Совместное культивирование мастоцитов и кумулюсных клеток при синдроме поликистозных яичников

Обложка
  • Авторы: Валикова О.В.1,2,3, Здор В.В.1,4, Тихонов Я.Н.1, Борода А.В.5, Колбин К.Г.6
  • Учреждения:
    1. ФГБОУ ВО «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ
    2. ГБУЗ Краевая клиническая больница № 2
    3. Клиника «Пластэк хирургия»
    4. Клиника диабета и эндокринных заболеваний
    5. ФГБУН «Национальный научный центр морской биологии имени А.В. Жирмунского» Дальневосточного отделения Российской академии наук
    6. Клиника репродукции и генетики “Next Generation Clinic”
  • Выпуск: Том 27, № 3 (2024)
  • Страницы: 483-492
  • Раздел: КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
  • URL: https://journals.rcsi.science/1028-7221/article/view/267514
  • DOI: https://doi.org/10.46235/1028-7221-16802-CCO
  • ID: 267514

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) характеризуется нарушением менструального цикла, гиперандрогенией, морфологией поликистозных яичников. Распространенность СПКЯ у женщин репродуктивного возраста достаточно высокая, составляет от 6-9% до 19,9%. По современной номенклатуре аллергических заболеваний и реакций гиперчувствительности, к VI типу относится СПКЯ. Гены, связанные с врожденными иммунными реакциями, экспрессируются в кумулюсных клетках, соответственно кумулюсные клетки приобретают функции иммунных клеток в преовуляторном периоде и во время овуляции. Мастоциты вовлечены в патологию «женское бесплодие» при имплантации, беременности, потерях беременности. Количество мастоцитов в яичниках у пациенток с СПКЯ значительно ниже, в сравнении с яичниками пациенток без СПКЯ. При отсутствии у овулирующего ооцита кумулюсного оофорного комплекса, он остается неоплодотворенным. Целью исследования является изучение функциональных возможностей кумулюсных клеток яичника при СПКЯ по их цитокинпродуцирующей функции, в том числе при сокультивировании кумулюсных клеток с мастоцитами для выявления их взаимного влияния и роли в иммунопатогенезе синдрома поликистозных яичников. Использовалась постоянная линия тучных клеток человека HMC-1 (Human mast cell, ATCC, США) и первичная культура кумулюсных клеток. Ежедневное наблюдение за клетками осуществляли с помощью инвертированного микроскопа. Состояние кумулюсных клеток и мастоцитов определяли с помощью флуоресцентных красителей с последующей проточной цитометрией перед посадкой клеток и через 7 суток их сокультивирования. Исследовались уровни IL-6, IL-10, IFNã на 1-е, 3-и, 7-е сутки эксперимента. Выявлено, что как в монокультуре, так и при совместном культивировании клеток продолжается синтез цитокинов IL-6, IL-10, IFNã, но в разной степени выраженности и в зависимости от наличия СПКЯ. В постоянной линии тучных клеток происходит планомерное увеличение IL-6, IL-10, IFNã на 1-е, 3-и, 7-е сутки культивирования. В первые сутки эксперимента баланс Th1/ Th2 цитокинов при СПКЯ двукратно превышал аналогичный показатель у здоровых женщин, а в динамике соотношение нарастало и на 7-е сутки эксперимента достигло 3,83 раза выше показателя соотношения Th1/ Th2 цитокинов в группе контроля. Гиперпродукция IFNã мастоцитами была наиболее значима при сокультивировании их с кумулюсными клетками, так как в монокультуре тучные клетки синтезировали избыточно цитокин только двукратно от исходных значений IFNã, а среда с монокультурой кумулюсные клетки при СПКЯ практически не содержала IFNã к 7-м суткам эксперимента. Исследуемые цитокины являются регуляторами функции кумулюсных клеток яичника и факторами, повышающими компетентность ооцита, свидетельствующие о необходимости их коррекции, что позволит реально влиять на звенья патогенеза в СПКЯ в дальнейшем.

Об авторах

О. В. Валикова

ФГБОУ ВО «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ; ГБУЗ Краевая клиническая больница № 2; Клиника «Пластэк хирургия»

Автор, ответственный за переписку.
Email: renalex.99@mail.ru

младший научный сотрудник, врач-эндокринолог

Россия, Владивосток; Владивосток; Владивосток

В. В. Здор

ФГБОУ ВО «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ; Клиника диабета и эндокринных заболеваний

Email: renalex.99@mail.ru

д.м.н., ведущий научный сотрудник Центральной научно-исследовательской лаборатории, врач-эндокринолог

Россия, Владивосток; Владивосток

Я. Н. Тихонов

ФГБОУ ВО «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ

Email: renalex.99@mail.ru

старший преподаватель кафедры паталогической анатомии

Россия, Владивосток

А. В. Борода

ФГБУН «Национальный научный центр морской биологии имени А.В. Жирмунского» Дальневосточного отделения Российской академии наук

Email: renalex.99@mail.ru

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории клеточных технологий, заместитель директора по научной работе

Россия, Владивосток

К. Г. Колбин

Клиника репродукции и генетики “Next Generation Clinic”

Email: renalex.99@mail.ru

к.б.н., эмбриолог

Россия, Владивосток

Список литературы

  1. Адамян Л.В., Андреева Е.Н., Абсатарова Ю.С., Григорян О.Р., Дедов И.И., Мельниченко Г.А., Сутурина Л.В., Филиппов О.С., Чернуха Г.Е., Шереметьева Е.В., Ярмолинская М.И. Синдром поликистозных яичников в репродуктивном возрасте (современные подходы к диагностике и лечению): Клинические рекомендации (протокол лечения) // Проблемы эндокринологии, 2022, Т. 68, № 2. С. 112-127. [Adamyan L.V., Andreeva E.N., Absatarova Y.S., Grigoryan O.R., Dedov I.I., Melnichenko G.A., Suturina L.V., Filippov O.S., Sheremetyeva E.V., Chernukha G.E., Yarmolinskaya M.I. Clinical guidelines “Polycystic Ovary Syndrome”]. Problemy endokrinologii = Problems of Endocrinology, 2022, Vol. 68, no. 2, pp. 112-127. (In Russ.)]
  2. Elieh Ali Komi D., Shafaghat F., Haidl G. Significance of mast cells in spermatogenesis, implantation, pregnancy, and abortion: Cross talk and molecular mechanisms. Reprod. Immunol., 2020, Vol. 83, no. 5, e13228. doi: 10.1111/aji.13228.
  3. Goodman N.F., Cobin R.H., Futterweit W., Glueck J.S., Legro R.S., Carmina E.; American Association of Clinical Endocrinologists (AACE); American College of Endocrinology (ACE); Androgen Excess and PCOS Society (AES). American Association of Clinical Endocrinologists, American College of Endocrinology, and Androgen Excess and PCOS Society Disease State Clinical Review: Guide to the Best Practices in the Evaluation and Treatment of Polycystic Ovary Syndrome – Part 1. Endocr. Pract., 2015, Vol. 21, no. 11, pp. 1291-1300.
  4. Heider U., Pedal I., Spanel-Borowski K.. Increase in nerve fibers and loss of mast cells in polycystic and postmenopausal ovaries. Fertil. Steril., 2001, Vol. 75, no. 6, pp. 1141-1147.
  5. Jutel M., Agache I., Zemelka-Wiacek M., Akdis M., Chivato T., Del Giacco S., Gajdanowicz P., Gracia I.E., Klimek L., Lauerma A., Ollert M., O’Mahony L., Schwarze J., Shamji M.H., Skypala I., Palomares O., Pfaar O., Torres M.J., Bernstein J.A., Cruz A.A., Durham S.R., Galli S.J., Gómez R.M., Guttman-Yassky E., Haahtela T., Holgate S.T., Izuhara K., Kabashima K., Larenas-Linnemann D.E., von Mutius E., Nadeau K.C., Pawankar R., Platts-Mills T.A.E., Sicherer S.H., Park H.S., Vieths S., Wong G., Zhang L., Bilò M.B., Akdis C.A. Nomenclature of allergic diseases and hypersensitivity reactions: Adapted to modern needs: An EAACI position paper. Allergy. Eur. J. Allergy Clin. Immunol., 2023, Vol. 78, no. 11, pp. 2851-2874.
  6. Krishna A., Beesley K., Terranova P.F. Histamine, mast cells and ovarian function. Am. J. Endocrinol., 1989, Vol. 120, no. 3, pp. 363-371.
  7. Liu Z., de Matos D.G., Fan H.Y., Shimada M., Palmer S., Richards J.S. Interleukin-6: an autocrine regulator of the mouse cumulus cell-oocyte complex expansion process. Am. J. Endocrinol., 2009, Vol. 150, no. 7, pp. 3360-3368.
  8. Piccinni M.P. Role of T-cell cytokines in decidua and in cumulus oophorus during pregnancy. Gynecol. Obstet. Invest., 2007, Vol. 64, no. 3, pp. 144-148.
  9. Richards J.S. Genetics of ovulation. Semin Reprod. Med., 2007, Vol. 25, no. 4, pp. 235-242.
  10. Shimada M., Hernandez-Gonzalez I., Gonzalez-Robanya I., Richards J.S. Induced expression of pattern recognition receptors in cumulus oocyte complexes: novel evidence for innate immune-like functions during ovulation. Mol Endocrinol., 2006, Vol. 20, no. 12, pp. 3228-3239.
  11. Thibault C., Levasseur M.C. Ovulation. Hum. Reprod., 1988, Vol. 3, no. 4, pp. 513-523.
  12. Wang C., Feng G., Shu J., Zhou H., Zhang B., Chen H., Lin R., Gan X., Wu Z., Wei T. Cumulus oophorus complexes favor physiologic selection of spermatozoa for intracytoplasmic sperm injection. Fertil Steril., 2018, Vol. 109, no. 5, pp. 823-831.
  13. Wang J., Yin T., Liu S. Dysregulation of immune response in PCOS organ system. Front. Immunol., 2023, Vol. 14 , 1169232. doi: 10.3389/fimmu.2023.1169232.
  14. Weidinger S., Mayerhofer A., Frungieri M.B., Meineke V., Ring J., Kohn F.M. Mast cell-sperm interaction: evidence for tryptase and proteinase-activated receptors in the regulation of sperm motility. Hum. Reprod., 2003, Vol. 18, no. 12, pp. 2519-2524.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рисунок 1. Уровень цитокинов при совместное культивирование постоянной линии тучных клеток человека HMC-1 и кумулюсных клеток пациенток с синдромом поликистозных яичников

3. Рисунок 2. Уровень цитокинов при совместное культивирование постоянной линии тучных клеток человека HMC-1 и кумулюсных клеток здоровых доноров

Скачать (1007KB)
4. Рисунок 3. Показатели цитометрии при совместное культивирование постоянной линии тучных клеток человека HMC-1 и кумулюсных клеток здоровых доноров

5. Рисунок 4. Показатели цитометрии при совместном культивирование постоянной линии тучных клеток человека HMC-1 и кумулюсных клеток пациенток с синдромом поликистозных яичников


© Валикова О.В., Здор В.В., Тихонов Я.Н., Борода А.В., Колбин К.Г., 2024

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Согласие на обработку персональных данных с помощью сервиса «Яндекс.Метрика»

1. Я (далее – «Пользователь» или «Субъект персональных данных»), осуществляя использование сайта https://journals.rcsi.science/ (далее – «Сайт»), подтверждая свою полную дееспособность даю согласие на обработку персональных данных с использованием средств автоматизации Оператору - федеральному государственному бюджетному учреждению «Российский центр научной информации» (РЦНИ), далее – «Оператор», расположенному по адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А, со следующими условиями.

2. Категории обрабатываемых данных: файлы «cookies» (куки-файлы). Файлы «cookie» – это небольшой текстовый файл, который веб-сервер может хранить в браузере Пользователя. Данные файлы веб-сервер загружает на устройство Пользователя при посещении им Сайта. При каждом следующем посещении Пользователем Сайта «cookie» файлы отправляются на Сайт Оператора. Данные файлы позволяют Сайту распознавать устройство Пользователя. Содержимое такого файла может как относиться, так и не относиться к персональным данным, в зависимости от того, содержит ли такой файл персональные данные или содержит обезличенные технические данные.

3. Цель обработки персональных данных: анализ пользовательской активности с помощью сервиса «Яндекс.Метрика».

4. Категории субъектов персональных данных: все Пользователи Сайта, которые дали согласие на обработку файлов «cookie».

5. Способы обработки: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передача (доступ, предоставление), блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

6. Срок обработки и хранения: до получения от Субъекта персональных данных требования о прекращении обработки/отзыва согласия.

7. Способ отзыва: заявление об отзыве в письменном виде путём его направления на адрес электронной почты Оператора: info@rcsi.science или путем письменного обращения по юридическому адресу: 119991, г. Москва, Ленинский просп., д.32А

8. Субъект персональных данных вправе запретить своему оборудованию прием этих данных или ограничить прием этих данных. При отказе от получения таких данных или при ограничении приема данных некоторые функции Сайта могут работать некорректно. Субъект персональных данных обязуется сам настроить свое оборудование таким способом, чтобы оно обеспечивало адекватный его желаниям режим работы и уровень защиты данных файлов «cookie», Оператор не предоставляет технологических и правовых консультаций на темы подобного характера.

9. Порядок уничтожения персональных данных при достижении цели их обработки или при наступлении иных законных оснований определяется Оператором в соответствии с законодательством Российской Федерации.

10. Я согласен/согласна квалифицировать в качестве своей простой электронной подписи под настоящим Согласием и под Политикой обработки персональных данных выполнение мною следующего действия на сайте: https://journals.rcsi.science/ нажатие мною на интерфейсе с текстом: «Сайт использует сервис «Яндекс.Метрика» (который использует файлы «cookie») на элемент с текстом «Принять и продолжить».