Диагностические характеристики тест-системы для определения вирусного гепатита B методом ПЦР в реальном времени по результатам анализа клинических образцов
- Авторы: Мороз А.С.1,2, Торопов В.А.2, Романов А.С.2, Идутова М.К.2, Лисок А.В.1,2, Большаков В.Н.1,2, Аронова Е.Б.1
-
Учреждения:
- ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого»
- ГК «Алкор Био»
- Выпуск: Том 28, № 12 (2025)
- Страницы: 84-89
- Раздел: Медицинская химия
- URL: https://journals.rcsi.science/1560-9596/article/view/362639
- DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2025-12-10
- ID: 362639
Цитировать
Открытый доступ
Доступ предоставлен
Только для подписчиков
Аннотация
Введение. Метод ПЦР важен в клинической диагностике вируса гепатита B (ВГВ) из-за высокой чувствительности, особенно при низкой вирусной нагрузке, при мониторинге динамики лечения и при выявлении скрытой формы инфекции. Существуют строгие требования к диагностической чувствительности и специфичности ПЦР-тест-систем, применяемым в клинической практике.
Цель исследования – определение диагностических параметров разработанной тест-системы для ПЦР-диагностики ВГВ на 837 образцах плазмы крови человека.
Материал и методы. Исследованы 465 клинических образцов плазмы крови человека, полученных от людей с подтверждённым диагнозом заражения ВГВ, а также 372 образца плазмы крови, полученных от людей с подтверждённым отсутствием ВГВ в плазме крови. Образцы с подтверждённым клиническим статусом предоставлены аккредитованной лабораторией станции переливания крови. Набором сравнения служил коммерческий набор «РеалБест ВГВ ПЦР» (форма 2) (АО «Вектор-Бест», Россия). Для выделения нуклеиновых кислот использовали набор «РеалБест ДельтаМаг ВГВ/ВГС/ВИЧ» (АО «Вектор-Бест», Россия). Процесс автоматического выделения ДНК проводили на станции Auto-Pure96 (Allsheng, Китай). Для оценки эффективности выделения нуклеиновых кислот в исследуемые образцы плазмы крови человека вносили внутренний контрольный образец.
Результаты. Проведено сравнение разработанной тест-системы с набором «РеалБест ВГВ ПЦР». В результате анализа клинических образцов плазмы крови человека с использованием обеих тест-систем были получены диагностические характеристики разработанной тест-системы. Определена диагностическая чувствительность разработанной тест-системы (96,39%), а также диагностическая специфичность (98,33%).
Выводы. Статистический анализ Бланда–Альтмана показал высокую степень соответствия чувствительности обеих использованных тест-систем. Разработанная тест-система может быть рекомендована для использования в клинической диагностике ВГВ.
Об авторах
А. С. Мороз
ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого»; ГК «Алкор Био»
Автор, ответственный за переписку.
Email: anny-nice@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-4693-623X
SPIN-код: 4721-1020
аспирант, Высшая школа биотехнологий и пищевых производств, инженер-исследователь
Россия, 194021, Санкт-Петербург, ул. Новороссийская, 48; 192148, Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., 40аВ. А. Торопов
ГК «Алкор Био»
Email: anny-nice@mail.ru
ORCID iD: 0009-0005-1993-5572
ведущий инженер-исследователь
Россия, 192148, Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., 40аА. С. Романов
ГК «Алкор Био»
Email: anny-nice@mail.ru
ORCID iD: 0009-0009-3726-8346
инженер-лаборант
Россия, 192148, Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., 40аМ. К. Идутова
ГК «Алкор Био»
Email: anny-nice@mail.ru
ORCID iD: 0009-0002-9104-4457
вед. инженер-исследователь
Россия, 192148, Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., 40аА. В. Лисок
ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого»; ГК «Алкор Био»
Email: anny-nice@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-3134-1970
аспирант, Высшая школа биотехнологий и пищевых производств, руководитель лаборатории ПЦР
Россия, 194021, Санкт-Петербург, ул. Новороссийская, 48; 192148, Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., 40аВ. Н. Большаков
ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого»; ГК «Алкор Био»
Email: anny-nice@mail.ru
ORCID iD: 0009-0007-5126-6035
кандидат биологических наук, доцент, доцент Высшей школы биотехнологий и пищевых производств, руководитель лаборатории молекулярной диагностики
Россия, 194021, Санкт-Петербург, ул. Новороссийская, 48; 192148, Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., 40аЕ. Б. Аронова
ФГАОУ ВО «Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого»
Email: anny-nice@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-4376-2972
SPIN-код: 7288-6820
кандидат технических наук, доцент, доцент Высшей школы биотехнологий и пищевых производств
Россия, 194021, Санкт-Петербург, ул. Новороссийская, 48Список литературы
- Лялина Л.В., Эсауленко Е.В., Хорькова Е.В. и др. Результаты реализации программы элиминации вирусного гепатита В на Северо-Западе России. Инфекция и иммунитет. 2021; 11(5): 875–886. doi: 10.15789/2220-7619-ROT-1785.
- Какорина Е.П., Залевская О.В., Голубев Н.А., Огрызко Е.В. Диамика инфекционной заболеваемости в Российской Федерации за 2000-2020гг. Инфекция и иммунитет. 2022; 5: 875–886. doi: 10.24412/2312-2935-2022-5-65-93.
- Серикова Е.Н., Семенов А. В., Останкова Ю. В., Тотолян Арег А. Метод выявления вируса гепатита B в плазме крови при низкой вирусной нагрузке с использованием ПЦР в режиме реального времени. Клиническая лабораторная диагностика. 2021; 66(1): 59–64. doi: 10.18821/0869-2084-2021-66-l-59-64.
- Волков А.Н., Начева Л.В. Молекулярно-генетические методы в практике современных медико-биологических исследований. Часть III: генодиагностика человека при решении медицинских задач. Фундаментальная и клиническая медицина. 2021; 6(3): 100–109. doi: 10.23946/2500-0764-2021-6-3-100-109.
- Фазылов В.Х., Еремеева Ж.Г., Тураев Р.Г. Пути оптимизации диагностики латентной формы гепатита В у доноров крови. Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2023; 12(1): 54–61. doi: 10.33029/2305-3496-2023-12-1-54-61.
- Song J.E., Kim D.Y. Diagnosis of hepatitis B. Ann Transl Med 2016; 4(18): 338. doi: 10.21037/atm.2016.09.11.
- Zanella I., Rossini A., Domenighini D., Albertini A., Cariani E. Quantitative analysis of hepatitis B virus DNA by real-lime amplification. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2002 Jan; 21(1): 22–26. doi: 10.1007/s10096-001-0648-2.
- Ивашкин В.Т., Маевская М.В., Жаркова М.С. и др. Клинические рекомендации Российского общества по изучению печени и Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению фиброза и цирроза печени и их осложнений. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2021; 31(6): 56–102. doi: 10.22416/1382-4376-2021-31-6-56-102.
- Tan B., Qin L., Chen C. et al. Multiplex fluorescence quantitative polymerase chain reaction for simultaneous detection of hepatitis B virus, hepatitis C virus and human immunodeficiency virus. Clin Lab. 2015; 61(1-2): 53–9. doi: 10.7754/clin.lab.2014.131102.
- Безуглова Л.В., Мануйлов В.А., Осипова Л.П. и др. Результаты испытаний реагентов для иммуноферментного определения субтипа HBsAg и генотипа вируса гепатита B в образцах плазмы крови человека. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2020; 38(4): 188–195. doi: 10.17116/molgen202038041188.
- Bland J.M., Altman D.G. Statistical methods for assessing agreement between two methods of clinical measurement. Lancet. 1986 Feb 8; 1(8476): 307–310.
Дополнительные файлы
