Аллерген-спе-цифическая иммунотерапия мономерным аллергоидом из клещей домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus на модели экспериментального аллергического ринита

Цель работы. Изучение эффективности экспериментальной аллерген-специфической иммунотерапии (АСИТ) мономерным аллергоидом (sD1), полученным путем сукцинилирования аллергенного экстракта из клещей домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus (D1), на экспериментальной (мышиной) модели аллергического ринита (ЭМАР). Материалы и методы. Мышей линии BALB/c иммунизировали немодифицированным экстрактом (D1) из клещей домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus (Der p) в смеси с гидроокисью алюминия [Al(OH)3] трижды с интервалом в три недели, после чего через 6 нед подвергали челленджированию (разрешающему воздействию) путем интраназального введения аллергенного экстракта D1. Экспериментальную АСИТ проводили в интервале между последней иммунизацией и началом челленджирования. Первая группа животных получила «ложную АСИТ» в виде 16 подкожных (п/к) инъекций фосфатно-солевого буферного раствора (PBS); вторая - 16 п/к инъекций немодифицированного Dl в возрастающих дозах (белкового эквивалента): 1; 10; 100 и 1000 мкг/мышь; третья - 8 п/к инъекций sDl в возрастающих дозах (белкового эквивалента): 100; 550 и 1000 мкг/мышь; четвертая - комбинированную АСИТ: 4 п/к инъекций sD1 в дозах 100; 550; 1000 мкг/мышь и 4 сублингвальных (с/л) введения sD1 в дозе 1000 мкг/мышь. Пятая группа служила отрицательным контролем: иммунизация, экспериментальная АСИТ и челленджирование осуществлялись введениями PBS. Сразу после последнего челленджирования оценивали клиническую симптоматику экспериментального ринита (по количеству чиханий в минуту), а через 24 ч после окончания челленджирования проводили оценку частоты дыхания при помощи использования неинвазивной плетизмографии. Через 48 ч после последнего челленджирования животных всех групп умерщвляли и проводили забор материала для гистологического исследования (голова целиком) с целью оценки гистологической картины выраженности аллергического ринита в носовой полости. Забор крови для получения сывороток у животных производили трижды: через 7 дней после последней иммунизации, за 1 день до челленджирования и через 24 ч после последнего челленджирования. Уровни анти-Der p IgE, IgG1, IgG2a в индивидуальных сыворотках определяли твердофазным иммуноферментным анализом (ИФА). Результаты и обсуждение. Показано, что все три варианта АСИТ (группы 2, 3, 4) существенно снижали число актов чихания, причем наибольшее снижение происходило в 3-й группе, получавшей АСИТ мономерным аллергоидом sD1. Количество дыхательных актов в минуту у животных 2- и 4-й групп, получавших АСИТ соответственно немодифицированным D1 и sD1 (комбинированное п/к и с/л введение), было достоверно выше такового в 1-й группе (модель ЭМАР). Уровни анти-Der p IgE в 1-4-й группах после 3-й иммунизации возрастал по сравнению с 5-й группой (отрицательный контроль). После завершения АСИТ уровни анти-Der p IgE во 2-, 3- и 4-й группах повышались как относительно 5-й группы (отрицательный контроль), так и относительно 1-й группы (положительный контроль - модель ЭМАР). Однако после проведения челленджирования наивысшие уровни анти-Der p IgE отмечались в 1- и 4-й группах, в то время как в 3-й группе отмечалась тенденция к снижению, а во 2-й группе уровень анти-Der p IgE был существенно ниже такового в 1-й группе (контроль ЭМАР). Анти-Der p IgG1 достоверно повышался во 2-, 3-, 4-й группах (получавших АСИТ), причем это повышение сохранялось и после челленджирования. Анти-Der p IgG2a демонстрировал тенденцию к увеличению после АСИТ в 3-, 4-й группах, причем после челленджирования уровень анти-Derp IgG2a в 4-й группе был достоверно выше такового 1-й группы. При гистологической оценке общая картина воспаления, слизистая экссудация, гиперплазия слизистой оболочки были существенно более выражены в 1- и 2-й группах по сравнению с 5-й группой (отрицательный контроль). В то же время во 2-й группе наблюдалась тенденция к снижению вышеназванных показателей, а в 3- и 4-й группах (АСИТ sD1 и комбинированная п/к и с/л АСИТ sD1) наблюдалось полное подавление этих показателей. Заключение. По совокупности полученных данных можно сделать вывод о том, что АСИТ мономерным аллергоидом из клещей домашней пыли D. pteronyssinus, полученным методом сукцинилирования, может быть новым эффективным и безопасным подходом в терапии аллергического ринита, включая проведение комбинированного курса инъекционной и сублингвальной АСИТ, что может повысить эффект лечения и в конечном счете - качество жизни пациентов.

аллергенный экстракт, мономерный аллергоид, экспериментальная аллерген-специфическая иммунотерапия, экспериментальная модель аллергического ринита