НОРМАЛИЗАЦИЯ Са2+-ГОМЕОСТАЗА НЕ ПРИВОДИТ К КОРРЕКЦИИ ВНУТРИКЛЕТОЧНОГО рН В НЕЙРОНАХ КУЛЬТУРЫ ГИППОКАМПА НА ФОНЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ ИОНА АММОНИЯ

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

При патологиях, связанных с эксайтотоксичностью и нарушением кальциевого гомеостаза, нередко наблюдается гипервозбуждение нейронов, в том числе во время ишемического инсульта, гипераммониемии и нейродегенеративных заболеваниях. В случае долговременной устойчивой деполяризации эта гиперактивность нарушает множество процессов, в том числе энергетический баланс АТФ, и может вести к гибели клеток. Этим реакциям зачастую сопутствует продолжительное закисление цитозоля. Оно воздействует на активность большого количества зависимых от внутриклеточного рН ионных каналов, иных молекулярных объектов, которые регулируют концентрацию [Са2+] и других ионов в клетке, а также мембранный потенциал. Такие процессы могут дополнительно приводить к гипервозбуждению и нарушению ионного гомеостаза. Понимание связи [Са2+] и рН представляет интерес для развития подходов по устранению вышеописанных дисфункций. В частности, остается невыясненным, влечет ли коррекция Са2+-гомеостаза за собой нормализацию рН. В этой работе показано, что устранение проявлений гипервозбуждения, а именно, сверхвысокой частоты импульсов [Са2+] и повышенного уровня базального [Са2+] путем применения агониста дофаминовых D2-подобных рецепторов PD-168077 (10 мкМ) или агониста α2-адренергических рецепторов гуанфацина (10 мкМ) не приводит к заметной коррекции рН в гиппокампальных нейронах и астроцитах. Таким образом, для устранения последствий гипервозбуждения регуляция рН, является задачей отдельной, независимой от подходов по нормализации кальциевого гомеостаза.

Об авторах

А. И Сергеев

Институт биофизики клетки — обособленное подразделение ФИЦ «Пущинский научный центр биологических исследований РАН»

Email: sergeev.bio@gmail.com
Пущино, Россия

П. В Некрасов

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН

Пущино, Россия

Список литературы

  1. Kuo S. W., Jiang M., and Heckman C. Potential involvement of intracellular pH in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Amyotroph. Lateral Scler. Frontotemporal Degener., 15 (1–2), 151–153 (2014). doi: 10.3109/21678421.2013.850096
  2. Verma M., Lizama B. N., and Chu C. T. Excitotoxicity, calcium and mitochondria: a triad in synaptic neurodegeneration. Transl. Neurodegener., 11 (1), 3 (2022). doi: 10.1186/s40035-021-00278-7
  3. Mehta A., Prabhakar M., Kumar P., Deshmukh R., and Sharma P. L. Excitotoxicity: bridge to various triggers in neurodegenerative disorders. Eur. J. Pharmacol., 698 (1–3), 6–18 (2013). doi: 10.1016/j.ejphar.2012.10.032
  4. Felipo V. Contribution of altered signal transduction associated to glutamate receptors in brain to the neurological alterations of hepatic encephalopathy. World J. Gastroenterol., 12 (48), 7737–7743 (2006). doi: 10.3748/wjg.v12.i48.7737
  5. Rodrigo R., Cauli O., Boix J., ElMili N., Agusti A., and Felipo V. Role of NMDA receptors in acute liver failure and ammonia toxicity: therapeutical implications. Neurochem. Int., 55 (1–3), 113–118 (2009). doi: 10.1016/j.neuint.2009.01.007
  6. Schoknecht K., Baeza-Lehnert F., Hirrlinger J., Dreier J. P., and Eilers J. Spreading depolarizations exhaust neuronal ATP in a model of cerebral ischemia. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 122 (19), e2415358122 (2025). doi: 10.1073/pnas.2415358122
  7. Leng T., Shi Y., Xiong Z. G., and Sun D. Proton-sensitive cation channels and ion exchangers in ischemic brain injury: new therapeutic targets for stroke? Prog. Neurobiol., 115, 189–209 (2014). doi: 10.1016/j.pneurobio.2013.12.008
  8. McIntosh T. K., Faden A. I., Bendall M. R., and Vink R. Traumatic brain injury in the rat: alterations in brain lactate and pH as characterized by 1H and 31P nuclear magnetic resonance. J. Neurochem., 49 (5), 1530–1540 (1987). doi: 10.1111/j.1471–4159
  9. Mabe H., Blomqvist P., and Siesjö B. K. Intracellular pH in the brain following transient ischemia. J. Cereb. Blood Flow Metab., 3 (1), 109–114 (1983). doi: 10.1038/jcbfm
  10. Brooks K. J., Kauppinen R. A., Williams S. R., Bachelard H. S., Bates T. E., and Gadian D. G. Ammonia causes a drop in intracellular pH in metabolizing cortical brain slices. A [31P] and [1H] nuclear magnetic resonance study. Neuroscience, 33 (1), 185–192 (1989). doi: 10.1016/0306-4522(89)90320-5
  11. Kelly T. and Rose C. R. Ammonium influx pathways into astrocytes and neurones of hippocampal slices. J. Neurochem., 115 (5), 1123–1136 (2010). doi: 10.1111/j.1471–4159.2010.07009.x
  12. Wang G. J., Randall R. D., and Thayer S. A. Glutamate-induced intracellular acidification of cultured hippocampal neurons demonstrates altered energy metabolism resulting from Ca2+ loads. J. Neurophysiol., 72 (6), 2563–2569 (1994). doi: 10.1152/jn.1994.72.6.2563
  13. Dynnik V. V., Kononov A. V., Sergeev A. I., Teplov I. Y., Tankanag A. V., and Zinchenko V. P. To break or to brake neuronal network accelerated by ammonium ions? PLoS One, 10 (7), e0134145 (2015). doi: 10.1371/journal.pone.0134145
  14. Brewer G. J., Torricelli J. R., Evege E. K., and Price P. J. Optimized survival of hippocampal neurons in B27-supplemented Neurobasal, a new serum-free medium combination. J. Neurosci. Res., 35 (5), 567–576 (1993). doi: 10.1002/jnr.490350513
  15. Magg T. and Albert M. H. Tracking cell proliferation using the far red fluorescent dye SNARF-1. Cytometry B Clin. Cytom., 72 (6), 458–464 (2007). doi: 10.1002/cyto.b.20180
  16. Buckler K. J. and Vaughan-Jones R. D. Application of a new pH-sensitive fluoroprobe (carboxy-SNARF-1) for intracellular pH measurement in small, isolated cells. Pflugers Arch., 417 (2), 234–239 (1990). doi: 10.1007/BF00370705
  17. Zinchenko V. P., Turovsky E. A., Turrovskaya M. V., Berezhnov A. V., Sergeev A. I., and Dynnik V. V. NAD causes dissociation of neural networks into subpopulations of neurons by inhibiting the network synchronous hyperactivity evoked by ammonium ions. Biochemistry (Moscow), Suppl. Ser. A, 10, 118–125 (2016). doi: 10.1134/S1990747816020124
  18. Berezhnov A. V., Fedotova E. I., Sergeev A. I., Teplov I. Y., and Abramov A. Y. Dopamine controls neuronal spontaneous calcium oscillations via astrocytic signal. Cell Calcium, 94, 102359 (2021). doi: 10.1016/j.ceca.2021.102359
  19. Berezhnov A. V., Soutar M. P., Fedotova E. I., Frolova M. S., Plun-Favreau H., Zinchenko V. P., and Abramov A. Y. Intracellular pH Modulates Autophagy and Mitophagy. J. Biol. Chem., 291 (16), 8701–8708 (2016). doi: 10.1074/jbc.M115.691774
  20. Сергеев А. И. Нарушение кальциевого гомеостаза и его коррекция при гипервозбуждении нейронов культуры клеток гиппокампа. Дис. ... канд. биол. наук (ИБК РАН, Пущино, 2017).
  21. Limón I. D., Angulo-Cruz I., Sánchez-Abdon L., and Patricio-Martínez A. Disturbance of the glutamate-glutamine cycle, secondary to hepatic damage, compromises memory function. Front. Neurosci., 15, 578922 (2021). doi: 10.3389/fnins.2021.578922
  22. Kosenkov A. M., Gaidin S. G., Sergeev A. I., Teplov I. Y., and Zinchenko V. P. Fast changes of NMDA and AMPA receptor activity under acute hyperammonemia in vitro. Neurosci. Lett., 686, 80–86 (2018). doi: 10.1016/j.neulet.2018.08.054
  23. Raley-Susman K. M., Cragoe E. J., Sapolsky R. M., and Kopito R. R. Regulation of intracellular pH in cultured hippocampal neurons by an amiloride-insensitive Na+/H+ exchanger, J. Biol. Chem., 266 (5), 2739–2745 (1991). doi: 10.1016/S0021-9258(18)49907-3
  24. McClure M. M., Barch D. M., Romero M. J., Minzenberg M. J., Triebwasser J., Harvey P. D., and Siever L. J. The effects of guanfacine on context processing abnormalities in schizotypal personality disorder. Biol. Psychiatry, 61 (10), 1157–1160 (2007). doi: 10.1016/j.biopsych.2006.06.034
  25. Swartz B. E., McDonald C. R., Patel A., and Torgersen D. The effects of guanfacine on working memory performance in patients with localization-related epilepsy and healthy controls. Clin. Neuropharmacol., 31 (5), 251–260 (2008). doi: 10.1097/WNF.0b013e3181633461
  26. Scahill L., Chappell P. B., Kim Y. S., Schultz R. T., Katsovich L., Shepherd E., Arnsten A. F., Cohen D. J., and Leckman J. F. A placebo-controlled study of guanfacine in the treatment of children with tic disorders and attention deficit hyperactivity disorder. Am. J. Psychiatry, 158 (7), 1067–1074 (2001). doi: 10.1176/appi.ajp.158.7.1067
  27. Magen I., Avraham Y., Ackerman Z., Vorobiev L., Mechoulam R., and Berry E. M. Cannabidiol ameliorates cognitive and motor impairments in mice with bile duct ligation. J. Hepatol., 51 (3), 528–534 (2009). doi: 10.1016/j.jhep.2009.04.021
  28. Baldassarre M., Giannone F. A., Napoli L., Tovoli A., Ricci C. S., Tufoni M., and Caraceni P. The endocannabinoid system in advanced liver cirrhosis: pathophysiological implication and future perspectives. Liver Int., 33 (9), 1298–1308 (2013). doi: 10.1111/liv.12263
  29. Avraham Y., Grigoriadis N., Poutahidis T., Vorobiev L., Magen I., Ilan Y., Mechoulam R., and Berry E. Cannabidiol improves brain and liver function in a fulminant hepatic failure-induced model of hepatic encephalopathy in mice. Br. J. Pharmacol., 162 (7), 1650–1658 (2011). doi: 10.1111/j.1476-5381.2010.01179.x
  30. Wang X., Wu J., Li L., Chen F., Wang R., and Jiang C. Hypercapnic acidosis activates KATP channels in vascular smooth muscles. Circ. Res., 92 (11), 1225–1232 (2003). doi: 10.1161/01.RES.0000075601.95738.6D
  31. Morton M. J., Abohamed A., Sivaprasadarao A., and Hunter M. pH sensing in the two-pore domain K+ channel, TASK2. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 102 (44), 16102–16106 (2005). doi: 10.1073/pnas.0506870102
  32. Zhu G., Chanchevalap S., Cui N., and Jiang C. Effects of intra- and extracellular acidifications on single channel Kir2.3 currents. J. Physiol., 516 (Pt 3), 699–710 (1999). doi: 10.1111/j.1469-7793.1999.0699u.x
  33. Sato R. and Koumi S. Modulation of the delayed rectifier potassium channel gating in guinea-pig ventricular myocytes by intracellular acidification. Nihon Ika Daigaku Zasshi, 64 (1), 71–73 (1997). doi: 10.1272/jnms1923.64.71
  34. Teplov I. Y., Zinchenko V. P., Kosenkov A. M., Gaidin S. G., Nenov M. N., and Sergeev A. I. Involvement of NMDA and GABA(A) receptors in modulation of spontaneous activity in hippocampal culture: Interrelations between burst firing and intracellular calcium signal. Biochem. Biophys. Res. Commun., 553, 99–106 (2021). doi: 10.1016/j.bbrc.2021.02.149
  35. Surges R., Volynski K. E., and Walker M. C. Is levetiracetam different from other antiepileptic drugs? Levetiracetam and its cellular mechanism of action in epilepsy revisited. Ther. Adv. Neurol. Disord., 1 (1), 13–24 (2008). doi: 10.1177/1756285608094212
  36. Ribeiro C. A., Hickmann F. H., and Wajner M. Neurochemical evidence that 3-methylglutaric acid inhibits synaptic Na+,K+-ATPase activity probably through oxidative damage in brain cortex of young rats. Int. J. Dev. Neurosci., 29 (1), 1–7 (2011). doi: 10.1016/j.ijdevneu.2010.10.007
  37. Renuka M., Vijayakumar N., and Ramakrishnan A. Chrysin, a flavonoid attenuates histological changes of hyperammonemic rats: A dose dependent study. Biomed. Pharmacother., 82, 345–354 (2016). doi: 10.1016/j.biopha.2016.05.013
  38. Ramakrishnan A., Vijayakumar N., and Renuka M. Naringin regulates glutamate-nitric oxide cGMP pathway in ammonium chloride induced neurotoxicity. Biomed. Pharmacother., 84, 1717–1726 (2016). doi: 10.1016/j.biopha.2016.10.080

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Российская академия наук, 2025

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».