Сравнительная характеристика содержания цитокинов в супернатантах нейтрофилов после инкубации их с суточными культурами S. aureus, имеющих и не имеющих ген spA

В работе приведены результаты определения цитокинов в супернатантах нейтрофилов цельной крови, стимулированных Staphylococcus aureus, имеющих и не имеющих ген spА.

В экспериментах использовали 20 клинических изолятов S. aureus, из них 10, имеющих ген spА, и 10, не имеющих ген spА, но при этом были отобраны штаммы, обладающие очень высокой способностью секретировать цитокиноподобные вещества (ЦПВ), как по уровню, так и по спектру цитокинов. Штаммы S. aureus разделяли на две группы в зависимости от spА-статуса, установленного с помощью банка данных по типированию генов spА (http://spa.ridom.de/).

Нейтрофилы доноров, выделяли на двойном градиенте фиколл-верографина, по стандартной методике, в концентрации 5 × 10⁶. Бактерии брали в соотношении 1:20 к нейтрофилам (в концентрации 10⁸ бактерий /мл).

Влияние стафилококков на секрецию цитокинов нейтрофилами определяли на приборе Magpix-100 (США), с использованием иммунофлюоресцентных мультиплексных наборов компании БиоРад (США) для детекции 17 цитокинов (G-CSF, GM-CSF, IFNγ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-17A, TNFα, MCP-1, MIP-1β) после 1 часа инкубации с нейтрофилами.

Установлено, что стафилококки, обладающие высокой степенью циткиноподобной активности, независимо от наличия или отсутствия у них гена spА, влияют на способность нейтрофилов секретировать цитокины. При этом S. aureus, имеющие ген spА, усиливают секрецию IL-1β, TNFα, IL-6 (провоспалительные цитокины), но при этом снижали секрецию IL-8, MIP-1β (хемокины). S. aureus, у которых нет генов к spА, обладают более разнообразным по спектру и силе воздействием на секрецию цитокинов нейтрофилами провоспалительных цитокинов, таких как IL-10, IL-12p70, IL-17A, IL-1β, IL-2, TNFα и росткового фактора G-CSF. Оба варианта стафилококков снижали секрецию IL-6.