Разработка тест-системы и способа выявления рибонуклеиновой кислоты коронавируса тяжелого острого респираторного синдрома-2, возбудителя новой коронавирусной инфекции, используя полимеразную цепную реакцию в режиме реального времени

В связи с быстрым распространением новой коронавирусной инфекции по всему земному шару появилась необходимость в большом количестве тест-систем для ее диагностики с целью назначения своевременного лечения и введения карантинных мероприятий. В кратчайшие сроки была разработана и зарегистрирована диагностическая система в формате обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в реальном времени для выявления рибонуклеиновой кислоты коронавируса тяжелого острого респираторного синдрома-2 в мазках со слизистой оболочки носоглотки и ротоглотки, основанная на определении генов нуклеокапсида и малого белка мембранной оболочки, а также гена PGK1 человека, выступающего в качестве внутреннего контроля реакции. Проведен анализ нуклеотидных последовательностей коронавируса тяжелого острого респираторного синдрома-2 и осуществлен подбор праймеров. Подобраны условия для проведения обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в реальном времени и состав набора реагентов. Исследование диагностической чувствительности и специфичности набора проводили на образцах биологического материала, с добавлением инактивированного вируса тяжелого острого респираторного синдрома-2. Продемонстрированы высокие аналитические характеристики разработанного набора реагентов: чувствительность не менее 10³ ГЭ/мл, специфичность — 100%, не было зарегистрировано ложноположительных или ложноотрицательных результатов. Высокая специфичность тест-системы показана на репрезентативной выборке генетического материала возбудителей респираторно-вирусных инфекций. Клинико-лабораторные испытания диагностикума «SARS-CoV-2-тест» были проведены на базе Национального исследовательского центра эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи. Набор реагентов для выявления рибонуклеиновой кислоты коронавируса тяжелого острого респираторного синдрома-2 путем полимеразной цепной реакции в режиме реального времени для диагностики in vitro «SARS-CoV-2-тест» зарегистрирован в Российской Федерации как медицинское изделие, регистрационное удостоверение № РЗН 2020/10632 от 03.06.2020.