Исследование уровня тромбоцитарных микрочастиц и экспрессии Р-селектина у пациентов с заболеваниями периферических артерий нижних конечностей

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Обоснование. Нарушение функциональной активности тромбоцитов приводит к прогрессированию атеросклероза и его осложнениям. Активированные тромбоциты прилипают к стенке сосуда в месте повреждения эндотелия и инициируют образование артериального тромба, что приводит к острой ишемии органа. Такие биохимические и клеточные маркеры как тромбоцитарные микровезикулы и Р-селектин могут быть проанализированы с помощью метода проточной цитометрии, в основе которого лежит специфическое взаимодействие антиген – антитело. Пациенты с облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей подвергаются значительно большему риску сердечно-сосудистых и цереброваскулярных осложнений, чем лица в соответствующей по возрасту и полу популяции без заболеваний периферических артерий. Важная составляющая в патогенетической терапии сердечно-сосудистых заболеваний и профилактике их осложнений — применение антиагрегантов.

Цель — оценить уровень тромбоцитарных микрочастиц и экспрессии Р-селектина у пациентов с заболеваниями периферических артерий нижних конечностей на фоне приема антиагрегантной терапии.

Материалы и методы. В исследование было включено 49 человек. Из них были сформированы три группы: 1) пациенты с облитерирующим заболеванием артерий нижних конечностей (n = 14) на фоне длительного приема (более 14 дней) двойной (75 мг клопидогрела и 100 мг ацетилсалициловой кислоты) антиагрегантной терапии; 2) пациенты с COVID-19 (n = 15), которые составили группу положительного контроля при определении микрочастиц тромбоцитарного происхождения; 3) здоровые добровольцы (n = 20) без признаков острого респираторного заболевания, без сердечно-сосудистых и тромбоэмболических эпизодов в анамнезе, не принимавшие антиагрегантные препараты. Функциональную активность тромбоцитов оценивали двумя методами — с помощью оптической агрегатометрии и анализа экспрессии Р-селектина на поверхности тромбоцитов с использованием проточной цитометрии. Количество тромбоцитарных микрочастиц в плазме крови определяли также с помощью проточной цитометрии.

Результаты. При оценке функциональной активности тромбоцитов методом оптической агрегатометрии было выявлено значимое снижение степени агрегации тромбоцитов в группе пациентов с облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей на фоне приема антиагрегантов по сравнению с группой контроля. Аналогичные изменения были получены при анализе экспрессии Р-селектина на поверхности тромбоцитов. При сравнительном анализе процентного содержания тромбоцитарных микрочастиц с фенотипом CD9+CD41+ было выявлено, что в группе пациентов с тяжелым воспалительным процессом их количество оказалось значительно больше, чем у пациентов с облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей на фоне приема антиагрегантов и в контрольной группе.

Заключение. Проведенное нами исследование отражает согласованность результатов трех различных лабораторных тестов при оценке функциональной активности тромбоцитов у пациентов с облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей на фоне приема антиагрегантных препаратов.

Об авторах

Алексей Игоревич Ермаков

Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями

Автор, ответственный за переписку.
Email: Ermakovspb@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3435-5881
SPIN-код: 8921-7251

заведующий клинико-диагностической лабораторией

Россия, Санкт-Петербург

Лариса Борисовна Гайковая

Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова

Email: Larisa.Gaikovaya@szgmu.ru
ORCID iD: 0000-0003-1000-1114
SPIN-код: 9424-1076

д-р мед. наук, профессор кафедры биологической и общей химии им. В.В. Соколовского

Россия, Санкт-Петербург

Ольга Васильевна Сироткина

Национальный медицинский исследовательский центр им. В.А. Алмазова; Петербургский институт ядерной физики им. Б.П. Константинова Национального исследовательского центра «Курчатовский институт»

Email: Olga_sirotkina@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3594-1647
SPIN-код: 1780-5490

д-р биол. наук, профессор кафедры лабораторной медицины и генетики; ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной генетики человека

Россия, Санкт-Петербург; Гатчина

Татьяна Владимировна Вавилова

Национальный медицинский исследовательский центр им. В.А. Алмазова

Email: Vtv.lab.spb@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-8537-3639
SPIN-код: 9003-6455
Scopus Author ID: 7004477312

д-р мед. наук, профессор, зав. кафедрой лабораторной медицины и генетики

Россия, Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Еnjeti A.K., Lincz L.F., Seldon M. Detection and measurement of microparticles: an evolving research tool for vascular biology // Semin. Thromb. Hemost. 2007. Vol. 33, No. 8. P. 771–779. doi: 10.1055/s-2007-1000369
  2. Storey R., Judge H., Wilcox R.G., Heptinstall S. Inhibition of ADP-induced P-selectin expression and platelet-leukocyte conjugate formation by clopidogrel and the P2Y12 receptor antagonist AR-C69931MX but not aspirin // Thromb. Haemost. 2002. Vol. 88, No. 3. P. 488–494.
  3. Borissoff J.I., Spronk H.M., ten Cate H. The hemostatic system as a modulator of atherosclerosis // N. Engl. J. Med. 2011. Vol. 364, No. 18. P. 1746–1760. doi: 10.1056/NEJMra1011670
  4. Поляков П.И., Горелик С.Г., Железнова Е.А. Облитерирующий атеросклероз нижних конечностей у лиц старческого возраста // Вестник новых медицинских технологий. 2013. Т. 20, № 1. С. 98–101.
  5. Dormandy J., Mahir H., Ascady G. et al. Fate of the patient with chronic leg ischemia. A review article // J. Cardiovasc. Surg. (Torino). 1989. Vol. 30, No. 1. P. 50–57.
  6. van der Zee P.M., Biro E., Ko Y. et al. P-selection and CD63-exposing platelet microparticles reflect platelet activation in peripheral arterial disease and myocardial infarct // Clin. Chem. 2006. Vol. 52, No. 4. P. 657–664. doi: 10.1373/clinchem.2005.057414
  7. McEver R.P., Beckstead J.H., Moore K.L. et al. GMP-140, a platelet alpha-granule membrane protein, is also synthesized by vascular endothelial cells and is localized in Weibel–Palade bodies // J. Clin. Invest.1989. Vol. 84, No. 1. P. 92–99. doi: 10.1172/JCI114175
  8. Biasucci L.M., Porto I., Di Vito L. et al. Differences in microparticle release in patients with acute coronary syndrome and stable angina // Circ. J. 2012. Vol. 76, No. 9. P. 2174–2182. doi: 10.1253/circj.cj-12-0068
  9. Nieuwland R., Berckmans R.J., Rotteveel-Eijkman R.C. et al. Cell-derived microparticles generated in patients during cardiopulmonary bypass are highly procoagulant // Circulation. 1997. Vol. 96, No. 10. P. 3534–3541. doi: 10.1161/01.cir.96.10.3534
  10. Veira A.J., Mooberry M., Key N.S. Microparticles in cardiovascular disease pathophysiology and outcomes // J Am. Soc. Hypertens. 2012. Vol. 6, No. 4. P. 243–252. doi: 10.1016/j.jash.2012.06.003
  11. Dake M.D., Ansel G.M., Jaff M.R. et al. Durable clinical effectiveness with paclitaxel-eluting stents in the femoro-popliteal artery: 5-Year Results of the Zilver PTX Randomized Trial // Circulation. 2016. Vol. 133, No. 15. P. 1472–1483. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.115.016900
  12. Laird J.R., Schneider P.A., Tepe G. et al. Durability of treatment effect using a drug-coated balloon for femoro-popliteal lesions // J. Am. Coll. Cardiol. 2015. Vol. 66, No. 21. P. 2329–2338. doi: 10.1016/j.jacc.2015.09.063
  13. Franzone A., Piccolo R, Gargiulo G. et al. Prolonged vs short duration of dual antiplatelet therapy after percutaneous coronary intervention in patients with or without peripheral arterial disease // JAMA Cardiol. 2016. Vol. 1, No. 7. P. 795–803. doi: 10.1001/jamacardio.2016.2811
  14. Bonaca M.P., Bhatt D.L., Storey R.F. et al. Ticagrelor for prevention of ischemic events after myocardial infarction in patients with peripheral artery disease // J. Am. Coll. Cardiol. 2016. Vol. 6, No. 23. P. 2719–2728. doi: 10.1016/j.jacc.2016.03.524
  15. Ault K.A. The clinical utility of flow cytometry in the study of platelets // Semin. Hematol. 2001. Vol. 38, No. 2. P. 160–168. doi: 10.1016/s0037-1963(01)90049-6
  16. Kailashiy J. Platelet-derived microparticles analysis: Techniques, challenges and recommendations // Anal. Biochem. 2018. Vol. 546. P. 78–85. doi: 10.1016/j.ab.2018.01.030
  17. Сироткина О.В., Боганькова Н.А., Ласковец А.Б. и др. Иммунологические методы в оценке функциональной активности тромбоцитов у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями // Медицинская иммунология. 2010. Т. 12, № 3. С. 213–218. doi: 10.15789/1563-0625-2010-3-213-218
  18. Сироткина О.В., Ермаков А.И., Гайковая Л.Б. и др. Микрочастицы клеток крови у больных COVID-19 как маркер активации системы гемостаза // Тромбоз, гемостаз и реология. 2020. № 4. С. 35–40. doi: 10.25555/THR.2020.4.0943
  19. Li X., Cong H. Platelet-derived microparticles and the potential of glycoprotein IIb/IIIa antagonists in treating acute coronary syndrome // Tex. Heart Inst. J. 2009. Vol. 36, No. 2. P. 134–139.
  20. Вавилова Т.В., Сироткина О.В., Ермаков А.И. и др. Молекулярные механизмы активации гемостаза при COVID-19 на госпитальном этапе // Лабораторная служба. 2021. Т. 10, № 4. С. 25–29. doi: 10.17116/labs20211004125
  21. Сироткина О.В., Ермаков А.И., Жиленкова Ю.И. и др. Динамика образования микровезикул клеток крови у больных COVID-19 на разных стадиях заболевания // Профилактическая и клиническая медицина. 2021. Т. 4, № 81. С. 68–74. doi: 10.47843/2074-9120_2021_4_68

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Показатель степени агрегации тромбоцитов в присутствии аденозиндифосфата (20 мкмоль/л). Уровень статистической значимости р < 0,0001. ОЗАНК — облитерирующие заболевания артерий нижних конечностей; ДААТ — двойная антиагрегантная терапия

Скачать (57KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Показатель экспрессии Р-селектина (процент тромбоцитов, позитивных по CD62Р-РЕ) в присутствии аденозиндифосфата (20 мкмоль/л). Уровень статистической значимости р < 0,0001. ОЗАНК — облитерирующие заболевания артерий нижних конечностей; ДААТ —двойная антиагрегантная терапия

Скачать (66KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Сравнительный анализ микрочастиц тромбоцитарного происхождения (CD9+CD41+) у пациентов и здоровых добровольцев. Уровень статистической значимости р = 0,003 для COVID-19 против ОЗАНК, р = 0,005 для COVID-19 против контроля. ОЗАНК — облитерирующие заболевания артерий нижних конечностей; ДААТ —двойная антиагрегантная терапия

Скачать (70KB)
Метаданные

© Эко-Вектор, 2023



Согласие на обработку персональных данных

 

Используя сайт https://journals.rcsi.science, я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных») даю согласие на обработку персональных данных на этом сайте (текст Согласия) и на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика» (текст Согласия).