Влияние мозаичного нокаутирования гена фитоиндесатуразы NtPDS на биосинтез каротиноидов у Nicotiana tabacum L.
- Авторы: Нежданова А.В.1, Слугина М.А.1, Кулакова А.В.1, Камионская А.М.1, Кочиева Е.З.1, Щенникова А.В.1
-
Учреждения:
- Институт биоинженерии Федерального исследовательского центра Фундаментальные основы биотехнологии Российской академии наук
- Выпуск: Том 70, № 6 (2023)
- Страницы: 601-611
- Раздел: ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
- URL: https://journals.rcsi.science/0015-3303/article/view/232770
- DOI: https://doi.org/10.31857/S001533032360033X
- EDN: https://elibrary.ru/CXCKHG
- ID: 232770
Цитировать
Аннотация
Каротиноиды крайне важны как незаменимые участники фотосинтеза и фотозащиты, а также роста, развития и стрессовой реакции растений. Фермент фитоиндесатураза (PDS; EC 1.3.5.5) катализирует первую фазу десатурации 15-цис-фитоина (предшественника всех каротиноидов). В работе впервые исследовано влияние нокаута PDS в геноме Nicotiana tabacum L. с использованием системы CRISPR-Cas9 на активность нижестоящих генов пути биосинтеза каротиноидов. Получены девять трансгенных линий табака с мозаичным редактированием гена NtPDS – три варианта инделей (350^351→ins^g#, 350^351→ins^t# и t351→del(1nt)#) в области экзона II, приводящих к синтезу укороченной, нефункциональной версии белка. Линии характеризовались пятнистой, зелено-белой пигментацией листьев, изменениями времени инициации цветения и морфологических характеристик, а также снижением содержания каротиноидов и хлорофиллов в ткани листа. Продемонстрировано увеличение уровня транскриптов гена фитоинсинтазы NtPSY2 у позднецветущих линий в сравнении с контролем. Редактированная линия L29 с самым поздним цветением характеризовалась существенным подъемом уровня транскриптов нижестоящих структурных генов каротиногенеза. Снижение содержания каротиноидов в листьях мозаично редактированных растений сопровождалось падением уровня экспрессии MADS-box гена NtSEP1, продукт которого предположительно участвует в регуляции транскрипции генов биосинтеза каротиноидов. Полученные данные могут быть использованы для дальнейших исследований регуляции биосинтеза каротиноидов и апокаротиноидов у Пасленовых культур.
Ключевые слова
Об авторах
А. В. Нежданова
Институт биоинженерии Федерального исследовательского центраФундаментальные основы биотехнологии Российской академии наук
Email: anna-negdanova@mail.ru
Россия, Москва
М. А. Слугина
Институт биоинженерии Федерального исследовательского центраФундаментальные основы биотехнологии Российской академии наук
Email: anna-negdanova@mail.ru
Россия, Москва
А. В. Кулакова
Институт биоинженерии Федерального исследовательского центраФундаментальные основы биотехнологии Российской академии наук
Email: anna-negdanova@mail.ru
Россия, Москва
А. М. Камионская
Институт биоинженерии Федерального исследовательского центраФундаментальные основы биотехнологии Российской академии наук
Email: anna-negdanova@mail.ru
Россия, Москва
Е. З. Кочиева
Институт биоинженерии Федерального исследовательского центраФундаментальные основы биотехнологии Российской академии наук
Email: anna-negdanova@mail.ru
Россия, Москва
А. В. Щенникова
Институт биоинженерии Федерального исследовательского центраФундаментальные основы биотехнологии Российской академии наук
Автор, ответственный за переписку.
Email: anna-negdanova@mail.ru
Россия, Москва
Список литературы
- Maoka T. Carotenoids as natural functional pigments // J. Nat. Med. 2020. V. 74. P. 1. https://doi.org/10.1007/s11418-019-01364-x
- Brausemann A., Gemmecker S., Koschmieder J., Ghisla S., Beyer P., Einsle O. Structure of phytoene desaturase provides insights into herbicide binding and reaction mechanisms involved in carotene desaturation. Structure // 2017. V. 25. P. 1222. https://doi.org/10.1016/j.str.2017.06.002
- Demmig-Adams B., Adams W.W. Antioxidants in photosynthesis and human nutrition // Science. 2002. V. 298. P. 2149. https://doi.org/10.1126/science.1078002
- Chen K., Li G.J., Bressan R.A., Song C.P., Zhu J.K., Zhao Y. Abscisic acid dynamics, signaling, and functions in plants // J. Integr. Plant Biol. 2020. V. 62. P. 25. https://doi.org/10.1111/jipb.12899
- Mashiguchi K., Seto Y., Yamaguchi S. Strigolactone biosynthesis, transport and perception // Plant J. 2021. V. 105. P. 335. https://doi.org/10.1111/tpj.15059
- Babu R., Rojas N.P., Gao S., Yan J., Pixley K. Validation of the effects of molecular marker polymorphisms in LcyE and CrtRB1 on provitamin A concentrations for 26 tropical maize populations // Theor. Appl. Genet. 2013. V. 126. P. 389. https://doi.org/10.1007/s00122-012-1987-3
- Wagner T., Windhövel U., Römer S. Bansformation of tobacco with a mutated cyanobacterial phytoene desaturase gene confers resistance to bleaching herbicides // Z. Naturforsch. C. J. Biosci. 2002. V. 57. P. 671. https://doi.org/10.1515/znc-2002-7-821
- Naing A.H., Kyu S.Y., Pe P.P.W., Park K.I., Lee J.M., Lim K.B., Kim C.K. Silencing of the phytoene desaturase (PDS) gene affects the expression of fruit-ripening genes in tomatoes // Plant Methods. 2019. V. 15: 110. https://doi.org/10.1186/s13007-019-0491-z
- Dong T., Chen G., Tian S., Xie Q., Yin W., Zhang Y., Hu Z. A non-climacteric fruit gene CaMADS-RIN regulates fruit ripening and ethylene biosynthesis in climacteric fruit // PLoS One. 2014. V. 9: e95559. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0095559
- Fujisawa M., Nakano T., Ito Y. Identification of potential target genes for the tomato fruit-ripening regulator RIN by chromatin immunoprecipitation // BMC Plant Biol. 2011. V. 11: 26. https://doi.org/10.1186/1471-2229-11-26
- Li S., Xu H., Ju Z., Cao D., Zhu H., Fu D., Grierson D., Qin G., Luo Y., Zhu B. The RIN-MC fusion of MADS-box transcription factors has transcriptional activity and modulates expression of many ripening genes // Plant Physiol. 2018. V. 176. P. 891. https://doi.org/10.1104/pp.17.01449
- Chen L., Li W., Katin-Grazzini L., Ding J., Gu X., Li Y., Gu T., Wang R., Lin X., Deng Z., McAvoy R.J., Gmitter F.G., Deng Z., Zhao Y., Li Y. A method for the production and expedient screening of CRISPR/Cas9-mediated non-transgenic mutant plants // Hortic. Res. 2018. V. 5: 13. https://doi.org/10.1038/s41438-018-0023-4
- Bánfalvi Z., Csákvári E., Villányi V., Kondrák M. Generation of transgene-free PDS mutants in potato by Agrobacterium-mediated transformation // BMC Biotechnol. 2020. V. 20: 25. https://doi.org/10.1186/s12896-020-00621-2
- Xu H., Xu L., Yang P., Cao Y., Tang Y., He G., Yuan S., Ming J. Tobacco rattle virus-induced PHYTOENE DESATURASE (PDS) and Mg-chelatase H subunit (ChlH) gene silencing in Solanum pseudocapsicum L. // PeerJ. 2018. V. 6: e4424. https://doi.org/10.7717/peerj.4424
- Zhang L., Gase K., Baldwin I., Gális I. Enhanced fluorescence imaging in chlorophyll-suppressed tobacco tissues using virus-induced gene silencing of the phytoene desaturase gene // Biotechniques. 2010. V. 48. P. 125. https://doi.org/10.2144/000113345
- DeBlasio S.L., Rebelo A.R., Parks K., Gray S.M., Heck M.C. Disruption of chloroplast function through downregulation of phytoene desaturase enhances the systemic accumulation of an aphid-borne, phloem-restricted virus // Mol. Plant Microbe Interact. 2018. V. 31. P. 1095. https://doi.org/10.1094/MPMI-03-18-0057-R
- Jacobs T.B., LaFayette P.R., Schmitz R.J., Parrott W.A. Targeted genome modifications in soybean with CRISPR/Cas9 // BMC Biotechnology. 2015. V. 15: 16. https://doi.org/10.1186/s12896-015-0131-2
- Nezhdanova A.V., Slugina M.A., Dyachenko E.A., Kamionskaya A.M., Kochieva E.Z., Shchennikova A.V. Analysis of the structure and function of the tomato Solanum lycopersicum L. MADS-box gene SlMADS5 // Vavilovskii Zhurnal Genet Selektsii. 2021. V. 25. P. 492. https://doi.org/10.18699/VJ21.056
- Filyushin M.A., Dzhos E.A., Shchennikova A.V., Kochieva E.Z. Dependence of pepper fruit colour on basic pigments ratio and expression pattern of carotenoid and anthocyanin biosynthesis genes // Russian Journal of Plant Physiology. 2020. V. 67. P. 1054. https://doi.org/10.1134/S1021443720050040
- Meugnier E., Rome S., Vidal H. Regulation of gene expression by glucose // Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab. Care. 2007. V. 10. P. 518. https://doi.org/10.1097/MCO.0b013e3281298fef
- Slugina M.A. Transcription factor RIPENING INHIBITOR and its homologs in regulation of fleshy fruit ripening of various plant species // Russian Journal of Plant Physiology. 2021. V. 68. P. 783. https://doi.org/10.1134/S1021443721050186
- Castelán-Muñoz N., Herrera J., Cajero-Sánchez W., Arrizubieta M., Trejo C., García-Ponce B., Sánchez M.P., Álvarez-Buylla E.R., Garay-Arroyo A. MADS-box genes are key components of genetic regulatory networks involved in abiotic stress and plastic developmental responses in plants // Front. Plant Sci. 2019. V. 10: 853. https://doi.org/10.3389/fpls.2019.00853
- Zhang Y., Cai W., Wang A., Huang X., Zheng X., Liu Q., Cheng X., Wan M., Lv J., Guan D., Yang S., He S. MADS-box protein AGL8 interacts with chromatin-remodeling component SWC4 to activate thermotolerance and environment-dependent immunity in pepper // J. Exp. Bot. 2023. erad092. https://doi.org/10.1093/jxb/erad092
- Cazzonelli C.I., Pogson B.J. Source to sink: regulation of carotenoid biosynthesis in plants // Trends Plant Sci. 2010. V. 15. P. 266. https://doi.org/10.1016/j.tplants.2010.02.003
- Quian-Ulloa R., Stange C. Carotenoid Biosynthesis and Plastid Development in Plants: The Role of Light // Int. J. Mol. Sci. 2021. V. 22: 1184. https://doi.org/10.3390/ijms22031184
- Yan P., Gao X.Z., Shen W.T., Zhou P. Cloning and expression analysis of phytoene desaturase and ζ-carotene desaturase genes in Carica papaya // Mol. Biol. Rep. 2011. V. 38. P. 785. https://doi.org/10.1007/s11033-010-0167-2
- Cui Y., Zhao J., Gao Y., Zhao R., Zhang J., Kong L. Efficient multi-sites genome editing and plant regeneration via somatic embryogenesis in Picea glauca // Front. Plant Sci. 2021. V. 12: 751891. https://doi.org/10.3389/fpls.2021.751891
- Shu K., Luo X., Meng Y., Yang W. Toward a molecular understanding of abscisic acid actions in floral transition // Plant Cell Physiol. 2018. V. 59. P. 215. https://doi.org/10.1093/pcp/pcy007
- Song Y.H., Ito S., Imaizumi T. Flowering time regulation: photoperiod- and temperature-sensing in leaves // Trends Plant Sci. 2013. V. 18. P. 575. https://doi.org/10.1016/j.tplants.2013.05.003
- Yang G., Li W., Fan C., Liu M., Liu J., Liang W., Wang L., Di S., Fang C., Li H., Ding G., Bi Y., Lai Y. Genome-wide association study uncovers major genetic loci associated with flowering time in response to active accumulated temperature in wild soybean population // BMC Genomics. 2022. V. 23: 749. https://doi.org/10.1186/s12864-022-08970-2
- Parenicová L., de Folter S., Kieffer M., Horner D.S., Favalli C., Busscher J., Cook H.E., Ingram R.M., Kater M.M., Davies B., Angenent G.C., Colombo L. Molecular and phylogenetic analyses of the complete MADS-box transcription factor family in Arabidopsis: new openings to the MADS world // Plant Cell. 2003. V. 15. P. 1538. https://doi.org/10.1105/tpc.011544
- Li X., Yu B., Wu Q., Min Q., Zeng R., Xie Z., Huang J. OsMADS23 phosphorylated by SAPK9 confers drought and salt tolerance by regulating ABA biosynthesis in rice // PLoS Genet. 2021. V. 17: e1009699. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1009699
- Zhao P.X., Zhang J., Chen S.Y., Wu J., Xia J.Q., Sun L.Q., Ma S.S., Xiang C.B. Arabidopsis MADS-box factor AGL16 is a negative regulator of plant response to salt stress by downregulating salt-responsive genes // New Phytol. 2021. V. 232. P. 2418. https://doi.org/10.1111/nph.17760