Влияние мифепристона при остром стрессе на апоптоз тимоцитов мышей

В 1936 г. канадским патологом Гансом Селье в экспериментах с адреналэктомией было доказано участие гормонов коры надпочечников в развитии акцидентальной инволюции тимуса при стрессе. К 1970-м гг. среди исследователей доминировало представление о лизисе лимфоидных клеток глюкокортикоидами как основном механизме этих изменений. Позже рассматривалась и роль усиления миграции из тимуса Т-лимфоцитов, а также снижения миграции в него костномозговых предшественников, а с 1990-х гг. – индуцированного глюкокортикоидами апоптоза. Для выяснения вклада глюкокортикоидов в те или иные процессы в условиях целостного организма удобным инструментом в экспериментальной эндокринологии и фармакологии является введение самцам крыс или мышей антагониста глюкокортикоидных и прогестероновых рецепторов мифепристона, известного также как RU-38486 или RU-486. Цель работы – исследование влияния мифепристона при остром стрессе на апоптоз тимоцитов мышей. Экспериментальные исследования выполнены на самцах белых неинбредных мышей. Мифепристон вводили однократно подкожно за 30 мин до начала иммобилизации в дозе 50 мг/кг массы тела в растворе, приготовленном на стерильном официнальном оливковом масле. Контрольным мышам и животным группы сравнения вводили однократно подкожно эквивалентное количество растворителя препарата. Для экспериментального моделирования острого стресса использовали классическую модель 24-часового иммобилизационного стресса в положении на спине в пластиковом рестрейнере. Апоптоз тимоцитов оценивали с помощью проточной лазерной цитометрии с набором реактивов BD PE Annexin V Apoptosis Detection Kit I (BD Pharmingen™) методом, адаптированным для проточного лазерного цитометра Guava EasyCyte корпорации Millipore. Установлено, что острый стресс, вызванный 24-часовой иммобилизацией мышей, приводит к увеличению в тимусе общего относительного числа 7-AAD-позитивных клеток, а также доли клеток, окрашивающиеся 7-AAD, но не аннексином V-PE (ядерный дебрис, аннексин V(-), 7-AAD (+)). Введение мифепристона нивелирует эти изменения, что подтверждает участие глюкокортикоидов в увеличении числа тимоцитов в состоянии некроза. Число тимоцитов, находящихся в состоянии раннего апоптоза (т. е. аннексин V-PE-позитивных и 7-AAD-негативных), так же как и общее относительное число клеток, несущих фосфатидилсерин (аннексин V-PE-позитивные тимоциты) при остром стрессе и стрессе на фоне введения мифепристона, не отличаются от контроля.