Разработка модельного иммунофильтрационного анализа с использованием конъюгата на основе пероксидазы хрена

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Целью исследования явилась оптимизация условий для модельного иммуноанализа в формате иммунофильтрации с использованием диагностических реагентов на основе пероксидазы хрена. В качестве положительных сывороток в работе использовали остаточные образцы сыворотки крови пациентов «красной» зоны, с верифицированным диагнозом новой коронавирусной инфекции, в качестве отрицательных образцов были использованы сыворотки крови, полученные до 2019 года. Процедуру иммунофильтрационного анализа осуществляли с применением пула отрицательных и положительных сывороток крови.Были проведены исследования, опитимизирующие процедуру анализа и повышающие значимые характеристики теста. Результаты. Показано, что добавление додецилсульфата натрия до конечной концентрации 50 мкМ в субстратный буфер позволяет достичь более высокого аналитического сигнала и стабильного результата спустя 10 минут после окончания процедуры анализа. Оптимизированы такие условия иммунофильтрационного анализа как разведения диагностического реагента, объем вносимого образца и количество S-белка коронавируса, наносимого на нитроцеллюлозную мембрану. Определено, что с помощью иммунофильтрационного анализа возможно определение антител против S-белка коронавируса в разведении образца сыворотки более чем 1/1000. Результаты иммунофильтрационного анализа воспроизводят результаты ИФА.

Об авторах

Мария Дмитриева Кропанева

Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук – филиал ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»

Автор, ответственный за переписку.
Email: kropanevamasha@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-7068-2789

кандидат биологических наук , младший научный сотрудник лаборатории клеточной иммунологии и биотехнологии

Россия, 614081, Пермь, ул. Голева, 13

Павел Викторович Храмцов

Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук – филиал ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»

Email: khramtsovpavel@yandex.ru

кандидат биологических наук , старший научный сотрудник лаборатории клеточной иммунологии и биотехнологии, Институт экологии и генетики микроорганизмов

Россия, 614081, Пермь, ул. Голева, 13

Мария Станиславовна Бочкова

Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук – филиал ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»

Email: krasnykh-m@mail.ru

кандидат биологических наук , научный сотрудник лаборатории клеточной иммунологии и биотехнологии

Россия, 614081, Пермь, ул. Голева, 13

Михаил Борисович Раев

Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения Российской академии наук – филиал ФГБУН «Пермский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук»

Email: mraev@iegm.ru

доктор биологических наук , заведующий лабораторией клеточной иммунологии и биотехнологии

 

Россия, 614081, Пермь, ул. Голева, 13

Список литературы

  1. Adil B., Shankar K.M., Naveen Kumar B.T., Patil R., Ballyaya A., Ramesh K.S., Poojary S.R., Byadgi O.V., Siriyappagouder P. Development and standardization of a monoclonal antibody-based rapid flow-through immunoassay for the detection of Aphanomyces invadans in the field // J Vet Sci, 2013, Vol. 14, no. 4. pp. 413-419.
  2. Castro A.R., Mody H.C., Parab S.Y., Patel M.T., Kikkert S.E., Park M.M., Ballard R.C. An immunofiltration device for the simultaneous detection of non-treponemal and treponemal antibodies in patients with syphilis. STI, 2010, Vol. 86, no. 7, pp. 532-536.
  3. Ernst E., Wolfe P., Stahura C., Edwards K.A. Technical considerations to development of serological tests for SARS-CoV-2. Talanta, 2021, Vol. 224, pp. 121883. . doi: 10.1016/j.talanta.2020.121883
  4. Kalita P, Chaturvedula L.M., Sritharan V, Gupta S. In vitro flow-through assay for rapid detection of endotoxin in human sera: A proof-of-concept. Nanomedicine: NBM, 2017. Vol. 13, no. 4. pp.1483-1490.
  5. Khramtsov, P., Bochkova M., Timganova V, Zamorina S., Rayev M. Dot immunoassay for the simultaneous determination of postvaccination immunity against pertussis, diphtheria, and tetanus. Anal Bioanal Chem, 2017, Vol. 409, pp.3831–3842.
  6. Komkova M.A., Vetoshev K.R., Andreev E.A., Karyakin A.A. Flow-electrochemical synthesis of Prussian Blue based nanozyme 'artificial peroxidase'. Dalton Transactions, 2021, Vol. 50, no. 133, pp. 11385-11389.
  7. Li M., He Yif., Meng H., Dong Y., Shang Y., Liu H., Qu Z., Liu Y. Multiple effects of sodium dodecyl sulfate on chromogenic catalysis of tetramethylbenzidine with horseradish peroxidase. J. Dispers. Sci., 2019, Vol. 45, no 3. pp. 1409-1416.
  8. Oishee M.J., Ali T., Jahan N., Khandker S.S., Haq M.A., Khondoker M.U., Sil B.K., Lugova H., Krishnapillai A., Abubakar A.R., Kumar S., Haque, M. Jamiruddin, M.R. Adnan, N. Covid-19 pandemic: Review of contemporary and forthcoming detection tools. Infect. Drug Resist., 2021, Vol. 14, pp. 1049-1082. doi: 10.2147/IDR.S289629
  9. Panferov V.G., Safenkova I.V., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. The steadfast Au@Pt soldier: Peroxide-tolerant nanozyme for signal enhancement in lateral flow immunoassay of peroxidase-containing samples. Talanta, 2021, Vol. 225, pp. 121961.
  10. Pérez-López B., Mir M. Commercialized diagnostic technologies to combat SARS-CoV2: Advantages and disadvantages. Talanta, 2021, Vol. 225, pp. 121898.
  11. Robertson L.J., Moore J.S., Blighe K., Ng K.Y., Quinn N., Jennings F., Warnock G., Sharpe P., Clark M., Maguire K., Rainey S., Price R.K., Burns W.P., Kowalczyk A.M., Awuah A., Mcnamee S.E., Wallace G.E., Hunter D., Sager S., Chao Shern C., Nesbit M.A., Mclaughlin J.A.D., Moore T. Evaluation of the IgG antibody response to SARS CoV-2 infection and performance of a lateral flow immunoassay: cross-sectional and longitudinal analysis over 11 months. BMJ Open, 2021, Vol. 11, no. 6, pp. 048142.
  12. Ross G.M.S., Filippini D., Nielen M.W.F., Salentijn G.I.J. Unraveling the Hook Effect: A Comprehensive Study of High Antigen Concentration Effects in Sandwich Lateral Flow Immunoassays. Anal. Chem., 2020, Vol. 92, no. 23, pp. 15587-15595.
  13. Ross G.M.S., Salentijn G.I., Nielen M.W.F. A Critical Comparison between Flow-through and Lateral Flow Immunoassay Formats for Visual and Smartphone-Based Multiplex Allergen Detection. Biosensors (Basel), 2019; Vol. 9, no. 4, pp. 143.
  14. Tsang V., Greene R. M., Pilcher J. B. Optimization of the Covalent Conjugating Procedure (NaIO4) of Horseradish Peroxidase to Antibodies for Use in Enzyme-Linked Immunosorbent Assay. J. Immunoass., 1995, Vol. 16, no. 4. pp 395-418.
  15. Vandenberg O, Martiny D, Rochas O, van Belkum A, Kozlakidis Z. Considerations for diagnostic COVID-19 tests. Nat Rev Microbiol, 2021, Vol. 19, no. 3, pp. 171-183.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рисунок 1. Оценка влияния концентрации додецила сульфата натрия на аналитический сигнал иммунофильтрационного анализа для определения антител к SARS-CoV-2

Скачать (185KB)
3. Рисунок 2. Оптимизация состава блокирующего буфера для иммунофильтрационного анализа с использованием пероксидазы хрена

Скачать (250KB)
4. Рисунок 3. Оптимизация иммунофильтрационного анализа для определения антител против S-белка коронавируса

Скачать (278KB)

© Кропанева М.Д., Храмцов П.В., Бочкова М.С., Раев М.Б., 2023

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах