Исследование показателей окислительного фосфорилирования и гликолиза в CD4⁺T-лимфоцитах ВИЧ/ВГС коинфицированных иммунологических неответчиков с применением технологии seahorse

Окислительное фосфорилирование и гликолиз необходимы для выживания, деления и функционирования CD4⁺ Т-лимфоцитов. Однако косвенные данные свидетельствуют о том, что у ВИЧ-позитивных, коинфицированных вирусом гепатита С (ВГС), иммунологических неответчиков на антиретровирусную терапию изменены показатели метаболической активности CD4⁺ Т-клеток. Эти данные позволяют предположить, что в основе неспособности CD4⁺ Т-лимфоцитов иммунологических неответчиков продуктивно делиться и увеличивать свою численность после подавления вирусной репликации антиретровирусными препаратами может лежать метаболическая дисфункция. Ставшая доступной сравнительно недавно технология анализа внеклеточных потоков с использованием оборудования Seahorse XF дает возможность оценить метаболическую активность клеток. Целью настоящей работы была оценка эффективности окислительного фосфорилирования и гликолиза в CD4⁺ Т-лимфоцитах ВИЧ/ВГС коинфицированных иммунологических неответчиков с использованием технологии Seahorse. Исследованы образцы периферической крови пациентов двух групп: ВИЧ/ВГС коинфицированных иммунологических неответчиков с числом CD4⁺ Т-лимфоцитов менее 350/мкл крови и ВИЧ/ВГС коинфицированных иммунологических ответчиков с числом CD4⁺ Т-клеток более 500/мкл крови. В изолированных из крови CD4⁺ Т-лимфоцитах проведена оценка базальной и максимальной скорости потребления кислорода комплексами электрон-транспортной цепи митохондрий, а также скорость закисления среды протонами, формирующимися в процессе гликолиза. Установлено, что у ВИЧ/ВГС коинфицированных иммунологических неответчиков снижена как базальная, так и максимальная скорость потребления кислорода митохондриями CD4⁺ Т-клеток. Более того, в выделенных из крови CD4⁺ Т-лимфоцитах иммунологических неответчиков увеличена базальная скорость гликолиза. Можно предположить, что значительная часть CD4⁺ Т-лимфоцитов ВИЧ/ВГС коинфицированных иммунологических неответчиков находится в состоянии активации и готовности к гомеостатической пролиферации, что обостряет необходимость получения дополнительной энергии и макромолекул. Однако клетки оказываются неспособными скоординированно изменять свой метаболизм для удовлетворения данных потребностей. Выявленная нами дисрегуляция метаболических путей может вносить вклад в низкую регенеративную способность CD4⁺ Т-лимфоцитов у ВИЧ/ВГС коинфицированных иммунологических неответчиков.