Активность глутатионпероксидазы в эндометриоидных очагах при хирургическом моделировании эндометриоза

Обложка
  • Авторы: Разыграев А.В.1,2, Базиян Е.В.3, Полянских Л.С.3, Петросян М.А.3,4
  • Учреждения:
    1. Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет
    2. Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта,
    3. Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта
    4. Национальный медицинский исследовательский центр им. В.А. Алмазова
  • Выпуск: Том 70, № 2 (2021)
  • Страницы: 55-61
  • Раздел: Оригинальные исследования
  • URL: https://journals.rcsi.science/jowd/article/view/52877
  • DOI: https://doi.org/10.17816/JOWD52877
  • ID: 52877


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Актуальность. Известна связь между полиморфизмами генов, кодирующих антиоксидантные ферменты, изменениями активностей каталазы и глутатионпероксидазы в ткани эндометрия и развитием эндометриоза. Некоторые формы глутатионпероксидазы активируются гестагенами. В то же время гестагены эффективны в обеспечении регресса эндометриоидных очагов. Представляет интерес оценка связи глутатионпероксидазной активности в эндометриоидных очагах со степенью их регресса.

Цель — проанализировать активность глутатионпероксидазы в смоделированных эндометриодных очагах, имеющих разную степень регресса.

Материалы и методы. Метод определения глутатионпероксидазной активности с использованием пероксида водорода в качестве субстрата и 5,5’-дитиобис(2-нитробензойной кислоты) для оценки убыли восстановленной формы глутатиона применен для количественной оценки активности фермента в эндометриодных очагах, смоделированных у лабораторных крыс линии Вистар. Определение проводили в гомогенатах ткани при 37 °C в реакционной среде на основе трис-HCl-буфера с этилендиаминтетраацетатом и азидом натрия (рН 8,5) в присутствии 0,55 мМ глутатиона и 0,192 мМ пероксида водорода (время инкубации — 40 с). Оценивали корреляцию между глутатионпероксидазной активностью и массой очагов.

Результаты. Для эндометриоидных очагов, смоделированных на лабораторных крысах, в целом характерен высокий, хорошо определяемый уровень глутатионпероксидазной активности. Величина глутатионпероксидазной активности для одних и тех же гетеротопий пропорциональна содержанию их белка в реакционной смеси. Диапазон значений удельной активности глутатионпероксидазы в разных очагах составил 2,43–6,45 мкмоль израсходованного глутатиона / мин на 1 мг белка (n = 7). В очагах, обладающих меньшей массой (сильнее подвергшихся регрессу), регистрировали более высокую глутатионпероксидазную активность — коэффициент ранговой корреляции Спирмена составил –0,93 (р = 0,0067).

Заключение. Метод определения глутатионпероксидазной активности с использованием пероксида водорода и 5,5’-дитиобис(2-нитробензойной кислоты) пригоден для работы с тканью смоделированных эндометриоидных очагов. Чем более высокая активность глутатионпероксидазы в очагах, тем, как правило, меньше их масса. Результаты аналогичны полученным ранее данным по активности каталазы и позволяют предположить вовлеченность обоих антиоксидантных ферментов в механизм регресса эндометриоидных очагов.

Об авторах

Алексей Вячеславович Разыграев

Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет; Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта,

Автор, ответственный за переписку.
Email: a.v.razygraev@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-0544-9398
SPIN-код: 8623-7923

канд. биол. наук

Россия, 199034, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3; Санкт-Петербург

Елена Владимировна Базиян

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: waz2107gen@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-7837-3315
SPIN-код: 2232-9914

MD

Россия, Санкт-Петербург

Людмила Сергеевна Полянских

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: polyanskikh-83@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-9994-8341
SPIN-код: 2501-8880

MD

Россия, Санкт-Петербург

Мария Анатольевна Петросян

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта; Национальный медицинский исследовательский центр им. В.А. Алмазова

Email: mariya@labpharm.spb.ru
ORCID iD: 0000-0001-7347-6104
SPIN-код: 5329-5420

канд. биол. наук

Россия, Санкт-Петербург; Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Ota H., Igarashi S., Sato N. et al. Involvement of catalase in the endometrium of patients with endometriosis and adenomyosis // Fertil. Steril. 2002. Vol. 78. No. 4. P. 804–809. doi: 10.1016/S0015-0282(02)03344-7
  2. Puy L.A., Librach C.L. A case-controlled analysis of catalase expression in endometriosis // Fertil. Steril. 2001. Vol. 76. No. 3. Suppl. 1. P. S149. doi: 10.1016/S0015-0282(01)02436-0
  3. Zarafshan S.S., Salehi Z., Salahi E. et al. Polymorphism of catalase gene (CAT C-262T) in women with endometriosis // J. Obstet. Gynaecol. 2015. Vol. 35. No. 3. P. 269–271. doi: 10.3109/01443615.2014.948402
  4. Разыграев А.В., Петросян М.А., Базиян Е.В., Полянских Л.С. Исследование активности каталазы в гетеротопиях в экспериментальной модели эндометриоза // Журнал акушерства и женских болезней. 2019. Т. 68. №. 6. С. 57–63. doi: 10.17816/JOWD68657-63
  5. Ota H., Igarashi S., Kato N., Tanaka T. Aberrant expression of glutathione peroxidase in eutopic and ectopic endometrium in endometriosis and adenomyosis // Fertil. Steril. 2000. Vol. 74. P. 313–318. doi: 10.1016/S0015-0282(00)00638-5
  6. Torres W.H. Biología de las especies de oxígeno reactivas // Mensaje Bioquimico. 2002. Vol. 26. P. 19–54. [дата обращения: 02.12.2020]. Доступ по ссылке: http://static1.1.sqspcdn.com/static/f/1381323/18832492/1340082783193/Mensaje_Bioq02v26p019_Hansberg.pdf?token = %2BxnoB2oTZkYCHfk5sNZxT7gyf4Y%3D
  7. Петросян М.А., Балашова Н.Н., Полянских Л.С. и др. Влияние аналогов прогестерона на эндометриоидные гетеротопии в экспериментальной модели эндометриоза // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2018. Т. 81. № 7. С. 14–19. doi: 10.30906/0869-2092-2018-81-7-14-19
  8. Разыграев А.В., Юшина А.Д., Титович И.А. Методика определения активности глутатионпероксидазы мозга мышей и ее применение в фармакологическом эксперименте // Бюллетень экспериментальной биологии медицины. 2018. Т. 165. № 2. С. 261–264. doi: 10.1007/s10517-018-4219-2
  9. Разыграев А.В., Таборская К.И., Петросян М.А., Тумасова Ж.Н. Тиолпероксидазные активности плазмы крови крыс, определяемые с использованием пероксида водорода и 5,5’-дитиобис(2-нитробензойной кислоты) // Биомедицинская химия. 2016. Т. 62. № 4. С. 431–438. doi: 10.18097/PBMC20166204431
  10. Riddles P.W., Blakeley R.L., Zerner B. Ellman’s reagent: 5,5’-dithiobis(2-nitrobenzoic acid) — a reexamination // Analytical biochemistry. 1979. Vol. 94. No. 1. P. 75–81. doi: 10.1016/0003-2697(79)90792-9
  11. Чеснокова Л.С., Войнова Н.Е., Комкова А.И., Лянгузов А.Ю. Методы количественного определения белка // Ферменты и нуклеиновые кислоты / под ред. В.Г. Владимиров, С.Н. Лызлова. Санкт-Петербург, 1997.
  12. r-project.org [Internet]. R Core Team. R: A language and environment for statistical computing. R Foundation for Statistical Computing, Vienna, 2017. [дата обращения: 05.05.2017]. Доступ по ссылке: https://www.r-project.org/

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Одновременное внесение пероксида водорода и биоматериала в реакционную смесь: 1 — реактив А (180 мкл); 2 — 5 мМ H2O2 (8 мкл); 3 — биоматериал (20 мкл). Фото А.Д. Юшиной

Скачать (96KB)
3. Рис. 2. Обратная корреляция между удельной активностью глутатионпероксидазы в смоделированных эндометриоидных очагах и их массой: log (gpx) — натуральный логарифм глутатионпероксидазной активности (мкмоль/мин на 1 мг белка); log (mcg) — натуральный логарифм массы всего растворимого белка в очаге (в микрограммах), экстрагированного при гомогенизации

Скачать (52KB)

© ООО «Эко-Вектор», 2021



Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах