ВЛИЯНИЕ L-КАРНИТИНА IN VITRO НА АКТИВНОСТЬ ЛИЗОСОМАЛЬНЫХ ЦИСТЕИНОВЫХ ПРОТЕИНАЗ И СОСТОЯНИЕ ЛИЗОСОМАЛЬНОЙ МЕМБРАНЫ

Изучено влияние L-карнитина in vitro на показатели активности лизосомальных цистеиновых протеиназ и стабильность мембраны лизосом гомогенатов печени половозрелых интактных крыс-самок линии Wistar массой 280-330 г. В опытных группах выделенные лизосомы инкубировали in vitro в растворе L-карнитина в течение 1-го, 2-х и 4-х часов, в контрольных группахinvitro-инкубацию проводили в среде выделения. Активность катепсинов В, L и Н изучалась спектрофлуориметрическим методом по Barrett & Kirschke в двух фракциях - лизосомальной и внелизосомальной. В качестве основного маркера лабилизации мембран использовали активность кислой фосфатазы. При in vitro - инкубации лизосом было обнаружено, что L-карнитин в концентрации 5 мМ увеличивает общую активность катепсина B при одночасовой инкубации на 73,2% (р=0,008), катепсина L при двух- и четырехчасовой инкубации - на 77,7% (р=0,005) и 42,3% (р=0,013) соответственно, а также снижает общую активность катепсина Н при одночасовой инкубации на 200,0% (р=0,008), при двухчасовой - на 67,9% (р=0,05), при четырехчасовой - на 27,1% (р=0,02). Кроме того, инкубация в 5 мМ растворе L-карнитина приводит к росту неседи-ментируемой активности и падению седиментируемой активности для катепсина L при двухчасовом, а для кислой фосфатазы - при двух- и четырехчасовом воздействии. Также 5 мМ L-карнитин при одно- и двухчасовой инкубации стабилизирует лизосомальную мембрану, тогда как увеличение времени инкубации до 4-х часов приводит к её повреждению, и повышает избирательную проницаемость лизосомальной мембраны для исследуемых катепсинов, в наибольшей степени - для катепсина Н.