2134-41. doi: 10.1038/sj.leu.2402642
  28. Xu Y, Mc Kenna R.W, Hoang M.P, Collins R.H, Kroft S.H. Composite angioimmunoblastic T-cell lymphoma and diffuse large B-cell lymphoma: a case report and review of the literature. Am J Clin Pathol. 2002;118:848-54. doi: 10.1309/VD2D-98ME-MB3F-WH34
  29. Huang J, Zhang P.H, Gao Y.H, Qiu L.G. Sequential development of diffuse large B-cell lymphoma in a patient with angioimmunoblastic T-cell lymphoma. Diagn Cytopathol. 2012;40:346-51. doi: 10.1002/dc.21641
  30. Chernova N.G, Sidorova J.V, Margolin O.V, Maryin D.S, Al-Radi L.S, Moiseeva T.N, Kovrigina A.M, Kremenetskaya A.M, Vorobiev A.I, Kravchenko S.K. Hodgkin lymphoma in patient with angioimmunoblastic T-cell lymphoma. J Haematologica. 2013;98(suppl 2):27, P081.
  31. Latorra D, Campbell K, Wolter A, Hurley J.M. Enhanced allele - specific PCR discrimination in SNP genotyping using 3' locked nucleic acid (LNA) primers. Hum Mutat. 2003;22(1):79-85. doi: 10.1002/humu.10228

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО "Консилиум Медикум", 2019

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
 
 


Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».