Активность глутатионпероксидазы в эндометриоидных очагах при хирургическом моделировании эндометриоза

Обложка


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Актуальность. Известна связь между полиморфизмами генов, кодирующих антиоксидантные ферменты, изменениями активностей каталазы и глутатионпероксидазы в ткани эндометрия и развитием эндометриоза. Некоторые формы глутатионпероксидазы активируются гестагенами. В то же время гестагены эффективны в обеспечении регресса эндометриоидных очагов. Представляет интерес оценка связи глутатионпероксидазной активности в эндометриоидных очагах со степенью их регресса.

Цель — проанализировать активность глутатионпероксидазы в смоделированных эндометриодных очагах, имеющих разную степень регресса.

Материалы и методы. Метод определения глутатионпероксидазной активности с использованием пероксида водорода в качестве субстрата и 5,5’-дитиобис(2-нитробензойной кислоты) для оценки убыли восстановленной формы глутатиона применен для количественной оценки активности фермента в эндометриодных очагах, смоделированных у лабораторных крыс линии Вистар. Определение проводили в гомогенатах ткани при 37 °C в реакционной среде на основе трис-HCl-буфера с этилендиаминтетраацетатом и азидом натрия (рН 8,5) в присутствии 0,55 мМ глутатиона и 0,192 мМ пероксида водорода (время инкубации — 40 с). Оценивали корреляцию между глутатионпероксидазной активностью и массой очагов.

Результаты. Для эндометриоидных очагов, смоделированных на лабораторных крысах, в целом характерен высокий, хорошо определяемый уровень глутатионпероксидазной активности. Величина глутатионпероксидазной активности для одних и тех же гетеротопий пропорциональна содержанию их белка в реакционной смеси. Диапазон значений удельной активности глутатионпероксидазы в разных очагах составил 2,43–6,45 мкмоль израсходованного глутатиона / мин на 1 мг белка (n = 7). В очагах, обладающих меньшей массой (сильнее подвергшихся регрессу), регистрировали более высокую глутатионпероксидазную активность — коэффициент ранговой корреляции Спирмена составил –0,93 (р = 0,0067).

Заключение. Метод определения глутатионпероксидазной активности с использованием пероксида водорода и 5,5’-дитиобис(2-нитробензойной кислоты) пригоден для работы с тканью смоделированных эндометриоидных очагов. Чем более высокая активность глутатионпероксидазы в очагах, тем, как правило, меньше их масса. Результаты аналогичны полученным ранее данным по активности каталазы и позволяют предположить вовлеченность обоих антиоксидантных ферментов в механизм регресса эндометриоидных очагов.

Об авторах

Алексей Вячеславович Разыграев

Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет; Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта,

Автор, ответственный за переписку.
Email: a.v.razygraev@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-0544-9398
SPIN-код: 8623-7923

канд. биол. наук

Россия, 199034, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3; Санкт-Петербург

Елена Владимировна Базиян

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: waz2107gen@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-7837-3315
SPIN-код: 2232-9914

MD

Россия, Санкт-Петербург

Людмила Сергеевна Полянских

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: polyanskikh-83@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-9994-8341
SPIN-код: 2501-8880

MD

Россия, Санкт-Петербург

Мария Анатольевна Петросян

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта; Национальный медицинский исследовательский центр им. В.А. Алмазова

Email: mariya@labpharm.spb.ru
ORCID iD: 0000-0001-7347-6104
SPIN-код: 5329-5420

канд. биол. наук

Россия, Санкт-Петербург; Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Ota H., Igarashi S., Sato N. et al. Involvement of catalase in the endometrium of patients with endometriosis and adenomyosis // Fertil. Steril. 2002. Vol. 78. No. 4. P. 804–809. doi: 10.1016/S0015-0282(02)03344-7
  2. Puy L.A., Librach C.L. A case-controlled analysis of catalase expression in endometriosis // Fertil. Steril. 2001. Vol. 76. No. 3. Suppl. 1. P. S149. doi: 10.1016/S0015-0282(01)02436-0
  3. Zarafshan S.S., Salehi Z., Salahi E. et al. Polymorphism of catalase gene (CAT C-262T) in women with endometriosis // J. Obstet. Gynaecol. 2015. Vol. 35. No. 3. P. 269–271. doi: 10.3109/01443615.2014.948402
  4. Разыграев А.В., Петросян М.А., Базиян Е.В., Полянских Л.С. Исследование активности каталазы в гетеротопиях в экспериментальной модели эндометриоза // Журнал акушерства и женских болезней. 2019. Т. 68. №. 6. С. 57–63. doi: 10.17816/JOWD68657-63
  5. Ota H., Igarashi S., Kato N., Tanaka T. Aberrant expression of glutathione peroxidase in eutopic and ectopic endometrium in endometriosis and adenomyosis // Fertil. Steril. 2000. Vol. 74. P. 313–318. doi: 10.1016/S0015-0282(00)00638-5
  6. Torres W.H. Biología de las especies de oxígeno reactivas // Mensaje Bioquimico. 2002. Vol. 26. P. 19–54. [дата обращения: 02.12.2020]. Доступ по ссылке: http://static1.1.sqspcdn.com/static/f/1381323/18832492/1340082783193/Mensaje_Bioq02v26p019_Hansberg.pdf?token = %2BxnoB2oTZkYCHfk5sNZxT7gyf4Y%3D
  7. Петросян М.А., Балашова Н.Н., Полянских Л.С. и др. Влияние аналогов прогестерона на эндометриоидные гетеротопии в экспериментальной модели эндометриоза // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2018. Т. 81. № 7. С. 14–19. doi: 10.30906/0869-2092-2018-81-7-14-19
  8. Разыграев А.В., Юшина А.Д., Титович И.А. Методика определения активности глутатионпероксидазы мозга мышей и ее применение в фармакологическом эксперименте // Бюллетень экспериментальной биологии медицины. 2018. Т. 165. № 2. С. 261–264. doi: 10.1007/s10517-018-4219-2
  9. Разыграев А.В., Таборская К.И., Петросян М.А., Тумасова Ж.Н. Тиолпероксидазные активности плазмы крови крыс, определяемые с использованием пероксида водорода и 5,5’-дитиобис(2-нитробензойной кислоты) // Биомедицинская химия. 2016. Т. 62. № 4. С. 431–438. doi: 10.18097/PBMC20166204431
  10. Riddles P.W., Blakeley R.L., Zerner B. Ellman’s reagent: 5,5’-dithiobis(2-nitrobenzoic acid) — a reexamination // Analytical biochemistry. 1979. Vol. 94. No. 1. P. 75–81. doi: 10.1016/0003-2697(79)90792-9
  11. Чеснокова Л.С., Войнова Н.Е., Комкова А.И., Лянгузов А.Ю. Методы количественного определения белка // Ферменты и нуклеиновые кислоты / под ред. В.Г. Владимиров, С.Н. Лызлова. Санкт-Петербург, 1997.
  12. r-project.org [Internet]. R Core Team. R: A language and environment for statistical computing. R Foundation for Statistical Computing, Vienna, 2017. [дата обращения: 05.05.2017]. Доступ по ссылке: https://www.r-project.org/

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Одновременное внесение пероксида водорода и биоматериала в реакционную смесь: 1 — реактив А (180 мкл); 2 — 5 мМ H2O2 (8 мкл); 3 — биоматериал (20 мкл). Фото А.Д. Юшиной

Скачать (96KB)
3. Рис. 2. Обратная корреляция между удельной активностью глутатионпероксидазы в смоделированных эндометриоидных очагах и их массой: log (gpx) — натуральный логарифм глутатионпероксидазной активности (мкмоль/мин на 1 мг белка); log (mcg) — натуральный логарифм массы всего растворимого белка в очаге (в микрограммах), экстрагированного при гомогенизации

Скачать (52KB)

© ООО «Эко-Вектор», 2021



Согласие на обработку персональных данных

 

Используя сайт https://journals.rcsi.science, я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных») даю согласие на обработку персональных данных на этом сайте (текст Согласия) и на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика» (текст Согласия).